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UNIVERSIDAD CENTRAL DE ECUADOR

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by

Andrea Galárraga Mora

on 29 October 2014

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Transcript of UNIVERSIDAD CENTRAL DE ECUADOR

HIPÓTESIS
PRESENTACIÓN DE LA ENFERMEDAD EN HUMANOS
SÍNTOMAS:
Campylobacter
PATOGENIA Y VIAS DE CONTAGIO
AVES
RESULTADOS GENERALES
METODOLOGÍA
Se obtuvieron 142 muestras, en los 5 mataderos industriales participantes.
Las muestras fueron procesadas bajo las mismas condiciones en laboratorio.
RESULTADOS EN BASE A LOS DATOS RECOLECTADOS
RESULTADOS POR EMPRESA
UNIVERSIDAD CENTRAL DE ECUADOR
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE Campylobacter spp. EN EL TRACTO GASTROINTESTINAL DE POLLOS FAENADOS EN MATADEROS INDUSTRIALES DE LA PROVINCIA DE PICHINCHA
AUTOR:
ANDREA GALÁRRAGA MORA

TUTOR:
DRA. Msc. MARÍA BELÉN CEVALLOS

Kampus:
doblado/ curvado
bacter:
vara
TAXONOMÍA
CARACTERÍSTICAS
(Horacio, Terzolo & Catena, 2007; On, 2001; Silva et al., 2011b; Vandamme et al., 1991; Wingstrand et al., 2006).
Reino:
Bacteria
Filo:
Proteobacteria
Clase:

Epsilon Proteobacteria
Orden:

Campylobacterales
Familia: Campylobacteraceae
Género:

Campylobacter

Especies:
C. coli
C. concisus
C. curvus
C. faecalis
C. fetus
C. gracilis
C. helveticus
C. hominis
C. hyointestinalis
C. jejuni
C. lanienae
C. lari
C. mucosalis
C. rectus
C. showae
C. sputorum
C. upsaliensis
Consiste en 2 géneros:
Campylobacter
Arcobacter
ESPECIES TERMOTOLERANTES
> Frecuencia
C. coli; C. jejuni
< Frecuencia
C. lari; C. upsaliensis
FUENTE: www.ncbi.com
((Silva et al., 2011b); Stanchi et al., 2007; Vandamme et al., 1991; On, 2001)
O2: 5%
N: 85%
CO2: 10%
Tº:
37-42ºC
pH:
6.5 - 7.5
ADAPTABILIDAD
(Caballero-Torres et al., 1990; K. M Keener et al., 2004; Garénaux et al., 2008; Silva et al., 2011a)
HUMANO
blogspot.com
COLONIZACIÓN
AGUA POCO CLORADA
CONTACTO CON MASCOTAS
CARNE DE POLLO POCO COCIDA
CONTACTO CON CARCASAS
1886
THEODOR ESCHERICH
las encontró en 35/72 niños con enteritis
Kist, 1985 en Taller internacional de Campylobacteriosis
Género Campylobacter
1963
Fué propuesto por primera vez por Sebald y Verón
1968
Dekeyser en Bruselas - Bélgica junto con Butzler logran aislar en heces de bovino
(On, 2011; Debruyne et al., 2005)
(On, 2011)
PLAGAS Y OTRAS AVES
EPIDEMIOLOGÍA

En
Sudamérica,
C. jejuni
es la especie bacteriana de la cual se tiene mayor información.
Aislado en todos los países de Sudamérica
C. coli,
se lo ha encontrado en agua de ríos, hígados de pollo destinados al consumo humano y diferentes reservorios animales domésticos y silvestres.
Aislado en todos los países latinoamericanos,
Según la
OMS

La

Campylobacteriosis

Brasil y Guatemala
, con el
9,9% y 12,1%
de aislamientos respectivamente en muestras de diarreas de niños menores a los 5 años

En Ecuador
existen muy pocos estudios relacionados a éste género bacteriano
No es posible aislar e identificar Campylobacter spp. en el tracto gastrointestinal de pollos faenados en mataderos industriales de la provincia de Pichincha
Ho: Se rechaza
H1: Se acepta

¿Con qué medio de cultivo se aisla Campylobacter spp.?
¿Con qué tipo de pruebas se identifican a colonias pertenecientes al género Campylobacter?
¿Cuáles son las características de manejo de las granjas de donde provienen los animales faenados en mataderos industriales de la provincia de Pichincha?

SISTEMATIZACIÓN DEL PROBLEMA
FORMULACIÓN DEL PROBLEMA
¿Cuál es la cantidad de aislamientos de Campylobacter spp. del tracto gastrointestinal de pollos faenados en mataderos industriales de la provincia de Pichincha?
Estrés Oxidativo
faenamiento
hospedador
Macrófagos
Peróxido de Hidrógeno
Radicales de Hidroxilo
Aniones de Superóxido
INVASIÓN: inóculo 10 UFC
7
7
(Pearson et al., 2007; Lapierre, 2013Rees, M.R.C.P, Soundain, Gregson, & Hughes, 1996)

(OMS, 2011; Horacio, Terzolo & Catena, 2007; Ministerio de Salud de Argentina, 2001; FAO & OMS, 2011; Pigrau et al., 1997; Vandamme et al., 1991)

CONTAMINACIÓN DE CARCASAS DURANTE FAENAMIENTO
Pequeños y delgados
Monótricos o Anfítricos
Escaldado
Desplume
Evisceración
Chilling
Silva et al., 2011b; Zilbauer et al., 2008; Bottieau et al., n.d.; Horacio, Terzolo & Catena, 2007;
Rees, M.R.C.P, Soundain, Gregson, & Hughes, 1996; Pearson et al., 2007

INTRODUCCIÓN
Campylobacter spp.
es causante de enfermedades en humanos.
Campylobacteriosis es una ETA
niños menores de 1 año
jóvenes adultos hasta los 25 años
Según estudios de Caso-Control entre el 50 - 70% de la Campilobacteriosis es por consumo de carne de pollo
Según Onderzoek, 2013 se ha vinculado a los mataderos de pollo de engorde con Campilobacteriosis humana.
Las aves de corral son un factor epidemiológico importante
Trabajadores
Consumidores
El aislamiento de Campylobacter spp. es la forma más eficiente de demostrar su presencia en carcasas
Durango, 2007 aisló Campylobacter jejuni y coli a partir carcasas utilizando protocolos que incluían varios medios de cultivo y varios días de espera para los resultados
MCCDA, el cual entrega resultados en 48 horas
En Ecuador la industria avícola al igual que el consumo de carne de pollo se ha incrementado.
En la Provincia de Pichincha se encuentran 4 de 5 productoras de pollos de engorde más grande del país
OBJETIVOS
GENERAL
Aislar e identificar Campylobacter spp. del contenido fecal de ciegos de pollos faenados en mataderos industriales de la provincia de Pichincha mediante métodos microbiológicos
ESPECÍFICOS
1. Identificar a colonias de Campylobacter spp mediante un método estandarizado
2. Utilizar pruebas bioquímicas primarias para aislar Campylobacter spp. a partir de resiembras de colonias ya identificadas.

3. Asociar las características de manejo de las granjas mediante un registro con los resultados obtenidos en laboratorio.
(Silva
et al
., 2011; Giacoboni
et al
., 2003;Wassenaar & Newell, 2000; Fernandez, 1992; Skerna
et al
, 1980)
DIAGNÓSTICO
En humanos debe ser evaluado máximo 2 horas después de la evacuación
Las muestras (pedazo de piel de cuello, un ciego)
HUMANOS
ANIMALES
Medio de cultivo altamente selectivo
MEDIOS DE CULTIVO
Medio Skirrow
Medio de Butzler
Medio de Preston
Medio Campy - Bap
Medio Cary Blair
Medio mCCDA
FAO, 2011; OMS, 2011
TRATAMIENTO
Antibioticos
Eritromicina
Tetraciclinas
Quinolonas
Hidratación
PREVENCIÓN
ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIÓN
RESISTENCIA A LOS ANTIMICROBIANOS
(García
et al.,
2009; Terzolo y Catena, 2007; Kuana, 2005; WHO, 2012)
Esta investigación buscó establecer, mediante la observación cualitativa si era posible el aislamiento de Campylobacter spp en el tracto gastrointestinal de pollos faenados en mataderos industriales de la Provincia de Pichincha.
ZONA DE ESTUDIO
1CT0
2CT0
3CT0
4CT0
5CT0
POBLACIÓN
Parvadas de aves de los mataderos industriales
Junio a Diciembre de 2013
PROCESAMIENTO DE LA INVESTIGACIÓN
Cada centro de faenamiento proporcionó la información sobre las características sanitarias de las granjas muestreadas
CAMPO
1 CIEGO
LABORATORIO
Según el protocolo de microorganismos
“Fod Campytrace Diensten van de Voorzitter Coordinatie Wtenschappelijk Onderzoek. De Zutter; Mieke)" de la Universidad de Gante
TOMA DE DATOS
FOTO: fmvz.uat.edu.mx
25 AVES
Etiqueta alfa-numérica
TINCIÓN GRAM
Fuente: Directa
Elaboración: La autora

DISCUSIÓN
Se obtuvieron 76 / 142 (54%)aislamientos de Campylobacter spp., durante el periodo de Junio a Diciembre de 2013, en 5 mataderos industriales en diferente ubicación geográfica de la Provincia de Pichincha.
Lucas et al., 2013,
3 mataderos clandestinos.
26,7% de aislamientos positivos al género, en contenido cecal y enjuague de canales de sacrificio, en Lima Metropolitana durante un periodo de 3 meses.
Velilla, Terzolo, & Méndez, 2011
3 mataderos de diferentes provincias de Argentina
62,1% de Aislamientos de Campylobacter spp.
metodología distinta
Consiguieron el doble de aislamientos a partir de contenido cecal versus un pool de hígado, vesícula biliar y bazo
RESULTADOS
PROTOCOLO
mCCDA se usa con mayor frecuencia para aislar e identificar colonias de
Campylobacter spp.
Ventajas:
Habib et al, 2011 demostró su eficiencia versus el Caldo Botton y el medio Ácido Graso Ciclopropano como Primo cultivo y para Cuantificación.
Puede sembrarse directamente
mCCDA tiene menor riesgo de Falsos Positivos
No requiere añadir sangre animal desfibrilada
Puede convertirse en fuente de contaminación
Verificación de pureza tarda mucho
ISO 10 272-2:2006 lo sugiere como Protocolo para aislamiento e Identificación
ENCUESTA
A pesar de las combinaciones antibióticas que usó cada empresa éste género sobrevivió en el Tracto Gastro Intestinal
CONCLUSIONES
• Los aislamientos positivos a Campylobacter spp. fueron 76 de 142 muestras analizadas. Por lo tanto se concluye que éste género bacteriano se encuentra presente en un 54% en el tracto gastrointestinal de pollos faenados en 5 mataderos industriales de la Provincia de Pichincha.
• De las 5 empresas participantes en la investigación 4 de ellas presentaron aislamientos superiores al 50%, mientras que una empresa obtuvo el 20%.

• La identificación de las colonias en el Laboratorio Bacteriológico no tuvo mayor dificultad por todas las ventajas que tiene el medio de cultivo utilizado (mCCDA) y el protocolo estandarizado que se manejó.
El uso de la tinción Gram modificada, permitió una correcta identificación del género bacteriano y facilitó el aislamiento de las colonias de Campylobacter spp.
La base de datos recolectada de cada empresa permitió visibilizar las condiciones de manejo de la industria avícola y mostró el tipo y la cantidad de antibióticos utilizados por cada granja.
RECOMENDACIONES
• Realizar una investigación con éstas cepas bacterianas para identificar la especie de Campylobacter spp. y la proporción de cada una de ellas.
• Hacer un estudio de la presencia de Campylobacter s.p. en los puntos críticos de las plantas de faenamiento y en carcasas
• Realizar estudios moleculares con el fin de determinar genes de resistencia a los antibióticos en las cepas colectadas en éste estudio
• Investigar la relación que existe entre los aislamientos y la resistencia a los antibióticos de Campylobacter spp. encontrados en humanos y animales
• Apoyar a las empresas de crianza y faenamiento de aves de corral para mejorar la inocuidad y calidad sanitaria de las carcasas destinadas al consumo
• Publicar los resultados de la presente investigación para generar interés en la realización de otras investigaciones más profundas sobre el tema.
• Implementar más tecnología y equipos indispensables para el laboratorio de bacteriología donde se realizó éste estudio para incrementar la eficiencia de los procesos y optimización de recursos
Octubre, 2014
higieneialiments.blogspot.com
Rafael Gamboa
Enfoque
MUESTRA
ALCOHOL 70%
POOL DEL CONTENIDO CECAL
Observación cualitativa
loudoun.nvcc.edu
REPIQUE
81m
39m
13m
5m
4m
85m
57m
57m
57m
ANTIBIÓTICOS UTILIZADOS POR EMPRESA
1CT0
2CT0
3CT0
4CT0
5CT0
Fuente: Directa
Elaboración: La autora

Fuente: Directa
Elaboración: La autora

Fuente: Directa
Elaboración: La autora

Fuente: Directa
Elaboración: La autora

Fuente: Directa
Elaboración: La autora

QUINOLONAS
C. Coli y C. jejuni
TETRACICLINAS
Son usadas en humanos y animales
Tetraciclina
Doxiciclina
Minociclina

AMINOGLUCÓSIDOS
La resistencia se da por:
Interferencia de la translocación de la cadena peptídica naciente del sitio ribosomal A al sitio P
Plásmidos
Estreptomicina
Espectinomicina
Eritromicina como droga de elección
BETALACTÁMICOS
Inactivación enzimática codificada cromosómicamente
Campylobacter spp
tiene resistencia intrínseca
bacitracina
novomicina
cefalotina
son susceptibles al Ácido Nalidíxico
Existen cepas mutantes que son resistentes a este grupo, en especial:
Enrofloxacina
Ciprofloxacina
FLUROQUINOLONAS
Ampliamente usadas en avicultura
Modificación del objetivo de gyrasa de ADN
Incremento del eflujo de FQ
La resistencia está dada por:
Modificación de la diana ribosómica
Aumento del flujo de salida de los antibióticos
MACRÓLIDOS
Tilmicosina, Azitromicina y Tilosina son ampliamente utilizados en la industria Avícola
Modificación de diana ribosomal
Aumento del Flujo de salida
Alteración de la Permeabilidad de la Membrana celular
Siendo mayor en países en vías de desarrlo (Alfredson y Kordik, 2007)
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