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Culture primaire

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by

Antoine Campeau Peloquin

on 2 June 2016

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Transcript of Culture primaire

la source (embryon de...)
la technique de dissection et de désagrégation
le type de milieu choisi

une méthode d'ensemencement particulière qui éliminerait les fibroblastes
Culture primaire
Première
mise en culture après isolement tissu

Trucs et conseils
éliminer le tissu
gras
et
nécrosé
retirer protéases par centrifugation délicate
instruments
affûtés
milieu
riche
et sérum
FBS
idéal
ensemencer à
forte
concentration cellulaire
privilégier tissu
embryonnaire
instruments
coupants
sources de fibroblastes indifférenciés
couche nourricière
facile
à disséquer
substrat propagation
virale
organes plus
faciles
à isoler
applications plus poussées
risques
infections
Si quantité limitée...
grattage
tamisage
trituration à la
pipette
trituration à la
seringue
Trypsine
tiède
Pour faciliter le tout
formulaire
sélection
milieu
sélectif
gradient
adhérence
gradient
détachement
les
plus
forts
les
moins
forts
Exercice
Vous souhaitez établir votre propre lignée de cellules musculaires cardiaques.

L'organisme donneur vous importe peu.
Identifiez
Désagrégation mécanique
exemple de flacons traités
http://www.emdmillipore.com/US/en/product/ECM-Proteins-and-Coated-Plates,MM_NF-C77812
100-300 g
N
feeder layer
Trypsine
froide
Collagénase
couche
nourricière
matrice extracellulaire
MEC
pure ?
perfusion
http://www.isletlab.org/multimedia/photo-galleries/human-islet-isolation-procedure
http://www.microscopyu.com/moviegallery/livecellimaging/
milieu
conditionné
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