Extracción de ADN -METODO CHELEX
Lic. Viviana Tavera Quiroga
25/07/2020
Introducción
- Herramientas principales y primordiales
- técnicas de extracción de ADN
- PCR, reacción en cadena de la polimerasa (PCR por sus siglas en Inglés : Polymerase Chain Reaction
- PCR, reacción en cadena de la polimerasa
- utilizan principalmente para expresión génica, genotificación, detección de patógenos y análisis de mutaciones
- desnaturalización, hibridación y extensión
- templado o molde (ADN o ADNc), enzima, oligoelementos o primers, los desoxirribonucleótidos trifosfatados (dNTPs: adenina, timina, citosina y guanina), el ion magnesio (Mg +), una solución amortiguadora o buffer y H2O
- Azucares (desoxirribosa), grupo fosfato y una base nitrogenada (adenina, timina, guanina o citosina),
Extracción de ADN -Chelex-100
- CHELEX 100 es un material quelante, preparación para la reacción en cadena de la polimerasa uniéndose a cationes que incluyen Mg 2+
- Para purificar otros compuestos mediante intercambio iónico
- Extracción de ADN, proteinasa K y con solventes orgánicos, fenol/cloroformo,
- Finalidad es la amplificación y la tipificación en el locus HLA DQ para obtener los genotipos
- Medio para aumentar la señal de la amplificación por PCR de pequeñas cantidades de ADN liberadas
- Resina quelante
- Evita la degradación del ADN al quelar los iones metálicos que pueden actuar como catalizadores en la descomposición del ADN a altas temperaturas en soluciones de baja fuerza iónica