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tecnica de vertido en placa

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by

Miguel Del valle

on 24 October 2016

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Transcript of tecnica de vertido en placa

TÉCNICA DE VERTIDO EN PLACA
Material y equipo
Procedimiento
Resultados
Lógicos (elegir las que están en rango).
Estadísticos (considerar los duplicados y el mayor número posible de datos) .
Funcionales (a falta de datos representativos, tomar los mejores disponibles).
Que es ?
Esta técnica se emplea para aislar microorganismos o para realizar un recuento de estos en una muestra de interés.
Incubadora con termostato que evite variaciones mayores de ± 1.0ºC, provista con termómetro calibrado.
Contador de colonias de campo oscuro, con luz adecuada, placa de cristal cuadriculada y lente amplificador.
Registrador mecánico o electrónico.
Microscopio óptico.
Baño de agua con termómetro, que mantenga la temperatura a 45 ± 1.0 °C.
Utensilios estériles (cuchillo, tenedor, cuchara, pinzas) para tomar muestra.
Pipetas bacteriológicas de 10 mL, estériles, con algodón en el extremo superior (las necesarias, de acuerdo con las diluciones).
Pipetas bacteriológicas de 1 mL, estériles, con algodón en el extremo superior (las necesarias, de acuerdo con las diluciones).
Varillas de vidrio estériles (en escuadra o “L”).
8 a 12 cajas Petri estériles.
Stomacher (homogeneizador peristáltico).


1
2
3
4
Distribuir las cajas estériles en la mesa de trabajo de manera que la
inoculación y la adición de medio de cultivo se puedan realizar cómoda y
libremente. Marcar las bases de las cajas con los datos pertinentes antes de
inocular.
Inocular por duplicado, 1 mL de la dilución correspondiente en cada caja,
mediante pipeta estéril. Agregar de 18 a 20 mL del medio fundido y mantenido
a 45 °C. Para homogenizar, mezclar mediante 6 movimientos de derecha a
izquierda, 6 en el sentido de las manecillas del reloj, 6 en sentido contrario y 6
de atrás a adelante, sobre una superficie lisa y horizontal hasta lograr la
completa incorporación del inóculo en el medio; cuidar que el medio no moje la
cubierta de las cajas. Dejar solidificar. El tiempo transcurrido desde el momento
en que la muestra se incorpora al diluyente hasta que finalmente se adiciona el
medio de cultivo a las cajas, no debe exceder de 20 minutos.
Incluir una caja sin inóculo por cada lote de medio y diluyente preparado como
testigo de esterilidad.
Incubar las cajas en posición invertida durante el tiempo y a la temperatura
que se requiera, según el tipo de alimento y microorganismo de que se trate.
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