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Untitled Prezi

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by

Asma Gadria

on 26 February 2015

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Transcript of Untitled Prezi

La sensibilité
aux
antibiotiques
Historique
Le sol
Les eaux douces , de surface
La nourriture
Les selles humains

morphologique
biochimique
antigénique


1.Introduction
2.Etude bibliographique
3.Matériel et Méthodes
4.Resultats
5.Discussions
6.Conclusion et perspectives
Plan
1. Introduction
2013 - 2014
Étude moléculaire de la résistance naturelle aux beta-lactamines chez
Plesiomonas shigelloides
Matériel et Méthodes
morphologique
biochimique
antigénique

Centre National de Référence
Escherichia coli, Shigella
et
Salmonella
Unité des Bactéries Pathogènes Entériques
Présentée par GADRIA ASMA


1951
1959
1962
1961
1947
Souche :
C27


Pseudomonas shigelloides
Pseudomonas
michigani
Aeromonas shigelloides

Plesiomonas shigelloides
Taxonomie
Domaine
: Bacterie
Phylum
:
Proteobacteria
Classe
:
Gamma Proteobacteria

Famille
:
Enterobacteriaceae
Bacille court
Gram négative
Mobile
Caractères morphologiques

Aero-anaérobies facultatifs
Un PH entre 5 et 10
Salinité : 0 et 25 g\L

Caractères culturaux


Pouvoir pathogènes

Les sources d'isolements
Mécanismes d'infection

Caractères bactériologiques
Consommation des sources d’eaux contaminées, des poissons et des coquillages crus infectés.
Les maladies
Des gastro-entérites
Des pneumonies
Des méningites
Des pseudo-appendicites
Des septicémies ...etc
Diarrhées aqueuses
Fièvres
Douleurs abdominales
Vomissements
Des anorexies
Des amaigrissement
Des prolapsus anale
Des avortements
La mort
Les symptômes
Les facteurs de virulence
La sensibilité aux
antibiotiques
Résiste aux :

Ampicilline
β-lactamines
Sensible aux :

Rifampicines
Sulfamides
Chloramphénicol
Plesiomonas
shigelloides
Pathogène émergente , impliquée dans plusieurs
épidémies surtout dans les pays à climat tropical ou subtropical.
Représente la seule entérobactérie oxydase positive.
Responsable de gastro-entérites chez l’Homme qui se traduisent par des diarrhée aiguë.
Caractérisée par une grande diversité génotypique et nucléotidique au sein de son espèce.
Présente une résistance naturelle vis-à-vis des amino-penicillines et carboxy-pénicillines.
Synthèse bibliographique
Synthèse Bibliographique
Objectifs

Déterminer la localisation du gène
bla
-PLE-1 codant la résistance naturelle aux amino et carboxypénicillines chez
Plesiomonas Shigelloides.

P63,3

P25.99

P33.75

P25.99

P7.79

Les souches bactériennes de
Plesiomonas Shigelloides
Electrophorèse en champ pulsé
Southern Blot
Hybridation molèculaire
Méthodes
Préparation des Blocs d’ADN des souches de Plesiomonas Shigelloides
Lyse cellulaire
Digestion enzymatique avec l'enzyme I-CeuI
Caractères positifs
Caractères négatifs
L'electrophorése

L’enzyme I-CeuI
Classe des endonucléases.
Clivage au niveau d’une séquence spécifique des gènes de l’ARN ribosomal.
Enzymes à site de coupure rare permet d’obtenir
de fragments de haut poids moléculaires
Technique de Southern Blot
La préparation du gel avant transfert a été faite suite à une :
Dépurination
Dénaturation
Neutralisation
Transfert d’ADN par capillarité
Hybridation
Principe :
Détection des gènes à copie unique dans le génome complexe
L’association de façon spécifique et complémentaire entre deux molécules d’ADN monobrin .
Dépourvu d'une capsule et des spores

Caractères biochimiques
1
Préparation de la sonde
Extraction d'ADN avec le réactif "Instagene Matrix"
Amplification génique par
PCR
Amplification du
gène Bla-PLE-1
Amplification du
gène de
l’ARN
ribosomal 16s
Hybridation
Prè-hybridation
Deux Hybridations ; avec la sonde-PLE et la sonde 16s en même temps
Lavage de la membrane
Ajout de réactifs de détection
Révélation par chemiluminescence
Genre
: Plesiomonas
Espéce
: Plesiomonas shigelloides
Résultats
Discussions
Encadré par :
Pr.BARGUELLIL Farouk
Dr.ELHANI Dalele
T° optimale d'isolement :37°C
Gaz
H2S
Pigments
Oxydase
Catalase


Préparation des sonde de gene bla-PLE et de gene de l'ARNr 16s
L’adhésion
L’invasion
Les entrotoxines
Les cytolysines
Les plasmides
Caractéristiques morphologiques des colonies de Plesiomonas shigelloides
Morphologie des colonies de Plesiomonas shigelloides sur le milieu TCS

Hybridation
Figure.Hybridation avec la sonde du gène ribosomale 16S et la sonde du gène bla-PLE-1
Conclusion
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