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分析化學之血液分析

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by

Ong Zhang

on 9 June 2013

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Transcript of 分析化學之血液分析

怎麼 從 血中 尋找 犯罪 的 證據 關於我們 過程 究竟誰是兇手呢? 如何從血液萃取DNA? RFLP Restriction Fragment Length Polymorphism
限制片段多形性 若以MstII限制對兩DNA做截切,會生成長短不同的三個片段 用限制酶將染色體切割為不同長度的多個片段,經電泳分離後,該圖譜即為DNA指紋 人類DNA中,某些序列(exon)是保守的,但大部分的序列(intron)是可以容許產生突變的。 而基因指紋即是利用幾個含有高變異性的introns所在位置(基因座)來進行RFLP分析。 個人的DNA指紋是獨特的因此血液是由S2所留下的的機率遠大於S1 RFLP技術運用限制酶將DNA之特定鹼基序列切斷,經電泳後不同長度之DNA片段會依長度排列,與具有放射線或螢光標識的探針雜合後,再感光測得圖譜。 接下來用幾組不同的探針,重覆上述的過程,每一種探針用於尋找DNA不同的部位並形成獨特的條碼,增加識別度。 鑑定應用 兩衣物上留下的血跡證物與嫌疑人的DNA指紋相符,表示該DNA為嫌疑人留下的機率非常高 鑑定結果分析 對於不同的基因座會有不同的”圖譜全對應機率”
(會將可能分辨不出的部分也計入機率計算中) 經由數個基因座的圖譜比對後算出所有圖譜都對應到的機率 若算出的機率夠小
(如機率僅百億分之一),則該嫌疑人確實為留下生物跡證的人的機率就非常高(大於地球總人口數) 脱氧核醣糖核酸 基因指紋 Only one-tenth of a single percent of DNA (about 3 million bases) differs from one person to the next.
In criminal cases, this generally involves obtaining samples from crime-scene evidence and a suspect, extracting the DNA, and analyzing it for the presence of a set of specific DNA regions (markers). RFLP STR Short Tandem Repeats 短相連重複序列 人與人之間99.7%以上的DNA序列相同,但仍有些許變異會以許多方式表現。 單一核苷酸的改變 重複序列次數的改變 每一基因位發生突變的機率約為0.001 除了突變之外,99.9%的機率STR都會穩定地遺傳給子代 A type of Variable Number of Tandem Repeats (VNTR) 分析方式 分析結果以尖峰(peaks)的位置來表示PCR產物的長度 將此長度與儀器內建對偶基因梯度標準品(allelic ladder)進行比對 可將各基因座鑑定結果均以數字(DNA片段重複的次數) 可分析 DNA 含量為0.1~1ng之間的檢體 特定的基因座 STR 片段訊號強度 STR-PCR 萃取血液中白血球細胞之 DNA 進行(PCR)核酸聚合酵素連鎖反應 進行電泳和對偶基因型的判定,鑑定 CODIS 13型 + 2 處基因位 例子:
在基因座 D13S317 ,A檢體的兩個片段分別為8和11重複片段,因此檢體於基因座 D13S217 的基因型為 8/11;B檢體的兩個片段則皆為12重複片段,基因型為12/12 基因座基因型之重複率公式 純合子頻率=p +p(1-p)θ
雜合子頻率=2pq(1-p)θ 他們約 有00.3%不同基因組合而成 STR 血液 〈AccuPrep®基因組DNA提取試劑盒〉
-A commercial kit from Bioneer

簡介: 操作簡易且能快速地從各種動物組織、全血或細胞樣本中萃取高純度DNA 。其原理為:使用一個結合柱,經過結合、洗滌、洗脫三種步簡單操作完成提取。

萃取產量:每200 μg全血可萃取出3 -6 μg,適合法醫分析鑑定自命案現場所採集有限的血液樣本 綜合討論 RFLP與STR-PCR之比較 就是你 八里雙屍命案偵查終結。
經DNA指紋比對,判定除被害者的血跡外,有與謝依涵DNA指紋相符之血跡證物,然而並無與其他嫌疑人之DNA指紋相符之血跡證物。
參酌DNA檢驗結果及其餘相關事證,檢方認定全案由謝依涵一人獨力犯案,依強盜殺人、詐欺、竊盜、傷害、偽造文書等罪將她起訴,並求處最嚴厲之刑。
而同案被告的咖啡店老闆呂炳宏等四人,檢方認為罪證不足、不起訴處分。 前言
B00504119
化學工程
大二
馬來西亞 (檳城)
B98B01069
生命科學
大四
台灣(頭份)
B98B01032
生命科學
大四
台灣(桃園)
B98B01091
生命科學
大四
宏都拉斯(聖佩德羅蘇拉)
B98B01038
生命科學
大四
台灣(台中) 真相永遠只有 個 2 鍵盤柯南 我們是 分析DNA的方法
RFLP & STR
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