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Enzimología de la replicación

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by

Jean Ramírez

on 3 September 2014

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Transcript of Enzimología de la replicación

Características generales de la replicación y Enzimología de la replicación
Replicación del DNA
Características generales
enzimología
Mecanismos de la reacción
Dirección de la síntesis
Puesto que la adición de nucleótidos se realiza
siempre a partir de 5'-trifosfatos y sobre un extremo
3'-OH libre, la hebra crece por su extremo 3', y se
dice que la síntesis transcurre en dirección 5' 3'.
Esto es válido para todas las DNA polimerasas,
tanto de procariotas como de eucariotas.


Cebador:
La síntesis de una nueva hebra de DNA
no puede comenzarse a partir de dos
nucleótidos, sino que requiere un fragmento de
hebra iniciador, denominado cebador, que aporte
un grupo 3'-OH libre. Se trata de un
oligonucleótido, por lo común RNA, que debe
estar apareado a la hebra progenitora de DNA, de
forma complementaria y antiparalela. Por tanto,
se puede decir que la replicación no es
autoiniciadora, sino que sólo elonga o alarga
moléculas preexistentes.
Se utiliza como sustratos el conjunto de los
cuatro dNTPs: dATP, dGTP, dCTP y dTTP. De cada uno de
ellos queda incorporado en el DNA nuevo la parte dNMP
de la molécula. A estos efectos, los dNMPs y dNDPs son inactivos
Sustratos:
cofactores:
Para una actividad óptima se requiere un ion metálico divalente como cofactor, asociado a los dNTPs.
Aunque in vitro este papel pueden desempeñarlo tanto Mn2+ como Mg2+, es este último el que actúa in vivo.
Molde o plantilla:
El orden correcto de incorporación delos dNMPs viene determinado por su complementariedad de bases con la secuencia de cada hebra de DNA, que actúa así como molde o plantilla.
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