Introducing
Your new presentation assistant.
Refine, enhance, and tailor your content, source relevant images, and edit visuals quicker than ever before.
Trending searches
Esculin Hydrolysis
267
ESCULIN HYDROLYSIS
EXPECTED
RESULT
โดยจะใช้จำแนกแบคทีเรียกลุ่ม Enterococci และ Group D Streptococci
PROPOSE
เพื่อแยกและระบุชนิดของแบคทีเรียที่
สามารถย่อยสลาย esculin ให้เป็น แหล่งคาร์บอนได้
POSITIVE
NEGATIVE
BILE ESCULIN TEST
อาหารมากกว่าครึ่งหลอดเปลี่ยนเป็นสีดำภายใน 1-2 วัน
อาหารไม่มีการเปลี่ยนแปลงเป็นสีดำ
หรืออาจเกิดสีดำไม่ถึงครึ่งหลอด
Esculin เป็น glycoside
ชนิดหนึ่ง ที่ประกอบด้วย
glucose และ esculetin
สามารถสลายได้ง่ายเมื่ออยู่
ในสภาวะที่เป็นกรด
Bile Esculin Agar
- selective and differential medium
- ประกอบด้วยน้ำดีที่จะไปยับยั้งการเจริญโตของแบคทีเรียแกรมบวก และมี ferric citrate เป็นตัวบ่งชี้การเกิดปฏิกิริยา
แบคทีเรียสามารถย่อยสลาย esculin ----> esculetin ได้
และ esculetin จะทำปฏิกริยากับ ferric ion จะได้สารเชิงซ้อน สีน้ำตาล/สีดำเกิดขึ้น นั่นแสดงว่าให้ผล possitive
bile esculin agar slant
อาหารที่ใช้ในการทดสอบ
FORMULA
PRINCIPAL
Beef Extract 11 g
Enzymatic Digest of Gelatin* 34.5 g
Esculin 1 g
Oxbile** 2 g
Ferric Ammonium Citrate*** 0.5 g
Agar 15 g
Distilled water 1000 ml.
Final pH: 6.6 +-0.2 at 25 ^C
แบคทีเรียส่วนใหญ่สามารถย่อยสลาย esculin ให้เป็นแหล่งพลังงานได้ แต่มีแบคทีเรียไม่กี่ชนิดที่จะ สามารถเจริญและย่อยสลาย esculin ในสภาพที่มี น้ำดีอยู่ในอาหาร
การทดสอบ
หากเชื้อแบคทีเรียสามารถเจริญบนอาหาร
และสามารถย่อยสลาย esculin ได้ จะ
ได้ glucose และ esculetin
เป็นผลิตภัณฑ์
เตรียมส่วนผสมของอาหาร ต้มละลายให้เข้ากัน แบ่งใส่หลอดทดลองประมาณ 3 ml. นำไปนึ่งที่
อุณหภูมิ 121^C เป็นเวลา 15 นาที เอียงหลอดให้
เป็นลักษณะ slant
esculetin ที่เกิดขึ้นจะทำปฏิกิริยา
กับ ferric ion ที่อยู่ในอาหารเกิด
เป็น phenolic ion complex ซึ่ง
ทำให้อาหารทดสอบเป็นสีน้ำตาล
จนถึงสีดำ
ปลูกเชื้อด้วยการ เขี่ยเชื้อมา 1 loop ลากให้เป็นเส้น
ตรงบนผิวหน้าอาหาร บ่มที่อุณหภูมิ 35-37^C
เป็นเวลา 18-24 ชั่วโมง
THANK YOU