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CROMATOGRAFIA SU STRATO SOTTILE
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Transcript
CROMATOGRAFIA SU STRATO SOTTILE: ESTRAZIONE DELLA CAFFEINA DA FARMACI ANTINFIAMMATORI
PROCEDIMENTO
PRINCIPIO TEORICO
MATERIALE
LA CROMATOGRAFIA E' UNA TECNICA DI SEPARAZIONE DELLE COMPONENTI DI UN MISCUGLIO OMOGENEO CHE SFRUTTA LA VELOCITA' DI MIGRAZIONE DELLE MOLECOLE SU UNA SUPERFICIE. LA CROMATOGRAFIA SI SVOLGE TRA UNA FASE STAZIONARIA ED UNA FASE MOBILE (SOLVENTE) CHE, RISALENDO, SEPARA LE VARIE COMPONENTI.
LA CAFFEINA E' UN VASOCOSTRITTORE CHE DIMINUISCE IL DIAMETRO DEI VASI SANGUIFERI, CHE SI ESPANDE AD OPERA DELLE CITOCHINE DURANTE UN'INFIAMMAZIONE (FLOGOSI).
- 3 PROVETTE
- 2 CONTAGOCCE
- 2 CAPILLARI
- 1 BECHER (100 mL)
- 1 LASTRINA DI VETRO CON GEL DI SILICE (fase stazionaria)
- SPATOLA D'ACCIAIO
- PASTIGLIA ANTIDOLORIFICA (farmaco: Neo Cibalgina)
- CLOROFORMIO
- AMMONIACA CONCENTRATA
- ACETONE
- CAFFEINA PURA
- SI PONGONO IN PROVETTA LA PILLOLA RIDOTTA IN POLVERE, 3 mL DI AMMONIACA CONC. E 1 mL DI CLOROFORMIO (CHCl3). AGITARE POI ATTENTAMENTE CON LA BACCHETTA DI VETRO.
- PRELEVARE CON IL COTAGOCCE LO STRATO DI CLOROFORMIO INFERIORE E VERSARLO IN UNA PROVETTA CON POCO SOLFATO DI SODIO ANIDRO (Na2SO4), IL QUALE SEPARA LE DUE SOLUZIONI LIMPIDA E TORBIDA. LA SOLUZIONE LIMPIDA E' DECANTATA IN UNA TERZA PROVETTA E CONCENTRATA IN BAGNOMARIA.
- SI DISEGNA SULLA LASTRINA DI GEL UNA LINEA A CIRCA 1,5/2 cm DAL FONDO E SI DEPOSITA SU DI ESSA UNA MACCHIA DI CAFFEINA PURA ED UNA MACCHIA DELLE PILLOLE SOTTO ESAME. USARE PER I PRELIEVI DISTINTI CAPILLARI E MANTENERE I DEPOSITI DELLE DUE SOSTANZE BEN DISTANZIATI TRA LORO.
- INSERIRE LA LASTRINA PER LO SVILUPPO NELL'APPOSITA VASCHETTA PER CROMATOGRAFIA CONTENENTE CIRCA 0,5 cm DELL'ELUENTE CLOROFORMIO-ACETONE (1:1).
- QUANDO IL FRONTE DEL SOLVENTE E' A CIRCA 1 cm DAL BORDO SUPERIORE, ESTRARRE LA LASTRINA, FAR EVAPORARE IL SOLVENTE ED ESAMINARLA CON LA LAMPADA UV. CERCHIARE LE MACCHIE CON LA MATITA.
- LE MACCHIE SI POSSONO RIVELARE ANCHE SOTTOPONENDO LA LASTRINA AI VAPORI DI IODIO (I2)
CALCOLO DEL FATTORE DI RITENZIONE E IDENTIFICAZIONE DELLA CAFFEINA
distanza percorsa dalla sostanza
Rf=
distanza percorsa dall'eluente
Il fattore di ritenzione è un valore adimensionale perchè dato dal rapporto tra due distanze.
0<Rf<1
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