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Transcript

GRACIAS

DETECCIÓN DE ÁCIDOS NUCLÉICOS

SSCP

(Single Strand Conformation polymorphims).

is important

Estos métodos utilizan una cadena sencilla de ADN marcada por un método físico-químico, puede ser con radiactividad o con un fluorocromo. Esta cadena de ADN tiene una secuencia de nucleótidos conocida y se utiliza como sonda para detectar otras moléculas de ARN o ADN de cadena sencilla de secuencia parecida

  • Usado como marcador genotípico
  • Se utiliza para descubrir nuevas cadenas de polimorfismo, aparte de una secuencia de ADN
  • Detecta mutaciones en la inf. genética de los virus

is here

SOUTHERN BLOT

(ADN CELULAR)

VIDEO SOUTHERN

SNP

( Polimorfismo de nucleótido simple)

ENZIMA DE RESTRICCIÓN:

Con la que el ADN es dirigido

ELECTROFORESIS:

Mediante la cual los fragmentos son separados por tamaños en un gel.

DESNATURALIZACIÓN: De los fragmentos de ADN de doble cadena mediante un proceso químico y se forma ADN de una hebra.

is important too

TÉCNICAS DE BIOLOGÍA MOLECULAR: ANÁLISIS DE RESTRICCIÓN (RFLP), SSCP, SOUTHERN BLOT, NORTHERN Y WESTERN BLOT.

GENÉTICA

Hibridación:

Sobre un filtro de nitrocelulosa, queda representada una réplica de la disposición de los fragmentos de ADN presentes en el gel.

Incubación:

Durante un tiempo con la sonda marcada se va hibridando a las moléculas de ADN de cadena sencilla de secuencia complementaria.

Es una variación en la secuencia de ADN

CASOS:

  • INMIGRACIÓN

UN JÓVEN ORIGINARIO DE GHANA, 99,99% Probabilidad

  • JOSEF MENGELE

ADN extraído de un hueso del esqueleto con el ADN del hijo de Mengele, 99,94% de probabilidad

TÉCNICA DE DETECCIÓN DE HUELLA GENÉTICA

  • OVEJA DOLLY

ADN era idéntico al de la oveja donante

POLIMORFISMO DE LONGITUD DE LOS FRAGMENTOS DE RESTRICCIÓN - RFLP

  • COLIN PITCHFORK

Violó y asesinó a dos niñas, la primera en Narborough, Leicestershire, el 21 de noviembre de 1983, y la segunda en Enderby, también en Leicestershire, el 31 de julio de 1986. Fue detenido el 19 de septiembre de 1987, y condenado a cadena perpetua el 22 de enero de 1988, después de admitir ambos asesinatos.

DNA de diferentes personas cortados con la ayuda de enzimas de restricción se diferencian en la cantidad y tamaño

ALEC JEFFREYS

Se usa como marcador para identificar grupos particulares de personas con riesgo a contraer ciertas enfermedades, en ciencia forense, en pruebas de paternidad ya que puede mostrar la relación genética entre individuo

POLIMORFISMO

Un método para la detección de SNP es por medio del polimorfismo en la longitud de fragmentos de restricción (SNP-RFLP).

¿

Es una variación en la secuencia de un lugar determinado del ADN entre los individuos de una población, las copias de un gen de una población no son exactamente idénticas.

Se produce polimorfismo de un nucleótido individual cuando la diferencia entre los genes comparados ya tiene el tamaño de una base.

La variación debe aparecer al menos en el 1% de la población

Sustitución de una simple base nitrogenada

?

QUÉ ES

Afecta a una sola base (adenina (A), timina (T), citosina (C) o guanina (G)) de una secuencia del genoma.

Andrea Ramírez

Tatiana Rincón

NORTHERN Se utiliza para realizar estudios de expresión génica para conocer qué genes están activos formando ARN mensajero en qué condiciones, en qué tejidos o tipos celulares. Este requiere transferir moléculas de ARNm separadas a una membrana y exponerlas a una sonda de DNA radioactiva seleccionada.

  • No es utilizado para conocer el tamaño de los ARN

NORTHERN BLOT

(CADENA DE ARN)

Un ejemplo de un SNP es la alteración del segmento de ADN:

AAGGTTA a ATGGTTA

donde la segunda "A" en el primer fragmento se sustituye con una "T".

El ARN se extrae

Se fracciona en tamaños variables mediante una electroforesis en gel de poliacrilamida

El proceso continúa de forma semejante a la hibridación de tipo Southern

Head

WESTERN BLOT

¿Qúe es y para qué sirve una enzima de restricción?

De esta forma se puede estudiar la presencia de la proteína en el extracto y analizar su cantidad relativa respecto a otras proteínas.

DATOS IMPORTANTES:

  • El Western blot fue desarrollado en el laboratorio de George Stark, en la Universidad de Stanford.
  • El nombre (Western, occidental en inglés) le fue dado por W. Neal Burnette5 , y consiste en un juego de palabras con una técnica análoga pero que usa DNA, el Southern (sureño) blot, que en este caso debe su nombre a su descubridor, Edwin Southern.

(PROTEÍNAS)

Procedimiento

Body

Proteínas de origen bacteriano

Capacidad de cortar

las moléculas de DNA

bicatenario en sitios

determinados de

la secuencia

5

(cc) image by jantik on Flickr

Se utiliza un enzima

cromogénica

Body

Del genero y la

especie del que

se ha aislado.

Body

1200

endonucleasas

de restricción

4

(cc) image by nuonsolarteam on Flickr

2005

2002 March

Body

2010

Anticuepo encuentra a la proteína

correspondiente.

Body

Es útil en la genética y la biología de investigación, análisis forense , y la huella dactilar del ADN .

2000

Body

Endonucleasas

3

Body

Se incuba en una solución con un anticuerpo contra la proteína

VNTR(número variable de repeticiones en tándem)

Cada restrictasa

reconoce y corta

una secuencia

nucleotídica

particular

2

Se unen a un filtro

1

Proteínas separadas por electroforesis

Pueden mostrar

las variaciones de

longitud entre

los individuos

Spark

SIMILITUDES Y DIFERENCIAS EN LOS PROCEDIMIENTOS

Es una ubicación en

un genoma en una breve

secuencia de nucleótidos

que se organiza

como una repetición

en tándem.

Se pueden encontrar

en muchos cromosomas

Cada variante actúa como

una herencia de alelos.

LA VARIACIÓN EN EL NÚMERO DE REPETICIONES CREA DIFERENTES ALELOS

MICROSATÉLITES

(SSR (Short Sequence Repeat)

ó

STR (Short Tandem Repeat)

SON SECUENCIAS

DE ADN

ELANÄLISIS DE STR ES UNA TECONOLOGÍA QUE SE USA EN CIENCIA FORENSE

En el ADN se produce cuando un patrón de dos o más nucleótidos y las secuencias se repiten adyacentes el uno al otro. El patrón puede variar en longitud de 2 a 50 pares de bases (pb).

PRUEBAS DE PATERNIDAD Y CARTOGRAFÍA,

TASA DE MUTACIÓN

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