Loading presentation...

Present Remotely

Send the link below via email or IM

Copy

Present to your audience

Start remote presentation

  • Invited audience members will follow you as you navigate and present
  • People invited to a presentation do not need a Prezi account
  • This link expires 10 minutes after you close the presentation
  • A maximum of 30 users can follow your presentation
  • Learn more about this feature in our knowledge base article

Do you really want to delete this prezi?

Neither you, nor the coeditors you shared it with will be able to recover it again.

DeleteCancel

Make your likes visible on Facebook?

Connect your Facebook account to Prezi and let your likes appear on your timeline.
You can change this under Settings & Account at any time.

No, thanks

tesis

esa
by

Luis Astudillo

on 18 January 2013

Comments (0)

Please log in to add your comment.

Report abuse

Transcript of tesis

UNIVERSIDAD CATÓLICA DEL NORTE
FACULTAD DE CIENCIAS
Departamento de Ciencias Farmacéuticas “Es toda sustancia que encontrándose en bajas concentraciones respecto al sustrato oxidable, retrasan o previenen la oxidación de éste ” ANTIOXIDANTES CAPACIDAD ANTIOXIDANTE Y ACTIVIDAD INHIBITORIA SOBRE ALFA-AMILASA SALIVAL DE EXTRACTOS DE AZORELLA COMPACTA (Phil. 1891) Tesis para optar al título de Químico Farmacéutico
LUIS ALBERTO ASTUDILLO MORENO

Profesor Tutor: Dr. Q.F. Gabino Garrido G.
Profesor Guía: M. Sc.B.Q. Patricia Pozo S.

Antofagasta, Chile
2013 Radiación extrema Escasez de agua Alturas cercanas
a 4000 mts. s.n.m. Diabetes
Mellitus Estrés
oxidativo Estrés
oxidativo Diabetes
Mellitus Sobrecarga en la cadena transportadora de e- en la mitocondria Autoxidación de glucosa en presencia de metales de transición Estrés carbonilo AGE Y rAGE Endógenos Exógenos Enzimáticos No
enzimáticos Vitaminas Oligoelementos Fitoquímicos: Polifenoles “Grupo de sustancias provenientes del metabolismo secundario de las plantas cuyas propiedades disminuyen
la incidencia del daño oxidativo” Azorella compacta (Phil. 1891) Uso etnomédico Hipótesis Los compuestos fenólicos, específicamente los flavonoides, en extractos polares de la especie Azorella compacta presentan actividad antioxidante que contribuye a su acción inhibitoria sobre la enzima alfa-amilasa salival. Objetivos Objetivo general Obtener extractos de Azorella compacta (Phil.) que presenten actividades antioxidante e inhibitoria sobre alfa-amilasa. Objetivos específicos Determinar cualitativa y cuantitavimente la presencia de fenoles y flavonoides en los distintos extractos de A. compacta. Determinar In Vitro el efecto inhibitorio de los extractos de A. compacta sobre alfa-amilasa salival. Evaluar la actividad antioxidante
de los extractos de A. compacta mediante el secuestro del radical DPPH. Metodología Extracción 5 g de materia vegetal. Maceración Infusión Decocción Hexano (50 mL), 120 h, 40 r.p.m., temp. ambiente. Diclorometano (50 mL), 120 h, 40 r.p.m., temp. ambiente. Metanol/agua (50:50) (50 mL), 120 h, 40 r.p.m., temp. ambiente. Fracción hexánica Fracción
diclorometánica Fracción
hidrometanólica Residuo 1 Residuo 2 Residuo 3 50 mL de agua
destilada Fueron llevados a
100°C Se agregaron 5 g de
material molido y
seco Se dejó en reposo Filtrado.
Liofilizado.
Almacenado. 50 mL de agua
destilada Fueron llevados a
100°C Se agregaron 5 g de
material molido y
seco Se mantuvo en hervor por 10 minutos y se dejó en reposo. Filtrado.
Liofilizado.
Almacenado. Ensayos Determinación De La Capacidad Antioxidante In Vitro De Extractos Acuosos De A. compacta. Ensayo de decoloración del radical DPPH. Preparación de los estándares de AG y BHA, y de los extractos Cuantificación por UV/VIS a una longitud de onda= 517 nm Determinación de
fenoles totales Método Folin-Ciocalteu Preparación de estándar de AG y extractos Cuantificación por UV/VIS a una longitud de onda = 765 nm. Determinación cuantitativa de flavonoides totales Método colorimétrico de tricloruro de aluminio Preparación de estándar de QT y extractos Cuantificación por UV/VIS a una longitud de onda = 415 nm. Determinación cualitativa de flavonoides Cromatografía en capa fina Preparación de estándares, extractos, y del sistema de solventes Visualización en transluminador UV=365 nm y cálculo del Rf. Determinación de la actividad de extractos de A.compacta frente alfa-amilasa salival Metodo colorimétrico yodo-almidón Extractos frente almidón Extractos frente yodo Estimulación y estandarización de la enzima.
Preparación de los extractos y reactivos Lectura resultados mediante UV/VIS a una longitud de onda = 580 nm. Preparación de extractos
y reactivos Preparación de extractos
y reactivos Análisis estadístico Para el análisis de datos se realizó un ANOVA en el paquete estadístico SPSS Statistics 20.0.


Se determinaron las diferencias significativas como p<0,05.


Las extracciones se hicieron, al menos, una vez mediante dos réplicas. Para la determinación de fenoles totales, DPPH y actividad alfa-amilasa se realizaron tres ensayos por triplicado. En el caso de los ensayos de flavonoides e interacciones de extractos frente yodo y almidón se realizaron dos ensayos por triplicado. Cuantificación de fenoles totales en extractos de A. compacta. * p<0,05 en relación con los extractos MeOH 50%, decocción e infusión. GAE: Equivalentes de ácido gálico; DCM: Diclorometano; MeOH: Metanol. Resultados y discusión Cuantificación de flavonoides totales en extractos de A. compacta. Determinación de la actividad antioxidante. Barras con distintas letras simbolizan diferencias estadísticamente significativas ( p<0,05) entre las varianzas de los diferentes extractos. E.Q: Equivalentes Quercetina; MeOH: Metanol. No se presentaron diferencias estadísticamente significativas (p<0,05). MeOH: Metanol. Q: Quercetina; K: Kaempferol; I: Infusión; D: Decocción; M: Metanol 50%. Efectos de los extractos de A. compacta sobre la actividad
de alfa-amilasa. Extracto MeOH 50% frente alfa-amilasa, yodo y almidón. Infusión frente alfa-amilasa, yodo y almidón. Decocción frente alfa-amilasa,
yodo y almidón. Análisis cualitativo de extractos de A. compacta. Conclusiones En el presente estudio se confirmó la hipótesis planteada a través de los objetivos propuestos, ya que se obtuvieron extractos que contenian flavonoides con actividad antioxidante y potencial inhibitorio de alfa amilasa a partir de la planta Azorella compacta. Se comprobó la presencia de fenoles y flavonoides totales, así como la determinación cualitativa de flavonoides dentro de los extractos seleccionados de A.compacta. Todos los extractos seleccionados de A. compacta mostraron actividad antioxidante. Todos los extractos polares de A. compacta poseen la capacidad de interaccionar con la enzima alfa-amilasa salival pudiendo producir su inhibición. Muchas gracias por su atención. AMADO, N. 2005. Informe de flora y fauna. SOLIS, I. et al. 2012. Revista Médica de Chile 140: 66-72.
CUERDA, C. et al. 2011.Revista Nutrición Hospitalaria; 26(1):68-78. RECCHIONI, R. et al. 2002. Metabolism, 51, 1384-8.
YAMAGISHI, SI. et al. 2001. Diabetes; 50, 1491-4. GARCÍA, L. et al. 2001. Revista Cubana de Investigaciones Biomédicas 20 (3): 231- 235. VENEREO, J. 2002. Revista Cubana de Medicina Militar 31 (2): 126-133. BHATTACHARYA, A. et al. 2010. Molecular Plants Pathology; 11: 705-719.
BORCHARDT, J.R. et al. 2008. Journal of Medicinal Plants Research; 2: 81-93.
BOWDEN, G.H. 1999.Methods Enzymology; 310: 216-224. ABDULMANEA, K. et al. 2012. Biochemical Systematics and Ecology; 45: 237-243.
WIKENS, G.E. 1995. Llareta (Azorella compacta, Umbeliferae). A review. Economic botanic; 207-212.
DE SALES, P. et al. 2012. Journal of Pharmacy and Pharmaceuticals Sciences; 15(1): 141-183. VILLAR DEL FRESNO, A.M. 1999. Farmacognosia general. Ed. Síntesis. Madrid. VILLAR DEL FRESNO, A.M. 1999. Farmacognosia general. Ed. Síntesis. Madrid. VILLAR DEL FRESNO, A.M. 1999. Farmacognosia general. Ed. Síntesis. Madrid. WATERHOUSE, 2002. Jhon Wiley and Sons Ltda. pp. I1.1.1- I1.1.8. CHANG, C. et al. 2002. Journal of Food and Drug Analysis 10 (3): 178-182. ABBOT, D. 1970. 3ra edición. Madrid, España. FUWA, H. 1954. The Journal of Biochemistry; 41: 583-603.
SHEN, W. et al. 2012. . Journal of Agricultural and Food Chemistry; 60, 9609-9619 Fármacos Lípidos Polifenoles Clasificación de polifenoles. Cumarinas.
Xantonas.
Lignanos.
Estilbenos.
Ácidos fenólicos.
Flavonoides Flavonoides Clasificación de flavonoides:
Flavonas.
Flavonoles.
Flavanonas.
Isoflavonas.
Flavanoles.
Antocianinas. FUENTES, N. et al. 2005. Phytotherapy Research; 19: 713-716. WIKENS, G.E. 1995. Economic botanic; 207-212. WAGNER, H. Y BLADT, S. 1996. A Thin Layer Chromatography atlas. 2th edition. Germany, Springer. BAHAMONDES, 2012. Tesis de pregrado. UCN. LO PIPARO, E. et al. 2008. Journal of Medicine and Chemistry; 51: 3555-3561. LO PIPARO, E. et al. 2008. Journal of Medicine and Chemistry; 51: 3555-3561. LO PIPARO, E. et al. 2008. Journal of Medicine and Chemistry; 51: 3555-3561.
SHEN, W. et al. 2012. Journal of Agricultural and Food Chemistry; 60, 9609-9619. BRAND-WILLIAMS, W. et al. 1995. LWT Food Science and Technology 28 (1): 25-30. Condiciones de estrés Plantas con propiedades
únicas MARTÍNEZ, A. 2005. Medellín, Universidad de Antioquia, Facultad de Química Farmacéutica. 76p. MARTÍNEZ, J. et al. 2003. Colección nutrición y salud. 3ª ed. Madrid, Comunidad de Madrid. 128 p. Anticancérigena Antinflamatoria Antioxidante Recolección de material vegetal La materia prima fue recolectada en la localidad de Turi (S: 22° 11.962’ W:68° 19.601’) a una altura de 3077 m. s.n.m., en la región de Antofagasta. Diabetes Alfa-amilasa
Full transcript