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Prevalência do grupo de genes da evasão imune em Staphylococ

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Akim Nobre

on 7 January 2016

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Transcript of Prevalência do grupo de genes da evasão imune em Staphylococ

Prevalência do grupo de genes da evasão imune em Staphylococcus aureus CC398
CUNY et. al., 2015
Adaptado por Akim Nobre
Introdução
O Staphylococcus aureus resistente a meticilina associada à pecuária (LA-MRSA)
Complexo clonal CC398, é amplamente disseminado como colonizador de vários animais
Na Europa e na América do Norte, tornou-se o MRSA mais prevalente em equinos
Introdução
O MRSA CC398 é um colonizador freqüente dos seres humanos com exposição ocupacional ao gado
A disseminação entre a comunidade parece ser rara
A infecção na ausência de contato animal sugere uma possível infecção humano-humano
Introdução
Agente causador de infecções em seres humanos, em particular aqueles que afetam a pele e tecidos moles
Septicemia e pneumonia associada à ventilação em pacientes hospitalizados
Introdução
Análise filogenética de polimorfismos simples (SNPs), demonstrou associação entre um grupo (clado) ancestral humano adaptado e um grupo animal que evoluiu a partir de um grupo humano sensível à meticilina
A adaptação aos animais foi obviamente associada a alterações do genoma, incluindo a perda e aquisição de elementos genéticos, tais como profagos de integrase do grupo 3 (
φSaint3
), que contém o agrupamento dos genes de evasão imune (IEC) (Schijffelen et al., 2010).
Introdução
Profagos φSaint3 geralmente são realizados por S. aureus adaptados aos seres humanos (McCarthy e Lindsay, 2013) e integram-se ao gene da B-hemolisina.
Os genes da evasão imune do IEC são
sak
, estafiloquinase;
chp
, proteína inibidora da quimiotaxia; e
scn
, proteína inibidora do complemento estafilocócico, assim como genes de enterotoxinas específicas, tais como
sea, sep, sek e seq
(Van Wamel et al. 2006; Goerke et al, 2009)
Introdução
Parece provável que a expressão de superantígenos tais como sea promova a sobrevivência de S. aureus no hospedeiro, comprometendo a resposta dos neutrófilos, o que leva a um nicho de proteção.
Em resposta ao uso de antibióticos na criação de gado, a adaptação ao hospedeiro animal é muitas vezes acompanhada pela aquisição de genes de resistência, tais como tet (M) e mecA.
Materiais e Métodos
MRSA de animais: um total de
151
isolados foram incluídos neste estudo:
94
de suínos em 47 explorações no noroeste da Alemanha (Cuny et al, 2009)
61
MRSA de cavalos que se originaram a partir de infecções em ambientes sob cuidados veterinários na Áustria, Bélgica, Alemanha e Países Baixos.
Materiais e métodos
Os MRSA isolados da colonização nasal dos seres humanos com exposição profissional a animais
(n = 207)

Incluíram
138
isolados de produtores de suínos e
22
veterinários que visitaram explorações de suínos coletados em 2008 e 2009 (Cuny et al., 2009);
Houve um adicional de
47
isolados provenientes de indivíduos que trabalharam em clínicas de equinos localizadas no norte da Alemanha entre 2012-2014.
Materiais e métodos
Também foram incluídos MRSA CC398 a partir de diferentes tipos de infecções em seres humanos;
Estes isolados (n =
96
) foram originados a partir da amostra de isolados de MRSA (n =
9950
), que foram enviadas para o Centro de Referência Nacional da Alemanha para staphyilococos e enterococos entre 2006 e 2013 para caracterização da cepa e tipagem.
Eles foram classificados como CC398 por meio de tipagem spa (se necessário, seguido por MLST)
Materiais e Métodos
Dados sobre possíveis contatos entre animais e os pacientes incluídos e seus familiares não estavam disponíveis.
Para efeito de comparação, observamos
15 MSSA
isolados atribuídos a CC398
(15 ao todo entre
3198
MSSA isolados de vários tipos de infecções).
Materiais e Métodos
Isolamento de MRSA de swab nasal, diagnósticos primários e posterior caracterização por meio de tipagem spa, atribuição a CC398, e demonstração do mecA, bem como testes de susceptibilidade fenotípica aos antibióticos foram realizados como descrito anteriormente por Cuny
et al
., em 2009
PCR para idendtificação dos genes da IEC e para a diferenciação entre as subpopilações animais e humana
Resultados
1-MRSA isolados de origem animal
Nenhum dos 94 isolados de colonização nasal de suínos era PCR positivo para int3, sak, chp, scn, e para os genes de enterotoxinas verificados
Todos eles foram atribuídos à subpopulação LA-MRSA por PCR para canSNPs
Todos os 61 isolados a partir de cavalos foram atribuídos à subpopulação LA-MRSA (não humana)
Para quatro deles, int3, bem como Sak e SCN, mas sem chp e também nenhum dos genes de enterotoxinas foram verificados a partir da PCR.
Um isolado foi positivo para int3, sak, scn, e sea, mas negativo para chp e para os genes de enterotoxinas verificados
Outro isolado foi positivo para int3, sak, chp, e scn, e negativo para os genes de enterotoxinas verificados
Resultados
2- MRSA isolados de colonização nasal dos seres humanos com exposição ocupacional ao gado
Nenhum dos isolados a partir da colonização nasal de 138 agricultores recolhidos em 2008 e 2009 e nenhum dos 22 isolados de porcos foram positivos para
int3, sak, chp, scn
, e para os genes de enterotoxinas verificados.
Atribuídos à subpopulação animal por PCR para canSNP
Entre os 47 isolados de médicos veterinários que trabalhavam em clínicas de cavalos,
40 exibiram o spa tipo T011
, resistência a gentamicina, e continham SCCmecIV.
Destes isolados, quatro foram positivos para int3: um contendo sak, chp, e scn, mas nenhum dos genes de enterotoxinas verificados, e três contendo sak e scn mas não chp, e também nenhum dos genes de enterotoxinas verificados.
Resultados
3- MRSA isolados de infecções em seres humanos
Entre os 99 MRSA CC398 isolados de infecções em seres humanos, 19 (19%) foram positivos para o INT3 e IEC, mas apenas um destes isolados continha sep
A PCR para SNPs em SAPIG_0698 e SAPIG_2511 atribuíram 16 dos 19 int3 isolados positivos à subpopulação animal de CC398
Estes isolados continham SCCmecV
Os três MRSA CC398 isolados que foram atribuídos à subpopulação ancestral continham tanto IEC quanto luk-PV
Todos os 99 MRSA CC398 isolados de infecções em seres humanos eram resistentes a oxitetraciclina
As 96 linhagens atribuídas à subpopulação animal continham tet(M), enquanto que as três atribuídas à subpopulação ancestral continham tet (K).
Resultados
4- MSSA CC398 de infecções em seres humanos
Foram utilizados 15 isolados provenientes de infecções invasivas (um de septicemia, 14 de infecções profundas da pele e dos tecidos moles)
Entre estes isolados, 11 continham o IEC sem os genes de enterotoxinas verificados.
Os seis isolados que também foram positivos para luk-PV e os três isolados que apresentaram spa tipo t571 foram atribuídos à subpopulação ancestral
Ambos isolados positivos para IEC e negativos para luk-PV exibindo o spa tipo T034 foram atribuídos à subpopulação animal
A resistência a oxitetraciclina foi detectada em três dos 15 MSSA CC398 isolados;
Dois destes isolados atribuídos à subpopulação humana continham tet (K), enquanto que a um isolado atribuído à subpopulação animal continha tet (M).
Discussão
Como se poderia razoavelmente esperar, o φSaint3 contendo IEC estava ausente do LA MRSA CC398 de origem suína e também da colonização nasal dos seres humanos com exposição ocupacional aos porcos
O IEC foi detectado, no entanto, em 10% das infecções por LA-MRSA CC398 em clínicas de cavalos e na colonização dos profissionais veterinários
Discussão
A proporção de 19% de MRSA CC398 atribuída à subpopulação animal entre isolados de infecções em seres humanos na Alemanha é claramente superior aos 2,5% reportados em isolados de origem humana de diferentes países europeus, sem diferenciação entre colonização e infecção (Stegger et. al., 2013)
O papel exato do IEC na colonização permanente e na infecção em seres humanos continua sendo demonstrado
Por causa da associação de leucocidina de Panton Valentin (luk-PV) a infecções de pele grave e de tecidos moles, isolados contendo luk-PV são de particular interesse
Discussão
Aqui mostra-se que ambos, MSSA e MRSA CC398, que foram isoladas a partir de infecções em seres humanos na Alemanha contendo IEC e luk-PV, pertencem à subpopulação humana
Os MSSA e MRSA C398 contendo luk-PV mostram-se prevalentes na China (Yu et al, 2008; Zhao et al, 2012)
Para três dos quatro casos relatados, foi observado um link com a China.
Conclusão
A vigilância do surgimento de MRSA CC398 com características especiais de virulência deve observar
(i) a evolução da virulência em LA-MRSA com relação a infecções em seres humanos, e
(ii) a aquisição de determinantes de resistência, tais como os genes mec pelo ancestral humano e subpopulação adaptada.
Além disso, a vigilância é necessária para mostrar se reaquisição da IEC contribuirá com capacidade de transmissão de humano para humano LA-MRSA CC398 independente do contato com animais.
Boa Prova !
akimnobre@hotmail.com
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