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Histoquimica de lípidos

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by

maria jose lagos

on 23 September 2013

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Transcript of Histoquimica de lípidos

Histoquimica de lípidos
¿Que son los lípidos?
Conjunto de moléculas orgánicas compuestas principalmente por C y H, y en menor medida O y excepcionalmente P, S y N.
Funciones de los lípidos
Componentes lipídicos
Radicales alquilos de 16 a 20 átomos de carbono
Ésteres
Alcoholes aromáticos y alifáticos
Ácidos grasos
Glicérol
Ácido fosfórico
Esfingosina
Proteínas
Colesterol
Azúcares
Myo-Inositol
colina., etanolamina y serina
Isopreno
Clasificación
1.Según solubilidad
Lípidos no conjugados
Lípidos conjugados

2. Según reacción de saponificación
Lípidos saponificables
Lípidos insaponificables

3. Según localización histologica
L. Metabólicos
L. Homofásicos
L. Histogénicos
L. Heterofásicos

Según localización histológica
Lípidos metabólicos
Lípidos homofásicos
Lípidos heterofásicos

Propiedades físico químicas
El punto de fusión depende del largo de la cadena hidrocarbonada
Es importante determinar si la superficie lipídica es hidrófoba o hidrófilica
Los fosfolípidos contienen grupos básicos polares los cuales hacen que estos lípidos sean hidrofílicos.
Los glicolípidos ácidos (gangliósidos y sulfátidos) y glicolípidos neutros (cerebrosidos) son también moderadamente hidrofílicos.
Los lípidos no polares son hidrofobicos
Fijación de lípidos
El método ideal para la fijación de lípidos es por congelación

Fijación química
formalina
formol calcio
dicromato de potasio
Microtomia
Inclusión en congelación: cortes en criostato entre 8 y 10 µm

Inclusión en parafina: cortes entre 8 y 10 µm
Controles......
controles negativos
acetona elimina los lípidos hidrófobicos
metanol
ácido clorhídrico
controles positivos
se conservan los tejidos grasos a -70° C


hidrofobicos: acetona fria 4°C
lipidos sin conjugar a proteinas: piridina mas cloroformo/etanol
proteolipidos: metanol/cloroformo
lipoproteinas: soventes acidificantes
lipidos neutros asociados a proteinas: PAS
cerebrocidos: acetona caliente
lectinas y cefalinas: eter caliente

Extracción especifica
Lipocromos......
• Los lipocromos deben presentar las siguientes características
• Ser suficientemente coloreados o fluorescentes
• Ser altamente solubles en lípidos
• Ser solubles en sustancias no liposolubles
• Carecer afinidad por otros constituyentes tisulares
• El lipocromo debe ser mas soluble en los lípidos que soluble en su disolvente
Colorantes y sus disolventes
Clasificación según solubilidad
Clasificación según reacción de saponificación
La saponificación consiste en una hidrólisis alcalina de la porción lipídica (con KOH ó NaOH). Los lípidos derivados de ácidos grasos dan lugar a sales alcalinas (Jabónes) y alcohol, que son fácilmente extraíbles en medio acuoso. No todos los lípidos presentes en una muestra biológica sufren este tipo de reacción. Por lo tanto hay dos tipos de lípidos:

Lípidos saponificables
Lípidos insaponificables
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