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MICROSCOPÍA DE LUZ ULTRAVIOLETA

Bárbara Siles Pili Marin

FUNDAMENTO

El microscopio óptico se ilumina con luz ultravioleta

Su longitud de onda es de aproximadamente 200nm --> proporciona un mayor poder de resolución que la luz visible.

La resolución de microscopio depende --> longitud de onda que se utiliza para iluminar la muestra.

+ baja λ, + resolución

Características

  • Todos los elementos ópticos del microscopio (incluso lentes) --> cuarzo o fluorita

  • No pueden ser de vidrio --> no transmite la luz ultravioleta.

  • Uso de la EPIILUMINACIÓN

  • Filtros y espejos dicroicos

  • Casos de absorción de la luz ultravioleta por parte de la muestra --> mejora del contraste.

  • Su estructura: igual a la del microscopio de fluorescencia (fuente de iluminación distinta--> lámparas de arco de mercurio o xenón)

Imágenes

  • La imagen aumentada no puede ser observada directamente a través de unos oculares.

  • Con un sensor que reacciona a la luz ultravioleta incidente y reconstruye la imagen de la muestra.

  • Sensor --> basado en técnicas de fluorescencia, fotografía o tecnología digital.

  • Las imágenes obtenidas --> semejantes a las del microscopio de fluorescencia, las estructuras marcadas aparecen brillantes contrastando con un fondo negro.

  • Imagen --> se muestra con fosforescencia, en fotografía o con un escáner electrónico.
  • August Köhler y Moritz von Rohr en 1904

  • Objetivo de mayor resolución

  • Modificaciones significativas

  • Potencial en la primera mitad del siglo XX

  • Competencia de nuevas técnicas

  • Bases para la microscopía de fluorescencia

  • Desarrollo de diversas técnicas

August Köhler

HISTORIA

Moritz Von Rohr

VARIANTES

  • Microscopio de fluorescencia confocal (imágenes tridimensionales)

  • Microscopio de superresolución (superan la limitación del óptico)

  • Microscopio de luz confocal convencional

  • Microscopio de luz total interna (TIRF)

  • Microscopio de contraste de fase avanzado

APLICACIONES

Industria farmacéutica

Producción de semiconductores

Biología

Ciencia forense

Ciencia

forense

  • Desarrollo de las ciencias forenses

  • Microscopio compuesto (huellas)

  • Ampliación de estudios --> Poder Aumento

  • Microscopio de comparación en el siglo XX (Gravelle y Goddard)

  • Asimilación de avances técnicos

Dando lugar

Mayor precisión en la analítica forense

Patología --> Estudios de los materiales

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