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Copy of Método de tinción de giemsa para leishmaniasis

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by

Ronald Farfan Zevallos

on 26 May 2014

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Transcript of Copy of Método de tinción de giemsa para leishmaniasis

Materiales
Introduccion
La leishmaniasis es una zoonosis resultado del parasitismo a los macrófagos del hospedero vertebrado por un protozoario flagelado del género leishmania, introducido al organismo por la picadura de un insecto flebótomo(Género Lutzomyia) la leishmaniasis se divide en tres tipos visceral ,cutánea y mucosa.

Ciclo Biologico
Integrantes
Prissila Tuesta Velazco
Ronald Farfan Zevallos
Cristian Quispe Gamarra
Método de tinción de giemsa para leishmaniasis
Vector (Morfologia)
Amastigota : (A=sin; mastig=flagelo); forma intracelular, oval o redondeada de dos a seis micras, se encuentran en organos afectados del humano.

Promastigota : (pro=antes; mastig=flagelo); forma alargada movil de 15 a 20 x 5 a 7 micras.
Especies de Leishmania
Existen 29 tipos de leishmania de las cuales 21 han aislado en humanos:
-Leishmania(Leishmania)chagasi
-Leishmania(Viannia)braziliensis
-Leishmania(Leishmania)amazonesis
-Leishmania(Viannia)lainsoni
-Leishmania(Viaña)guyanensis
La técnica de Giemsa está formada por varios colorantes: los tintes neutros utilizados
combinan el azul de metileno como tinte básico y la eosina como tinte ácido, lo que da una
amplia gama de colores. El azul de metileno es un colorante metacromático, de ahí que
muchas estructuras se tiñan de púrpura y no de azul. El pH de la solución de coloración es
crítico, entre 6.4 y 6.9 por lo que se debe ajustar idealmente según diversos fijadores.


Bibliografia
http://web.oie.int/esp/normes/mmanual/pdf_es_2008/2.01.08.%20Leishmaniosis.pdf
http://wiki.fisiologia.me/images/4/49/Cris2.pdf
http://books.google.com.pe/books?id=u_XTACDfW5MC&pg=PA37&lpg=PA37&dq=leishmaniasis+tincion+de+giemsa&source=bl&ots=XINuzae2JG&sig=1c14yZSbZ7GzmDfZvihgoHLvFt8&hl=es-419&sa=X&ei=2ItiU5HHDqG_8QHvoYHwDg&ved=0CDYQ6AEwAg#v=onepage&q=leishmaniasis%20tincion%20de%20giemsa&f=false
http://books.google.com.pe/books?id=kHQYg3RcgWcC&pg=PA26&dq=giemsa&hl=es-419&sa=X&ei=AINiU_3GIufz8AHW4YGACQ&ved=0CCwQ6AEwAA#v=onepage&q=giemsa&f=false
http://www.acin.org/acin/new/Portals/0/Templates/Guia%20Leishmania.pdf
http://www.imt.edu.py/admin/uploads/Documento/manual_leish.pdf
http://www.panreac.es/pdf/pdf01/Tincion-de-GIEMSA.pdf
http://www.ops.org.bo/textocompleto/nleis30989.pdf
http://www.ins.gov.co/temas-de-interes/Leishmaniasis%20viceral/02%20Clinica%20Leishmaniasis.pdf
Colorantes y Coloraciones - Tomas Agurto Saenz

Resultados
Con la tincion de giemsa se aprecia :
Citoplasma: rosa
Núcleos: azul
Eritrocitos: rosa - naranja
Gránulos de las células cebadas: púrpura
Bacterias: azul
Parásitos: azul

Con tinción Giemsa en caso de la leishmaniasis se aprecian :
Un gran núcleo y un cinetoplasto pequeño, ambos de color púrpura, y un filamento delgado que une cinetoplasto y cuerpo basal, éste último apenas un punto visible.
El cinetoplasto es una subestructura de la gran mitocondria, con DNA único y se encuentra asociado estrechamente al bolsillo flagelar y al cuerpo basal del flagelo. La presencia del cinetoplasto da el nombre al grupo de protozoos incluidos en el orden Kinetoplastida.

Tincion de Giemsa
La tinción de Giemsa es un método habitual para el examen de frotis sanguíneos, cortes histológicos y otro tipo de muestras biológicas. Este método tiene utilidad sobre todo para poner de manifiesto las rickettsias localizadas dentro de las células huéspedes. La coloración de giemsa se emplea también para teñir frotis de sangre en el examen para protozoos. Se puede emplear, como variaciones, otras coloraciones como es la técnica de citoconcentración para parásitos sanguíneos, la cual tiene un bajo coste y ofrece la posibilidad de aislar e identificar en el mismo sedimento el parásito principath
Preparacion de la muestra
Para muestras histológicas, los mejores resultados se obtienen en muestras fijadas con formol, incluidas en parafina y cortadas entre 3 y 6 micras. Las reacciones metacromáticas, se definen como colorantes que al entrar en contacto con la sustancia a teñir cambian su color original. el prototipo de esta característica son el azul de metileno como bien dice la bibliografía y el azul de tolouidina. Su aspecto en el corte histologico es púrpura - rojizo. Es usado además de los extendidos de sangre en los cortes de cartílago Hialino por la gran carga de glucosaminoglucanos ácidos ya que están dos sustancias son básicas.
Procedimiento

1.
Desparafinar e hidratar.
2.
Aplicar solución de trabajo de Giemsa durante 10 minutos.
3.
Deshidratar con alcohol absoluto, 3 cambios.
4.
Aclarar con xilol, 3 cambios.
colorantes mas histologicos mas comunes comunes
azu brillante de comassie
azu de metileno
azul nilo
bismar brown
bromuro de etidio
carmin
crista violeta
DAPI
eosina
fucsina acida
hematoxilina
hoechst
lugol
naranja de acridina
plata
rodamina
rojo neutro
rojo nilo
safranina
sudan
tetroxido de osmio
verde metilo
verde malquita
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