Introducing 

Prezi AI.

Your new presentation assistant.

Refine, enhance, and tailor your content, source relevant images, and edit visuals quicker than ever before.

Loading content…
Loading…
Transcript

Western Blotting

Protein Extractoin

Freeze-thaw

Sonication

세포를 얼렸다 녹였다를 반복

고주파 음파를 사용하여

세포, 박테리아, 포자, 정밀 절단 조직의 lysis

박테리아와 포유동물 세포

100mL 이하의 볼륨에 적합

매우 긴 시간

2501 김찬명

sonicator

manual grinding

물리적 Cell lysis

mortar and pestle

즉, 막자사발을 이용

액체 질소로 얼린 조직을

mortar and pestle 을 이용해 분쇄

비싼 장비

Homogenizaion

단단한 세포벽이 있는 식물세포에 적합

세포를 강제적으로 좁은 공간에 밀어넣음

샘플 유지의 귀찮음

protease

작은 볼륨, cultured cell

liquid nitrogen-cooled mortar

단백질 분해 효소 :

사용상의 부정확함

Dounce homogenizer

French press

세포의 복구

세포외 물질의 분해

phosphatase

mechanical

인산 가수분해 효소 :

믹서기처럼 회전 칼날이 세포, 조직을 갈아냄

진핵 세포의 신호 전달 조절

가수분해효소

간, 근육과 같은 많은 양의 복잡한 조직

waring blender

Cell lysis

세포 내에 존재

평소에는 세포 내에서 조절되어 단백질들에 영향을 끼치지 않음

protein assay

Protease Inhibition

and Protein Stabilization

세포막의 파괴와

세포 소기관의 분리

단백질 추출 및

단백질 정제의 첫번째 단계

protease&

phosphatase inhibitor

세포막의 구조

centrifugation

protease 와 phosphatase가

단백질들을 변성시키는것을

억제

밀도에 의해 분리

단백질의 안정화

Detergent

ionic detergent

negatively or positively charged

-anionic or cationic

membrane을 쉽게 분산시키고, protein 까지 파괴

SDS-PAGE

non-ionic detergent

charge 되지 않음

protein과 핵막에 큰 영향을 주지 않음

Detergents

zwitterionic detergent

both negatively and positvely charged , 전체적으로는 zero charged

micelle

Membrane protein extraction

화학적 cell lysis

Protein Refolding

Transfer

Reagent(detergent)를

이용해 세포막 파괴

cell lysis 과정에서

변성된 단백질의 복구

항원-항체 반응

Protein Extraction

Detergent의 작용

Mitochondrial protein isolation

Bloking

Detection

lysis 된 cell 에서

필요한 protein 추출

Nuclear protein extraction

Subcellular

protein fractionation

Learn more about creating dynamic, engaging presentations with Prezi