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Protoplaste

No description
by

saied fafa

on 26 April 2014

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Transcript of Protoplaste

Réalisées par :
Saied Fafa
Laouini Fatma
Bouhani Sabrine
Guelmemi Hena
L'obtention de protoplastes se fait habituellement par digestion enzymatique de la paroi, grâce notamment à des enzymes telles que
la pectinase, la cellulase ou le lysozyme.
La digestion a lieu en milieu hypertonique car les cellules végétales, privées de leur "armature" pecto-cellulosique risquent l'éclatement. Le milieu d'obtention (liquide) est donc généralement enrichi en
glucides non-métabolisables tels que le mannitol ou l'inosito
l. D'autres glucides ou sels minéraux peuvent être utilisés pour diminuer l'activité de l'eau (voir également osmose) du milieu extra-cellulaire avec le milieu intracellulaire. La plasmolyse des cellules végétales permet également de "décoller" la membrane plasmique des cellules de la paroi. Ceci protège les cellules des fragments de cellulose pouvant perforer le protoplaste pendant la digestion.

Dans ce sujet on va s’intéressait sur les protoplastes
C’est quoi
« protoplaste »
un protoplaste est une cellule de plante, mais aussi de levure ou de bactérie
débarassée
de sa paroi squelettique
. Cellules plutôt rondes,
entourées de leur
membrane plasmique
.
Protoplaste
Les protoplastes sont des
cellules végétales sans paroi
, obtenues expérimentalement par
digestion de la paroi pecto-cellulosique
. Pour obtenir ces protoplastes et les maintenir en vie, il faut les préparer et les conserver dans un
milieu hypertonique
qui
plasmolyse
les cellules et leur permet de
ne pas éclater par entrée d'eau en l'absence de paroi.

Culture des protoplastes
Principe
:
La présence de la paroi pectocellulosique des cellules est une des barrières aux échanges d'information génétique. On peut séparer les cellules d'un tissu végétal grâce à l'action
d'enzymes généralement extraites de champignons
, qui dégradent la cellulose et les matières pectiques de la paroi.
Des agents stabilisants sont ajoutés au milieu pour empêcher l'éclatement de la cellule
. On obtient ainsi des cellules
« déshabillées »
, qui deviennent sphériques : les protoplastes.
Protoplaste
culture & fusion

Thank you!
Maintenant que peut on faire de ces protoplastes
!!!!!!!!!!!!!!!
La fusion
Au cours de la reproduction sexuée, les informations génétiques contenues dans le cytoplasme sont
transmises par la mère
. En revanche, la fusion des protoplastes conduit à une
hybridation des noyaux, mais aussi à celle des cytoplasmes
. Ceci est très intéressant pour le transfert et l'amélioration de caractères à hérédité cytoplasmique, comme la stérilité mâle. On parle
d'hybridation somatique
La reproduction sexuée
La fusion est obtenue
- On peut neutraliser la charge électrique
des protoplastes par
des cations Ca2+ et un pH élevé
.
Ensuite, on utilise
le polyéthylène glycol (PEG)
qui
provoque une forte agrégation des cellules et
déstabilise la membrane plasmique.

Après retour aux conditions initiales, les protoplastes
fusionnent


Cette technique, l'électrofusion, plus récente, utilise
des champs électriques intenses et de courte durée
, qui en
déstabilisant les membranes
entraînent la fusion des protoplastes.

Ce système semble être plus efficace.

L'hybridation somatique.

La propriété la plus importante des
protoplastes est leur capacité à
fusionner
entre eux lorsqu'ils sont placés
dans un
milieu approprié
. Cette technique
permet de
surmonter les barrières liées à la reproduction sexuée
et de créer de
nouvelles combinaisons entre noyau
et cytoplasme.


méthode
chimique
méthode
éléctrique
Fusion des noyeaux et de cytoplasmes
Echange de fragment d’ADN nucléaire

Lorsque la fusion des noyaux a lieu, il peut y avoir une
recombinaison plus ou moins importante entre les chromosomes
des deux parents. Ce phénomène peut être utilisé pour transférer des gènes nucléaires.
Fusion de cytoplasme
"les cybrides"
Echange de l’information génétique de mitochondrie et des chloroplastes

On utilise dans ce cas des
doses létales
d'irradiation pour les cellules du
parent donneur
, afin d'
inactiver complètement le noyau
Seuls seront transférés ses mitochondries et ses chloroplastes.
Le
parent receveur
peut en plus être traité à l'iodo-acétate, entraînant le
blocage de ses organites
. Ainsi, les cybrides issus de la fusion seront constitués du
noyau du parent receveur et des organites du parent donneur.
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