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E. Coli Transformation
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Transcript
조원소개
이제중
이희연
이소성
임동규
E. Coli Transformation
목차
1. 실험목적
2. 관련이론
3. 실험과정
4. 주의사항
2. 관련이론(1)
형질전환
[transformation]
인공적인 형질 전환 방법(1)
electroporation
인공적인 형질 전환 방법(3)
CaCl₂-heat transformation
•칼슘이온을 통해 세포막내에 전하 불균형이 생김
•세포막 내외의 열 불균형으로 플라스미드가 세포안으로 빨려들어감
세포를 DNA 용액에 넣고 직류 고전압의 펄스를 통과시켜 세포 내로 DNA를 도입시키는 유전자 도입방법.
인공적인 형질 전환 방법(2)
1. 실험목적
conjugation
대장균의 형질전환을 유도함으로써
유전자 재조합의 기초를 이해한다.
한 세균에서 다른 세균으로 직접 유전 물질이 전달되는 과정
3. 실험과정
2. 관련이론(4)
도말법
Competent Cell 제조방법
•한종의 미생물 colony를 얻기 위한 방법
•표면도말법, 3분도말법 등이 있다.
Chemical Treatment Method
- CaCl2 Method *
- RbCl2 Method *
- Ultra Competent Cell (Inoue Method)
Transformation 과정
2. 관련이론(2)
수용세포
CaCl2로 세균 세포 처리.
Competent cell 제조.
plasmid DNA add.
- 대부분의 박테리아는 제한된 양의 DNA만을 수용
동식물세포에서의 형질전환
Heat shock.
- 형질전환을 효과적으로 하기 위해 DNA를 받아 들이는 능력을 향상시킨 세포
2. 관련이론(3)
배양배지
미생물이나 세포, 혹은 이끼 같은 작은 식물 등을 증식시키기 위한 액체나 젤 상태의 영양원.
※LB배지
•가장 기본적인 배지로 세균이나 대장균을 배양할 때 사용
•tryptone, yeast extract, NaCl가 주성분
외부로부터 주어진 DNA에 의하여 생물의 유전적인 성질이 변하는현상.
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