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Miembro de la familia de la bleomicina / fleomicina de antibióticos aislados a partir de Streptomyces.
Muestra una toxicidad fuerte contra bacterias, hongos, plantas y líneas celulares de mamífero
X-33
GS115
SMD1168H
KM71H
El vector pPIC9K incluido en este kit permite el aislamiento de las inserciones de múltiples copias de un método in vivo, con el fin de probar si el aumento del número de copias de su gen recombinante dará lugar a un aumento posterior en la expresión de la proteína secretada.
Este método in vivo utiliza la resistencia a la geneticin ® (sulfato G418) para la detección de posibles inserciones de múltiples copias.
El vector pPIC9K es idéntica a pPIC9 excepto por la presencia del gen de resistencia a kanamicina para la selección in vivo de las inserciones de múltiples copias.
pPIC9K es funcional en cepas de Pichia GS115 y KM71. Las características adicionales del vector pPIC9K incluyen:
•9276 pb vector de fusión
•Cuatro sitios de restricción únicos: SnaB I, EcoR I, Avr II, Not I
•Expresión secretada de su gen usando la señal de secreción de α-factor
•Para la expresión, el gen debe ser clonado en el marco con el codón de iniciación de la secuencia señal.
•Para la sustitución de genes en AOX1 en GS115, linealizar con Bgl II
•Para la inserción de AOX1 en GS115 o KM71, linealizar con Sac I
•Para la inserción en HIS4, linealizar con Sal I (His + Mut genera en GS115 + y + en sus MutS KM71)