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Identifiación de proteína en los insectos.

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Andrea Alfaro Diez de Medina

on 10 November 2013

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Transcript of Identifiación de proteína en los insectos.

Reflexiones
"Y Juan estaba vestido de pelo de camello y tenía un cinto de cuero alrededor de sus lomos; y su comida era langostas y miel silvestre".
S. Mateo 3:4
IDENTIFICACION DE PROTEINA EN LOS INSECTOS
Identificación de proteína en los insectos.
Las proteínas son esenciales para el correcto funcionamiento del organismo, siendo estas una base en la alimentación.

Los insectos son una gran fuente de proteínas y minerales, estos pueden contener más proteínas que la carne y el pescado. (Chinchia)
Identificar la presencia de proteínas en insectos por medio de la reacción de Biuret y el espectrofotómetro.
Objetivo
Fundamento Teórico
Existen 527 clases de insectos que se consumen en África, Asia y América. Entre los más comunes están los escarabajos, abejas, grillos, hormigas, mariposas.

En necesario conocer la cantidad de proteínas que estos tienen ya que no todos los insectos son comestible. (CNN, 2013)
Reacción de Biuret
Contiene CuSO4. La base es la formación de un compuesto de color violeta, debido a la formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos (Quiñones, 2004)
Espectrofotómetro
Tiene la capacidad de manejar un haz de Radiación.
Absorben ciertas longitudes de onda de la luz blancay sólo vemos longitudes de onda no absorbidas.

Modo cuantificación para análisis de longitud simple.

Permite preparar una curva de calibración para determinar concentraciones de muestras (Westland, 2001.).
En este caso, realizaremos la identificación y cuantificación de proteínas por medio de la reacción de Biuret y un espectrofotómetro
(Quiñones 2004)

Solución de 10mg.mL-1 de ovoalbúmina como sustancia patrón.
5 tubos de ensayo
Un espectrofotómetro
Agua destilada
Papel milimétrico
Reactivo del Biuret
(Quiñones 2004)
Materiales
a)
Longitud de onda de 570 nm
b)
Poner en la cubeta del el contenido del tubo Blanco,
c)
Lectura a 0 de Abs.
d)
Se devuelve el contenido, medir la Abs de las soluciones de los otros tubos.
e)
Limpiar con agua la cubeta, secarla por fuera y medir la Abs del tubo con la muestra.

Medir la Abs en el espectrofotómetro
4.
Con las medidas obtenidas, construir una recta en papel milimétrico. Concentraciones en el eje de abscisas y las Abs en el de ordenadas.

5.
Interpolar la Abs de la proteína problema en la gráfica y calcular su concentración.

(Reconocimiento de Biomoléculas)
C= Abs/(eε×1)

1. Para medir la absorbancia se necesita una solución patrón de 10mg.ml-1 de ovoalbúmina.

C1×V1=C2×V2

2. Agregar a la muestra 2ml de reactivo del Biuret, agitar y dejar reposar 20 minutos.

3. Medir la Abs en el espectrofotómetro.
(Reconocimiento de Biomoléculas)
Procedimiento
Bibliografía
•Práctica 1. Reconocimiento de biomoléculas. (s.f.). Recuperado el 26 agosto de 2013, de: http://www.uam.es/personal_pdi/ciencias/bolarios/BiologiaCCAA/Guiones/Practica1.htm
INSECTOS COMESTIBLES, Fuente de Proteínas. (s.f.). Recuperado el 25 agosto de 2013, de: http://www.portalplanetasedna.com.ar/insectos_comestibles.htm
Chinchilla, J. (s.f.). Practica 5: identificación de proteína en los alimentos. Recuperado el 25 agosto de 2013, de: http://es.slideshare.net/jomachi/practica-de-laboratorio-5-identificacin-de-proteinas.
Westland,S. (2001) Cómo funciona un espectrofotómetro de reflectancia
Nuñez, Y (2012). Prácticos de proteínas.
CNN (2013). Un alimento común. Recuperado el 10 - nviembre --2013. de: http://www.fao.org/forestry/edibleinsects/es/
Quiñones, Z (2004). Bioquímica - Salud Individual Biolog. Santiago, Rep. Dominicana.
GRACIAS!!!
cubeta del espectrofotómetro
Que sucederá si existen proteínas??
Fórmula Biuret
Biuret 3D
Porque la reacción sería negativa???
- No existan proteínas o péptidos en la muestra.
- Existan una o más sustancias interferentes.
- Existan péptidos, pero a una concentración inferior al límite de sensibilidad del método
Espectro fotómetro
La luz es parte, que se propaga de forma ondulatoria y por esto las distintas radiaciones luminosas (colores) se diferencian por sus longitudes de onda.

Cada color corresponde a una radiación con una longitud de onda específica.
El espectrofotómetro: Una lámpara que emite luz monocromática, que incide y atraviesa la muestra coloreada. Un detector, que medirá la cantidad de luz que no es absorbida por la muestra. Para cada sustancia la de longitud de onda a la que absorba más cantidad de luz.
Funcionamiento se basa en la ley de Beer-Lambert (Westland, 2001.)
Ley de Beer-Lambert
Abs (DO) = e x C x l
Abs = Absorvancia.
e = Coeficiente de extinción molar
C = Concentración de la muestra a medir (M).
l = Espesor de la muestra. (Esta puede ser ignorada, ya que generalmente se utilizan cubetas para la muestra de 1cm de espesor)
(Reconocimiento de Biomoléculas)

(Nuñez, 2012)
(Aguirre, 2013)
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