Loading presentation...

Present Remotely

Send the link below via email or IM

Copy

Present to your audience

Start remote presentation

  • Invited audience members will follow you as you navigate and present
  • People invited to a presentation do not need a Prezi account
  • This link expires 10 minutes after you close the presentation
  • A maximum of 30 users can follow your presentation
  • Learn more about this feature in our knowledge base article

Do you really want to delete this prezi?

Neither you, nor the coeditors you shared it with will be able to recover it again.

DeleteCancel

PRUEBAS MOLECULARES PARA DETECTAR VPH

No description

Comments (0)

Please log in to add your comment.

Report abuse

Transcript of PRUEBAS MOLECULARES PARA DETECTAR VPH

CAPTURA HÍBRIDA DE SEGUNDA GENERACIÓN
(CH2)
* FDA 2003

-Se basa en la hibridación utilizando sondas de RNA

- 13 HR (16,18,31,33,35,39,45,51,5256,58,59 y 68)
CH3
- Permite detectar y discriminar infecciones por tipos virales relacionados con el VPH 18 Y 45 o 16, 31, 35.

- Especifico de esto tipos de virus, elimina la reacción cruzada

- Especificidad se logra con el uso adicional a la sonda de oligononucleotidos marcados con biotina
HISTORIA
- A principios de la década de los 80, inicia el desarrollo de las tecnologías de ADN para identificación VPH

- 2003 FDA, aprobó CH2. En mujeres mayores de 30 años.
Sensibilidad 50 a 85-100%

* no menores 30 *


Reacción en cadena de polimerasa PCR
- Los métodos basados en PCR, la sensibilidad y especificidad de la técnica, depende de factores como: el juego de oligonecleotidos empleado, el tamaño del fragmento amplificado y la habilidad de detectar múltiples tipos virales.

- Oligonucleotidos dirigidos L1
The AMPLICOR HPV
- Cualitativa in vitro

- Utiliza la amplificación de ADN mediante PCR e hibridación de regiones amplificadas, para 13 tipos de VPH (mismos que CH2)

-Alta sensibilidad para NIC 2 Y 3
PRUEBAS MOLECULARES PARA DETECTAR VPH
Virus del Papiloma Humano
- DNA sin envoltura que contiene cápside proteica

- Células epiteliales

- 30 a 40 tipos infectan la parte inferior del tracto genital
PRUEBAS MOLECULARES
CH2



PCR
Dr. José Manuel Solórzano Camacho
- Genes tempranos E
- Genes tardíos L

Los genes tempranos se expresan en las
células basales
, mientras los tardíos en las más
superficiales
-
+ 100 tipos

- LR: 6 Y 11
- HR: 16 Y 18

16,18,45,31.

16 - 40 - 70%
18 - 25%

- Fácil de aplicar

- No laboratorio especializado

- Sensibilidad 96 a 98%

- Positivo o negativo

- Falsos negativos 1 a 8% (umbral de detección es de lpg/ml, 5900 genomas de VPH)
Otros:

- Contaminación de la muestra

- Reacciones cruzadas

- RCS
Los dos sistemas mayormente aceptados y validados por la unión Europea son:

* The AMPLICOR HPV (AMP)

* Prueba para la genotipificación lineal Array HPV


LINEARARRAY
-Es el sistema
en la actualidad más sensible y especifico
para detectar infección latente, subclinica y activa del VPH.

-37 Genotipos de bajo y alto riesgo

-Permite conocer el tipo especifico del VPH y las infecciones múltiples

-Sensibilidad 98% y especificidad 99%

-Ausencia de reactividad cruzada y excelente reproducibilidad 99.8%

- 10 Copias
INDICACIONES
1. Tamizaje junto con citología

2.Confirmación de citologías no concluyentes ASC-US

3.Colposcopia no concluyente

4.Determinar la persistencia de genotipos de alto riesgo asociados con progresión de lesiones cervicales

5.Establecer la efectividad del tratamiento

6.Detectar genotipos específicos previos y posterior a la aplicación de una vacuna




BIBLIOGRAFÍA
- John O. Schorge MD,et al, Williams Ginecología,Mc Graw Hill, Dallas Texas,2009.

- Attila T. Lorincz MD, Colposcopy, Principels and Practice,capitulo 5
Objetivo. La infección causada por el VPH se ha incrementado en los últimos 20 años y las tasas de mayor prevalencia son en
adolescentes y mujeres jóvenes. El objetivo de este estudio fue el de conocer la prevalencia y distribución de VPH de alto riesgo en
mujeres de 25 a 34 años con resultado de citología anormales.
Material y métodos. Se realizó un estudio observacional, transversal, descriptivo y clínico, incluyendo a 84 pacientes de 25 a 34
años de edad, con un resultado de citología anormal a las cuales se les practico genotipificación de 14 genotipos del Virus del
papiloma humano (VPH) de alto riesgo oncológico mediante la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) con sistema COBAS
4800.
Resultados. El estudio citológico reporto a 15 (17.85%), mujeres con Atipia escamosa cervical (ASC-US), 64 (76.35%) con Lesión
Intraepitelial de Bajo Grado (LEIBG), cuatro (4.7%) con Lesión Intraepitelial de Alto Grado (LEIAG) y una (1.1%) con Células
Glandulares Atípicas (AGC). En cuanto a los resultados de genotipificación, se obtuvo lo siguiente: 66 casos (78.5%) fueron positivos
para el panel o “pool” de alto riesgo (12 genotipos de alto riesgo), seis fueron positivos para el VPH-16 (7.14%), cinco positivos para
el panel de Alto Riesgo (AR) más VPH-16 (5.95%), tres fueron positivos al VPH -18 (3.5%) y cuatro casos fueron negativos (4.76%).
Al correlacionar las alteraciones citológicas con el tipo de VPH, se encontró que de los 15 ASC-US, 13 fueron positivas al panel de
AR y 2 fueron negativas. De las 64 LIEBG: 51 fueron positivas al panel AR, 6 positivas al VPH-16, 3 positivas al VPH 18, 2 positivas
al pool de AR más VPH-16 y 2 negativas. De las 4 LIEAG, 1 fue positiva al pool de AR y 3 positivas al pool AR más VPH-16. La
paciente que presento AGC fue positiva al panel de AR.
Conclusiones. La prevalencia de VPH de alto riesgo oncogénico es alta (95%) en las mujeres jóvenes con resultados anormales de
citología. Este estudio muestra que la infección por varios tipos de VPH (“pool” de 12 genotipos) se encontró en 78.57% de los
casos, mientras que los genotipos 16 y 18 sólo se encontraron en el 16.66% de las citologías anormales.
"Genotipificación del virus del papiloma Humano de Alto Riesgo (VPH-HR)mediante PCR en pacientes de 25 a 34 años con resultado de citología anormal"

Concepción Amador Pérez, José Luis López Velázquez,y col. Clinica de displasias del H.R Lic. Adolfo López Mateos, Octubre 2013
Full transcript