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COPROCULTIVO

Nos muestra las tres fases del proceso analítico de las muestras a través del examen microbiológico de las heces.

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Transcript of COPROCULTIVO

¡Hola! Bienvenid@ a este
pequeño recorrido
¿Te has preguntado alguna vez qué
ocurre desde que dejas tu muestra en el
laboratorio hasta que el médico te dice el
resultado?
Voy a intentar explicártelo de una forma
fácil,
aména,
y por qué no... divertida
COPROCULTIVO
Vamos primero con la
fase preanalítica, que es muy importante
Recógeme en un recipiente estéril de boca ancha
Si esto no fuera posible
Llévame rápidamente a tu centro de salud, o lugar donde vayan a realizar mi estudio
Debes saber que
las heces
formes no se analizan.
Consérvame refrigerada hasta el momento del análisis
SI EN TU FRIGO... NO
PONGAS ESA CARA DE ASCO
¡ A ver como lo explico
sin que se rían...!
FASE PREANALÍTICA
SI EN TU FRIGORÍFICO
NO PONGAS ESA CARA
DE ASCO
Bueno venga, deja
de reírte y vamos a seguir...
Recogida, transporte y conservación de la muestra
Recepción de la muestra
En tu centro de salud habrá un personal sanitario encargado de la recepción de la muestra.
ES MUY IMPORTANTE COMPROBAR:
1
DATOS DEL PACIENTE
2
DATOS DE LA MUESTRA
TIPO DE MUESTRA
QUÉ DETERMINACIÓN SE SOLICITA
COMPROBAR QUE LA MUESTRA ESTÁ BIEN RECOGIDA
3
IDENTIFICAR LA MUESTRA JUNTO CON LA PETICIÓN
Ahora llega mi turno.
Soy la administrativa.
Yo voy a informatizar tu muestra para que
puedan procesarla
No creas que es fácil, es un trabajo de locos.
Un código para el Centro de Salud
Un código para el facultativo que solicita la muestra
Un código para la muestra...
¡¡ Y HAY MÁS DE 100
MUESTRAS DIARIAS!!
Informatización
LLEGADOS A ESTE PUNTO TU MUESTRA ESTÁ LISTA PARA SER ENVIADA AL LABORATORIO DONDE LA PROCESARÁN. COMIENZA ASÍ...
FASE ANALÍTICA
Yo voy a explicarte la fase analítica,
es la más extensa, es un largo proceso
que hay que seguir paso a paso, sin prisas...
Las bacterias que nos hacen sentirnos mal necesitan
tiempo para crecer y que el microbiólogo (que así
se llama es médico que te dirá que "bichito" es el
culpable de tus males) después de una serie de
pruebas, unas más lentas que otra, le ponga
nombre a esa bacteria y te recomiende el
antibiótico.
comencemos
Hemos visto que tu muestra es adecuada para el tipo de exámen que se solicita, así que vamos a procesarla
Tercer día
(48 horas)
Segundo día
(24 horas )
¡FIN DE LA AVENTURA!
Primer día
Medios de cultivo
CULTIVO E IDENTIFICACIÓN
Cultivo
Lo primero que harán será sembrar tu muestra
No utilizan tierra, ni abono, ni fertilizantes... pero en algo se parece...
El equivalente a la tierra son los distintos medios de cultivo que se emplean (dependiendo de la muestra que vayan a analizar) y el abono y el fertilizante son las substancias que componen el medio de cultivo, que le proporcionan a la bacteria el alimento necesario, y la temperatura y atmósfera (condiciones) en las que se incuba (guarda) para favorecer (ayudar) su crecimiento
¡No te asustes!
Parece más difícil de lo que es!
Agar Sangre
Agar Mac Conkey
Agar Hektoen Entérico
Agar Yersinia
Agar Campylobacter
Caldo Selenito
Heces no diarréicas
Heces diarréicas
Agar X.L.D.
Agua de peptona
Agar T.C.B.S.
Llegados a este punto
sólo hay dos posibilidades
Tu muestra es negativa
Tu muestra es positiva
Si tu caso es el segundo, en el informe se reflejará en nombre de la bacteria que te causaba el problema y el tratamiento antibiótico si lo hubiere
Definición:
Un paréntesis antes de seguir con el proceso
Preparación que consta de un gel o una solución que cuenta con los nutrientes necesarios para permitir, en condiciones favorables de pH y temperatura, el crecimiento de virus, microorganismos, células o tejidos vegetales
Agar Sangre:
Agar Mac Conkey:
Agar Hektoen:
Agar Yersinia
Agar Campylobacter:
Caldo Selenito:
Agar X.L.D.:
Agua de Peptona:
Agar T.C.B.S.:
Ha terminado la segunda fase... Ahora sólo queda...
FASE POSTANALÍTICA
A mí me corresponde
explicarte esta última fase
no creas que por ser la
última no es importante...
Sin ella no tendrías el
resultado de tu análisis
Definición Coprocultivo:
El coprocultivo consiste en el cultivo de materia fecal, es decir, se examinan las heces para detectar y descartar Salmonella, Shigella, Yersinia, E. coli que son los principales microorganismos causantes de enfermedades gastrointestinales.
Mdc General. No da una idea del tipo de flora. (en caso de disbacteriosis se informará el microorganismo sin Atb.)
Mdc Diferencial. Diferenciar los bacilos entéricos fermentadores de la lactosa (L+) de los no fermentadores (L-), al tiempo que se inhibe el crecimiento de flora Gram positiva aerobia.
Mdc Selectivo. Inhibir el crecimiento de la mayoría de las Enterobacteriaceae mientras se permite el crecimiento de Salmonellaspp y Shigella spp.
www.sampac.es
Al igual que el Hektoen es un medio selectivo. No se hace una siembra directa de la muestra, en el agar XLD se hace un pase del caldo Selenito tras 24 horas de incubación
Suprimir el crecimiento de la flora normal durante las horas iniciales de incubación. Se resiembran en medio sólido a partir de las 6 horas.
Este medio líquido es fundamental para el estudio de portadores asintomáticos.
Medio selectivo para Campylobacter 48h/42ºC
Medio selectivo para Yersinia 24h/30ºC
Medio de enriquecimiento. A partir de 6 h de
incubación subcultivar en TCBS
Heces líquidas
Cultivo de Vibrio
Medio selectivo para vibrio
Tu muestra ha sido procesada. Ahora toca esperar.
Es un entorno (atmósfera) con poco oxígeno, alrededor de un 5%
(en la atmósfera terrestre la concentración de oxígeno es aproximadamente un 20%)
y una gran concentración de dióxido de carbono entre el 5 y 10%.
Se la utiliza para el cultivo de bacterias que requieren de bajas concentraciones de oxígeno para su desarrollo. Estas condiciones (de bajas tensiones de oxígeno) existen en forma natural en por ejemplo nuestros intestinos.
Si recuerdas, al principio hablábamos de un
proceso lento
, unas
condiciones especiales
para que las bacterias crezcan...

Vamos a verlos.
La mayoría de las bacterias crecen bien a 37ºC, nuestra temperatura, pero otras son más delicadas.
La yersinia necesita 30ºC.
El campylobacter 42ºC... pero además necesita una atmósfera
microaerófila
Vamos a hacer otro alto en el camino
¿Qué es una atmósfera microaerófila?
Hoy es el primer día que tanto el microbiólogo como el personal técnico tendrán la primera toma de contacto con tu muestra
Te encuentras mal, llevas dos días con diarrea y has ido a tu médico de familia
Te ha dicho que tienes que hacerte un coprocultivo
¿Sabes qué es y cómo se realiza?
¿Por qué no tengo el resultado al momento?
Vamos a responder a todas tus dudas... o al menos a intentarlo
Nos encontramos son Agar Sangre, Mac Conkey, Hektoen y Yersinia
El
Agar Sangre
y el
Mac Conkey
nos han dado una idea general de las bacterias presentes en tu muestra... Recuerda que
en el intestino hay una flora bacteriana
que nos beneficia
, es decir, es buena, pero
que se elimina
por las heces, su presencia en los medios de cultivo no quiere decir que eso sea malo.
En el Hektoen no hay crecimiento
No hay presencia de Salmonella y/o Shigella en la muestra
O... hay poca cantidad... esperaremos el XLD de mañana
En la placa de Yersinia hay una colonia pequeña, rosa, con un halo más claro... podría ser una Yersinia,
o una Aeromona
Para salir de dudas realizaremos
TSI
Urea
Pase a Agar Sangre
Y lo incubaremos todo 24 horas
Mañana seguiremos
¿Aprendemos algo mientras esperamos?
TSI
El TSI o Triple Sugar Iron es un medio de cultivo en cuya composición lleva tres azúcares: glucosa, sacarosa y lactosa. Un colorante: el rojo fenol. Así como Tiosulfato de sodio y sulfato ferroso.
Es un medio de cultivo sólido en tubo que tiene la particularidad de haberse dejado solidificar en una superficie inclinada, formándose así el llamado pico de flauta (una especie de lengua)
Más que como medio de cultivo se utiliza como prueba microbiológica que demostrará la capacidad o no de la bacteria objeto de estudio de fermentar los azúcares y producir sulfuro de hidrógeno.
No es exclusivo para Salmonella y Shiguela, pero es de mucha ayuda para su identificación.
UREA
Con esta determinación ponemos de manifiesto
la presencia de la enzima ureasa en la bacteria.
De ser así la bacteria atacaría a la urea y la utilizaría como fuente de nitrógeno
¿Por qué hacemos el pase a agar sangre?
En el medio de Yersinia hemos visto que crece tanto Yersinia como Aeromonas, y aunque la morfología de las colonias de yersinia es muy típica (colonias pequeñas, convexas, brillantes, y con el centro rojo y la periferia transparente, si el cultivo tiene más de 24 horas la morfología deja de apreciarse con claridad. Una forma de recuperar Yersinia/Aeromonas es haciendo el pase a agar sangre... Mañana seguiremos
Hace ya tres días que entregaste tus heces y aún no sabes nada... Pero no desesperes, ya estamos llegando al final de esta fase
Hoy examinaremos dos placas por primera vez
El pase que se hizo ayer del Selenito a XLD
La placa de Campylobacter
Además tenemos nuestro trabajo: TSI, urea y pase a agar sangre
Urea negativa:
Descarta una Yersinia (la Yersinia es urea +)
TSI A/A :
Descarta Yersinia (la Yersinia K/A) - alcalino (rosa) el pico. ácido (amarillo) el fondo
¿Y el pase a Agar Sangre?
Realizaremos la
oxidasa
a una de las colonias
Oxidasa positiva:
Aeromonas
CMI de BGN
¿Y en las placas nuevas... Qué hemos visto?
En la placa de Camplylobacter hay unas colonias que bien podrían ser de Campylobacter, así que habrá que estudiarlas siguiendo el protocolo.
En placa de XLD hay unas colonias que bien podrían ser de Salmonella (por su color negro), aunque las de Proteus también tienen el mismo aspecto... De momento seguiremos el protocolo para colonias SH2 + o sospechosas de salmonella
Aún nos queda 24 horas de espera, sigamos aprendiendo
Protocolo
campylobacter
Tinción de
Gram
(3 minutos)
Hidrólisis del
hipurato
Oxidasa
Negativa
Positiva
BGN
Hipurato negativo
Hipurato positivo
No Campylobacter
SEGUIR PASO SIGUIENTE
SEGUIR CON EL ÚLTIMO PASO
Campylobacter sp
Campylobacter jejuni
A las colonias SH2+ de XLD se les realizará TSI y Urea para ver si es Salmonella
maría belén huertas chacón
24 horas más de espera
Resultados de TSI y urea 24 horas despues (nuestra muestra lleva ya 4 días)
la urea es negativa:
Salmonella
TSI:
Tipaje de salmonella
CMI de BGN
24 horas más
de espera
¿Qué ocurre en esta fase?
RECOJES
TU
RESULTADO
LOS RESULTADOS
DE LAS DISTINTAS PRUEBAS SE HAN INFORMATIZANDO SOBRE LA MARCHA, UNOS MANUALMENTE
OTROS ON-LINE
Desde este momento
tu médico puede ver los resultados a través de
INTRANET
EL FACULTATIVO DA
EL VISTO BUENO A LOS RESULTADOS DE TODAS LA PRUEBAS
VALIDA
LA
PETICIÓN
SI FUERA NECESARIO
AÑADE ALGUN COMENTARIO AL INFORME QUE ORIENTE A TU MÉDICO DE FAMILIA O A TÍ
¿Te ha parecido intersante?
Ahora que sabes todo el proceso
seguro que no te parece mucho esa
espera
MUCHAS GRACIAS
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