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ESPECTROMETRO DE MASA

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by

Alejandro Lorenzana

on 11 April 2014

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ESPECTROMETRO DE MASA
Sistema de Entrada
La finalidad del sistema de entrada es la de permitir la introducción de una muestra representativa en la fuente de iones con la mínima pérdida de vacío. Los más comunes son:
*-Entrada intermitente
*-Entrada directa (Hay de 2 tipos)

Entrada Por Sonda De Exposición Directa (DEP)

-La muestra en disolución se coloca en un filamento.
-Calentamiento balístico (necesitan precalentarse)
-Rampas de temperatura programables
-Alcanza hasta 1000*C

Entrada Por Inserción De Sonda directa (DIP)
-La muestra en disolución se coloca en un tubo capilar de vidrio o de aluminio
-Temperatura máxima: 300*C
-Diferentes velocidades de calentamiento
-Los espectros de masas se pueden obtener a menudo con una cantidad de muestra tan pequeña
como unos pocos nanogramos.
-La sonda permite el estudio de materiales no volátiles tales como carbohidratos, esteroides, especies organometálicas y sustancias poliméricas de bajo peso molecular
-Posibilidad de calentamiento directo de la muestra (sin solubilizar)
-El requisito principal de la muestra es que alcance una presión parcial de al menos 10-8 torr antes que empiece a descomponerse.

Sistema de Vacio
Los principales tipos de bombas que se utilizan para conseguir el alto vacío
• las difusoras
• las turbomoleculares

Otro tipo de bombas menos utilizadas:
• Son las iónicas
• las de sublimación de titanio
• las criogénicas

Bomba de Difusión
VENTAJAS DESVENTAJAS
Son confiables Riesgo de contaminación
De diseño simple
Gran duración
Funcionan sin ruido o vibración
Son relativamente baratas de operar y mantener


En cuanto al peligro potencial de contaminación por el
aceite de vacío de las bombas difusoras, hoy en día no es un factor a tener muy en
cuenta, ya que la utilización de aceites especiales y de sistemas de protección
automática contra accidentes de vacío, suministro de corriente eléctrica, o fallos del
circuito de refrigeración, hacen de este sistema de bombeo un método muy seguro

La desorción/ionización de matriz asistida con laser, MALDI, es una técnica en la muestra se mezcla con un solvente que contiene moléculas organicas que absorben fuertemente la radiación laser. La radiación que absorbe la matriz causa primero la evaporación del solvente, y después fotoexcita la muestra, la cual se ioniza.
Camara de Ionización Maldi
La desorción por láser (Laser Desorption: LD) es un eficiente método para producir iones gaseosos. Generalmente, pulsos de láser intensos (106-1010 W cm-1)
se enfocan sobre una superficie reducida de muestra (10-3-10-4 cm2), usualmente un sólido.
Con frcuencia, la longitud de onda del laser se puede sintonizar de modo que permita la ionización selectiva, y en consecuencia la cuantificacionde determinados compuestos dentro de muestras complicadas.

Las matrices deben tener una fuerte absorbancia a la longitud de onda del láser, masa suficientemente baja para que la sublimación ocurra con facilidad, estabilidad al vacío y prácticamente carecer de reactividad química excepto su capacidad para ceder protones.

MATRIZ APLICACIONES

Ácido α-ciano-4-hidroxicinámico Péptidos, proteínas, compuestos orgánicos
Ácido 3,5-dimetoxi-4-hidroxicinámico (sinápico) Biopolímeros de elevada masa molecular
Ácido 2,5-dihidroxibenzoico (gentísico) Péptidos, proteínas, carbohidratos
Ácido 3-hidroxipicolínico Oligonucleótidos
Trihidroxiacetofenona Oligonucleótidos, péptidos
Ácido 5-clorosalicílico Polímeros insolubles en agua



Comparación de Resultados
TOF
En estos aparatos se producen los iones positivos periódicamente por bombardeo de la muestra con impulsos de electrones, de iones secundarios o de fotones generados por láser. Los iones producidos de esta forma son acelerados en un tubo analizador libre de campo mediante un campo eléctrico pulsante de 103 a 104 V. La separación de los iones en función de la masa se produce durante su recorrido hacia el detector, situado al final del tubo. Estos aparatos presentan ventajas como la robustez, simplicidad, fácil acceso a las fuentes de iones y el virtualmente ilimitado intervalo de masas, pero tienen no obstante una sensibilidad y una resolución limitadas.
Detector
Los detectores proporcionan información sobre el flujo de iones o la abundancia de iones que salen del analizador de masas.

Sus características más importantes son sensibilidad, exactitud, resolución, tiempo de respuesta, estabilidad, amplio intervalo dinámico y un nivel de ruido bajo.
Detector tipo Chaneltron
MALDI-TOF
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