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Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC).

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by

ornella melano

on 17 May 2014

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Transcript of Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC).

Fundamento:
Técnica que se basa en la separación de dos o mas analitos de una muestra, mediante la utilización de dos fases, una móvil y una estacionaria.
En el caso del HPLC, el fundamento es el anterior mencionado, pero con el agregado de una optimización en los resultados debido la elevación de la presión a la que se somete la corrida cromatografía y la fase estacionaria como componente activo complementando la fase móvil liquida referencial.

Recipientes para la fase móvi:
Son de vidrio o acero inoxidable que contienen el disolvente.

Equipo de HPLC:
Definición:
La cromatografía está formada por un grupo de técnicas, en las que se separan sustancias por medio de la modificación selectiva de las velocidades de desplazamientos, al poner en contacto una fase móvil con una estacionaria.
Esta técnica sirve para separar, identificar y cuantificar, componentes orgánicos e inorgánicos de una muestra.

Ventajas:
# Técnica sencilla y rápida.
# Se puede usar desde la escala microanalítica, hasta la industrial.
# Permite tener un registro continuo del análisis.
# Puede aplicarse a sustancias lábiles, por ser poco destructiva.
# Volúmenes de inyección mayores.
# Mayor precisión.
# No se limita a analitos volátiles.

Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC).
Sistema de Bombeo:
Las bombas que se emplean en HPLC son de tres tipos:
# Jeringa remachada con tuerca.
# Bombas de vaivén.
# Neumáticas, o de presión constante.
Sistema de Inyección de la Muestra
Este sistema es el encargado de colocar la muestra ya disuelta en el automuestreador o carrousel para luego hacerla pasar por las columnas.
Sistema de Inyección.
Columnas:
El material de las mismas es de acero inoxidable o vidrio.
La longitud de las columnas varía entre 10 y 30 cm y tienen un diámetro interno de 4 a 10mm.

Columnas:
Detectores:
# Detectores de absorbancia.
# Detectores de fluorescencia.
# Índice de refracción.
# Detectores electroquímicos.
# Detectores de dispersión de luz.
# Detectores por espectrometría de masas.
# Detectores de conductividad.
# Detectores de UV visible.

Imagen ilustrativa de HPLC:
Campos de aplicación:
# Fármacos.
# Bioquímica.
# Productos alimenticios: # Edulcorantes artificiales, antioxidantes, aflatoxinas, aditivos.
# Productos de la industria química.
# Contaminantes.
# Química forense
# Medicina clínica.

Conclusión:
# Podemos concluir que es una técnica que nos permite identificar, separar y cuantificar los componentes orgánicos e inorgánicos de una muestra.

# Ampliamente utilizada por los beneficios que presenta: no se limita a analitos volátiles, tiene alta especifidad, es de alta resolución, reproductibilidad y sobre todo rapidez.

# El HPLC es uno de los métodos analíticos más utilizados y destacados en el campo de la Industria alimentaria y Bromatología.
GRACIAS POR SU ATENCIÓN!
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