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Coloración Papanicolaou

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by

Malva Luz Olmo

on 21 May 2017

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Transcript of Coloración Papanicolaou

Citotecnología - Inst. Universitario Cemic
Técnica de coloración de Papanicolaou
Cestas de coloración
Ingreso de muestra al laboratorio
Guantes
Rotulación de vidrios
Muestras
Guantes de Polietileno
Guantes de Latex
(con o sin talco)
Guantes de nitrilo
Cesta o Canastilla de vidrio
Cesta o Canastilla de plástico
Cesta o Canastilla de acero inoxidable
Batería de Coloración de Papanicolaou
Técnica de coloración de Papanicolaou
Método Original de Coloración de Papanicolaou:

1. Alcohol etílico 96º 15 Seg.
2. Alcohol etílico 70º 15 Seg.
3. Alcohol etílico 50º 15 Seg.
4. Agua Destilada 15 Seg.
5. Hematoxilina de Harris 6 Min.
6. Agua destilada 10 inmersiones.
7. Sol ácido clorhídrico 0,5% 1 – 2 inmersiones rápidas.
8. Agua destilada 15 Seg.
9. Sol Amoníaco 1,5% en ol 70º La extensión vira al azul.
10. Alcohol etílico 50º 15 Seg.
11. Alcohol etílico 70º 15 Seg.
12. Alcohol etílico 96º 15 Seg.
13. O G 6 (orange) 2 Min.
14. Alcohol etílico 96º 10 inmersiones
15. Alcohol etílico 96º 10 inmersiones
16. EA 50 (36) Eosina amarillenta) 3 Min. (Usar EA 65 para orinas y esputos)
17. Alcohol etílico 96º (10 inmersiones)
18. Alcohol etílico 100º (10 inmersiones)
19. Xilol (10 inmersiones)
20. Montaje: Con Bálsamo de Canadá y cubrir con cubreobjetos de vidrio de la medida adecuada para cobertura total de la muestra
Tinción rápida de Papanicolaou (método modificado)

1. Alcohol 96º
2. Agua corriente 10 pasajes
3. Hematoxilina
4. Virar en agua corriente hasta que esta quede transparente sin trazas de colorante.
5. Alcohol 96º 10 pasajes
6. OG6

7. Alcohol 96º 10 pasajes
8. EA
9. Alcohol 96º 10 pasajes
10. Alcohol 96º 10 pasajes
10. Alcohol 100º 10 pasajes
11. Xilol 10 pasajes
12. Xilol 10 pasajes
13. Montar
Lápiz de punta de Widia
Lápiz con punta de Carburo de Tungsteno
Lápiz con punta de diamante
Lápiz grabador eléctrico
Agua
Hematoxilina
Alcohol 96º
Alcohol 96º
Alcohol 96º
Alcohol 100º
Alcohol 100º
Agua
Orange G
Alcohol 96º
Ea
Xilol
Agua corriente
Hematoxilina
Haematoxylom Campechianum Arbol nativo de México.
Las moléculas colorantes de la
hematoxilina penetran en la célula
y se dirigen al núcleo por un proceso físico-químico.
La hematoxilina es un colorante
nuclear, pero también tiñe las
proteínas ácidas del citoplasma.
Agua
El agua eliminará por arrastre físico el exceso de colorante intra y extracelular que no esté ligado al núcleo.
Virar en agua corriente hasta que esta quede transparente sin trazas de colorante.
Alcohol 96º
El alcohol 96° reemplazará el agua intra y
extracelular debido a que los colorantes posteriores son mas solubles en alcohol que
en agua.
Se realizaran 10 inmersiones en alcohol 96°
Orange G
Colorante monocromático que tiñe
la queratina del citoplasma de la célula de
color naranja brillante.
También da color a algunas proteínas
citoplasmáticas, a los hematíes y leve color a los núcleos.
Alcohol 96°
Se realizaran 10 inmersiones en alcohol 96°
El alcohol 96° eliminará el exceso de colorante intra y extracelular ya que el Orange G es
soluble en Alcohol.
EA
Colorante policromático (Eosina + Light Green + Pardo o Marrón de Binsmark)
Actúa sobre el citoplasma de la célula
La Eosina teñirá de rosado el citoplasma de las células maduras (superficiales) y hematíes.
El Light Green dará tonos verde-azulados al citoplasma de las células intermedias y parabasales, células cilíndricas, histiocitos y PMN.
El Pardo o Marrón de Binsmark teñirá de color pardo amarillo las mucinas
Alcohol 96°
Se realizaran 10 inmersiones en alcohol 96°
El alcohol 96° eliminará el exceso de colorante intra y extracelular ya que el EA
es soluble en Alcohol.
Alcohol 96°
El alcohol busca remover el fijador
Colocar las canastillas de Paps en alcohol 96°
por al menos 20 minutos.
para que luego puedan penetrar los
colorantes de la batería.
Fijación del material
Alcohol 96°
Bactericida: elimina las bacterias e
impide la putrefacción del material
Fijador por deshidratación
Cito Spray
Spray fijador de pelo
Elimina por arrastre físico los elementos que no son parte de la estructura celular.
Se obtendrán células fijadas llenas de moléculas
de agua para que pueda actuar la Hematoxilina.
Alcohol 96°
10 inmersiones
Alcohol Absoluto
El Alcohol absoluto elimina el agua
intra y extracelular, ya que los
siguientes procedimientos de
aclaramiento y montaje emplean
materiales que no son solubles en
agua.
10 inmersiones
Alcohol Absoluto
10 inmersiones
Xilol
Los xilenos se encuentran en los gases obtenidos en la destilación seca de la madera (de allí su nombre: xilon significa madera en griego).
El Xilol da transparencia a la célula, permitiendo de esta manera una mejor observación de los detalles celulares.
También busca la eliminación del alcohol ya que el proceso de montaje emplea sustancias que no son solubles en alcohol.
10 inmersiones
Montaje
El Bálsamo de Canadá es un abeto. La resina del bálsamo de Canadá es un líquido claro, transparente y adhesivo.
En citología, se utiliza el Bálsamo de Canadá sintético.
Pipeta Pasteur
Cubreobjetos
Muestra sin procesar
Las muestras deberán llegar envueltas junto con los datos clínicos de la paciente
Ct. Malva Luz Olmo
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