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HIBRIDACION

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by

Juliana Rodriguez

on 11 June 2014

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Transcript of HIBRIDACION

La
hibridación
es un fenómeno de importante aplicación practica en todas las áreas de la Biología Molecular e Ingeniería Genética, basada en el proceso de desnaturalización de dos cadenas sencillas de ADN y en la gran especificidad de la interacción entre bases complementarias.

Es la unión complementaria de ácidos nucléicos (ADN o ARN). Técnicas de hibridación se utilizan a menudo para detectar una molécula diana partiendo de una sonda complementaria a ella. Muchas técnicas moleculares están basadas en la hibridación. Entre ellas están técnicas tan importantes como la PCR o las tecnologías de arrays de ADN.
Los dos elementos básicos utilizados para realizar cualquier tipo de ensayo de hibridación son :

Principios básicos del ensayo de hibridación
Todos los ensayos de hibridación se basan en la mezcla de hebras sencillas de ácidos nucleicos.
Métodos de ensayo de hibridación
Aplicaciones clinicas
Método inicialmente empleado, hoy en día ha sido desplazado por otros métodos mas convenientes
Hibridación en fase liquida
Es un tipo de ensayo mas simple, que permite procesar varias muestras simultáneamente y facilita el control de la hibridación
Hibridación en soporte sólido
Es un tipo especializado de hibridación en soporte solido, en la que la sonda se aplica sobre muestras en su ubicación natural, generalmente aquellas preparadas para microscopía.
Hibridación
in situ
HIBRIDACIÓN MOLECULAR
para el diagnostico de enfermedades hereditarias
Julián Andraus
Zazy Tatis

Este método utiliza dos elementos básicos que le permiten identificar en un genoma, u otra muestra cualquiera de ácidos nucleicos, un secuencia particular, estos elementos son:

Secuencia diana
Sonda
Se pueden encontrar distintos métodos de ensayo de hibridación como lo son:
Hibridación en fase liquida
Hibridación en soporte solido
Hibridación in situ
La hibridación
La presencia de una
secuencia diana
en uno de los fragmentos
Una
sonda
, fragmento corto de ácido nucleico de secuencia conocida y complementaria a la secuencia diana
Podemos encontrar distintos tipos de ensayo de hibridación entre esos podemos encontrar los siguientes:

Hibridación en fase liquida
Hibridación en soporte solido
Hibridación in situ
Que es?
Consiste en utilizar una muestra de ADN o ARN en disolución y realizar su hibridación con las sondas, al estar ambas disueltas, la cinética es mas rápido, todas las moléculas dianas son igualmente accesibles, por lo que esta técnica es mas cuantitativa
Hibridación de fase liquida
Estos métodos han adquirido hoy en día un interés particular como herramienta valiosa para el análisis de ácidos nucleicos y el diagnostico de enfermedades moleculares con base genética
Este método se puede desarrollar de las siguientes maneras
-Hibridación “dot-blot” y “slot-blot”
-Hibridación de Southern
-Hibridación Northern
Hibridación en soporte solido
Hibridación “dot-blot”
Se presenta de dos tipos:
Hibridación in situ tisular
Hibridación in situ cromosómica
*Diagnostico de aneuploidias. (in-situ cromosomica)
*Diagnostico de Mutaciones Inestables. (southern)
*Detección de variaciones en el apareamiento entre las cadenas “normal” y mutada.
*Detección de cambios de conformación y
*Detección de productos génicos alterados *Enfermedades Cutaneas como acrodermatitis. (Northern)
acrodermatitis
Trisomía 21
Sindrome de Patau
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