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Cromatografía plana en papel

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Transcript of Cromatografía plana en papel

Cromatografía plana en papel
¿Qué es?
Es un método físico de separación para la caracterización de mezclas complejas
Se basa en el principio de retención selectiva
* Separar los distintos componentes de una mezcla

* Identificar y determinar las cantidades de dichos componentes
Cromatografía plana en papel:
Se emplea una capa plana y relativamente delgada de papel que a su vez es el soporte. La fase móvil se mueve a través de la estacionaria por capilaridad.
Descripción del método
consiste de varias etapas, tanto en el campo como en el laboratorio, las cuales se describen a continuación:
Tareas en el campo:

Etapa 1:
Reconocimiento previo o diagnóstico integral de la propiedad .

plaguicidas
* compuestos químicos tóxicos .
* ocasionan impactos negativos en la salud ambiental y humana.
¿Como solucionar este problema?

Detectar residuos de plaguicidas , para evitar que estos sigan causando daños...
Los diversos cultivos y los animales que pastorean requieren de suelos fértiles para una producción de alimentos sustentable.
cromatografía para el análisis de suelos
.
Objetivos de este análisis cromatográfico:

* mostrar propiedades físicas, químicas y biológicas del suelo.
*poder presenciar sustancias que ayudan al crecimiento de las plantas en el suelo.
*Permite medir con total autonomía el estado, la salud del suelo y la calidad de los alimentos.
* Permite evaluar si los productos que se han utilizado en los suelos han sido beneficiosos o producen daños.

*La cantidad de suelo para muestra puede ir de medio kilo a un kilo y se puede tomar de diferentes profundidades, de acuerdo con criterios específicos.

*Extraemos de abajo a arriba, para no mezclar las muestras con materiales de profundidades diferentes.
Etapa 2:
Muestreo del suelo para el análisis.
Etapa 3:
Identificación de las muestras.

*Cada muestra se debe etiquetar, y la etiqueta debe contener el lugar de extracción y su profundidad.

*Las muestras se deben depositar en recipientes o bolsas de plástico que no se deterioren fácilmente con la humedad que la tierra pueda tener.
Etapa 4:
Secado de las muestras.
*Se ponen a secar indirectamente al sol o a media sombra.

*Se les extrae piedras, palos y otros objetos no deseados.

(Nunca utilizar papel periódico u otro material impreso para envolver, transportar o secar las muestras, por el riesgo de contaminación con las tintas o solventes)
Etapa 5:
muestra en pequeñas porciones
Con la ayuda de un colador de plástico, colamos la muestra en pequeñas porciones para lograr una mejor uniformidad en las partículas de suelo
Etapa 6:
Molienda de la muestra.
se muelen las partículas de suelo hasta obtener un polvo homogéneo, tipo talco, del cual finalmente tomaremos para el análisis la cantidad de 5 g.
Etapa 7:
Pesar muestra
* Con una balanza granataria se pesan 5 g de la muestra que

*El suelo restante, ya molido, se guarda como contramuestra de seguridad para futuros análisis del mismo tipo

* Para conservar las muestras de suelo restantes lo ideal es empacarlas en bolsitas de papel encerado y guardarlas en recipientes de plástico o vidrio, a salvo de cualquier humedad.

Preparación de soluciones de hidróxido de sodio para disolver la muestra del suelo y el nitrato de plata para sensibilizar el papel para el análisis:

Tareas de análisis de laboratorio
Etapa 1:
Preparar solución de hidróxido de sodio (NaOH), o sosa, al 1 % en agua destilada.
*Por casa muestra de 5 g que se quiera analizar utilizaremos 50 ml de la solución de sosa al 1%.
*Para prepara la sosa al 1%: se pesan 10 g de hidróxido de sodio en la forma de perlas y se disuelven en un litro de agua destilada.
Es muy importante identificar esta sustancia en el envase para evitar accidentes, equivocaciones y el uso equivocado de ella en el sitio donde trabajamos.
Etapa 2:
Preparación de una solución de nitrato de plata (AgNO3) al 0.5%.
*Se disuelve medio gramo de nitrato de plata en 100 ml de agua destilada.

*Dada su alta sensibilidad a la luz y al calor es recomendable solo hacer la cantidad que se va a necesitar.

*Sii sobra ,se identifica, y se debe tapar con papel aluminio para evitar que se revele .

Etapa 3:
Preparación del papel filtro circular.
Se utiliza papel filtroNo. 1
* Con un sacabocados de 2 mm de diámetro.

* podemos tener ya una plantilla con el centro ya perforado , para basarnos en ella.
Se perfora el papel filtro
*Los limites de impregnación del nitrato de plata se marcan a 4 cm de
distancia del centro del papel.

* El recorrido de la muestra de suelo se marca a 6 cm de distancia del centro del papel, se puede realizar esto con el auxilio de una jeringa.
Marcamos el papel filtro a 4 y 6 cm
*Los pabilos tienen 2 cm de altura y 2 cm de diámetro.

*Se elaboran con papel No. 4.

*para enrollar el papel utilizamos un clavito de acero .
Elaboración de los pabilos
Etapa 4:
Impregnación del papel filtro.
*Impregnaremos el papel a traves de un pabilo hasta llegar a los 4 cm medidos desde el centro.

*Utilizamos dos cajas circulares de petri de unos 5 cm y 10 cm de diámetro (la menos dentro de la mayor).

*Se vierte en ella la solución de nitrato de plata .
Etapa 5:
disolver muestra con la solución de sosa.
*La mezcla se agita constantemente con giros de derecha a izquierda y de izquierda a derecha.

* 6 series de 7 giros, durante uno o dos minutos.

*Dejamos la muestra en reposo por 15 minutos y volvemos a agitarla

*Nuevamente la dejamos en reposo, esta vez por una hora, y repetimos el procedimiento de agitación.



Finalmente se guarda la muestra, debidamente protegida, mínimo por 6 horas en pleno reposo, para que se complete la reacción alcalina de la sosa con la muestra de suelo. No se vuelve a agitar más la muestra.
Etapa 6:
Corrida de la muestra
*Metemos la cajita de Petri menor dentro de la mayor, y con el auxilio de una jeringa de 20 cc vertemos en la cajita menor 10 cc a 15 cc del líquido que está en la parte superior de la mezcla .

*No agitar más esta muestra después de las seis últimas horas de reposo
*Trabajar solamente con la parte superficial de la solución (el sobrante).
Etapa 7:
Secado del croma
*Se dejan descansar horizontalmente en una superficie plana y limpia, de preferencia sobre una hoja de papel oficio blanca, mientras se secan.

*Una vez secos se pueden colgar en una ventana de vidrio y exponerlos, de forma indirecta, a la luz solar para que el revelado lentamente se estabilice.
Etapa 8:
Identificación de cromas
*Ya secos los cromas deben identificarse en el espacio de centímetro y medio del borde del papel filtro sin impregnación.

*Siempre hacerlo con lápiz de carbón, colocar el lugar , la fecha y el tipo de sustancia que se analizó .

*En una hoja anexa podemos comentar detalles relevantes del croma.

Etapa 9:
Documentación
Hoy en día existen muchos medios electrónicos para documentar, registrar y sistematizar la información de los cromas, ya sea escrita o fotográfica, por medio de escanear o impresión de copias digitales a colores, muy bien calibradas.

Esto para tener documentada la información básica de la interpretación y escribir algunas recomendaciones, si así lo deseamos.
Etapa 10:
Conservación de los cromas
*Los cromas se deben guardar lejos de la humedad y de la exposición prolongada a la luz.

*Se debe evitar amontonar los cromas para guardarlos.

* Archivar los cromas en carpetas por separado, con su identificación individual
Descripción general de un croma
Las zonas de un croma son 5, del centro hacia afuera:

* zona central
*zona interna
*zona intermedia
*zona externa
* zona de manejo o periférica.

Zona central(de areación u oxigenación)
* Cuando esta zona no se manifiesta se debe al maltrato o la destrucción del suelo, debido a la mecanización pesada, aplicación de venenos y exposición directa al sol, un suelo así se encuentra compactado,sin estructura y sin materia orgánica.



*Un centro de color
blanco
cremoso que se desvanece suavemente para integrarse a la próxima zona es un indicador de buen suelo, no compactado, de buena estructura y con abundante materia orgánica.


Zona interna (zona mineral)
* Aquí se encuentran la gran mayoría de reacciones con los minerales de la muestra analizada
Zona intermedia(zona proteica o de la materia orgánica)
Se expresan tanto la parecencia como la ausencia de la materia orgánica .

Ausencia:
el suelo esta mineralizado, compactado y destruido por mecanización ,por falta de cobertura vegetal o por venenos agrícolas(herbicidas e insecticidas).
Zona externa(zona enzimática o nutricional)
Cuando esta zona se manifiesta de forma gradual y armónica como nubes onduladas o lunares suaves de colores cafés, es un suelo IDEAL saludable y pleno de vida.

Las nuvecillas indican abundancia y variedad nutricional disponible activa para actuar con el cultivo.
Principales coloraciones indicadoras de buena salud en el suelo:
Amarillo, dorado, anaranjado, rojizo o café y tonalidades verdosas.

Principales coloraciones que indican condiciones de suelo no deseables:
Negro, ceniza, lilas o violeta, gris y tonalidades azuladas.
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