Julian Mora

https://www.google.com.co/url?sa=i&source=images&cd=&ved=2ahUKEwjOn4r_3vLcAhUDr1kKHWkECHgQjRx6BAgBEAU&url=https%3A%2F%2Fwww.bbvaopenmind.com%2Farticulos%2Fel-siglo-del-gen-biologia-molecular-y-genetica%2F&psig=AOvVaw0h4Zp3ff8FRGPTzGHRMudj&ust=1534549085516815

Biología molecular

Osteomielitis crónica

• Estudio de los procesos que se desarrollan en los seres vivos desde un punto de vista molecular.

Es una infección ósea. Es principalmente causada por bacterias u otros gérmenes.

Objetivos

https://www.google.com.co/url?sa=i&source=images&cd=&ved=2ahUKEwjkzNWb2_fcAhVirlkKHXudCSwQjRx6BAgBEAU&url=https%3A%2F%2Fwww.leonoticias.com%2Fsociedad%2Fciencia%2Fnueva-forma-adn-20180424112539-ntrc.html&psig=AOvVaw3eDfrN54wABpjw1TMY4CE9&ust=1534719849933818

RAC01. Explicar la estructura y función del cuerpo humano en condiciones de normalidad

RAE: CBM-BM: Describir en qué consisten las técnicas de biología molecular para el diagnóstico de infecciones osteoarticulares, sus ventajas y limitaciones.

https://www.google.com.co/url?sa=i&source=images&cd=&ved=2ahUKEwjGvJHen_rcAhXEtlkKHRLnDBkQjRx6BAgBEAU&url=https%3A%2F%2Fmedlineplus.gov%2Fspanish%2Fency%2Fesp_imagepages%2F9712.htm&psig=AOvVaw1szh17zOaEJ_v0ewD2Yggs&ust=1534806986590484

Cuando aparece en adultos, suele deberse a un compromiso en la resistencia del sujeto debido a debilidad, drogodependencia, infecciones del canal de la raíz de un diente o por el uso de medicamentos inmunosupresores.

Dos macromoléculas en particular son su objeto de estudio:

• Los ácidos nucleicos, entre los cuales el más utilizado es el ácido desoxirribonucleico (ADN), el componente de genes.
• Las proteínas, que son los agentes activos de los organismos vivos.

Julián Mora

PCR: Reacción en cadena de la polimerasa

Pruebas y exámenes

Termociclador ¿Como lo hace?

Reactivos

https://es.wikipedia.org/wiki/Osteomielitis

Aumenta casi de manera exponencial después del tercer ciclo

Es un aparato usado en Biología Molecular que permite realizar los ciclos de temperaturas necesarios para la amplificación de diversas hebras de ADN en la técnica de la PCR

• Hemocultivos
• Biopsia de hueso
• Gammagrafía del hueso
• Radiografía del hueso
• Hemograma o conteo sanguíneo completo (CSC)
• Reacción de la cadena de polimerasa (PCR)

• ADN molde
• Agua desionizada
• Primers (Cebadores)
• Taq Polimerasa (DNA polimerasa)
• Solución buffer (MgCl2)
• dNTPs (Desoxinucleótidos trifosfatados)

https://www.google.com.co/url?sa=i&source=images&cd=&cad=rja&uact=8&ved=2ahUKEwjej8-wzvncAhVlu1kKHXBqDwsQjRx6BAgBEAU&url=https%3A%2F%2Fes.khanacademy.org%2Fscience%2Fbiology%2Fbiotech-dna-technology%2Fdna-sequencing-pcr-electrophoresis%2Fa%2Fpolymerase-chain-reaction-pcr&psig=AOvVaw029Kt_oOXTLv7X39VuedOK&ust=1534785027825307

https://www.google.com.co/url?sa=i&source=images&cd=&cad=rja&uact=8&ved=2ahUKEwjG_M3povrcAhWQrFkKHQJHAQIQjRx6BAgBEAU&url=https%3A%2F%2Fbiologia.laguia2000.com%2Ftecnicas-en-biologia%2Fcomponentes-de-la-pcr&psig=AOvVaw3XlTd3p_k1NUf55J3tYz6K&ust=1534807819830555

https://www.google.com.co/url?sa=i&source=images&cd=&ved=2ahUKEwiSrLvBqvrcAhVHqlkKHXVjCCwQjRx6BAgBEAU&url=http%3A%2F%2Fwww.elmundo.es%2Fsalud%2F2015%2F01%2F23%2F54c132e5268e3e236b8b4595.html&psig=AOvVaw1Td4tgI46dybZHDhq1J3ON&ust=1534809878689445

Es una técnica de biología molecular cuyo objetivo es obtener un gran número de copias de un fragmento de ADN particular, partiendo de una única copia de un fragmento original

https://www.google.com.co/url?sa=i&source=images&cd=&ved=2ahUKEwi5qPS5ovrcAhXmtlkKHY8kBi8QjRx6BAgBEAU&url=https%3A%2F%2Fbiologia.laguia2000.com%2Ftecnicas-en-biologia%2Fexplicando-el-protocolo-de-la-pcr&psig=AOvVaw1CNZI2uoeo3HQJG0r5pFJh&ust=1534807689060604

https://www.google.com.co/url?sa=i&source=images&cd=&ved=2ahUKEwiEn_nfp_rcAhWCmlkKHZLwCQIQjRx6BAgBEAU&url=https%3A%2F%2Fwww.fishersci.com%2Fshop%2Fproducts%2Feppendorf-pcr-clean-microcentrifuge-tubes-0-5ml%2F0540293&psig=AOvVaw0VUNVlS7kM_hnK6fMZ8y6Q&ust=1534809050703226

https://www.google.com.co/url?sa=i&source=images&cd=&ved=2ahUKEwiArr7vqvrcAhWIk1kKHQ4LCF4QjRx6BAgBEAU&url=https%3A%2F%2Fwww.cancercarewny.com%2Fcontent.aspx%3Fchunkiid%3D247778&psig=AOvVaw3gcgXmoyq88mzLc7Mld6qa&ust=1534809927878123

Pasos de la PCR

Tiempo del procedimiento

Desnaturalización

3' 5'

5' 3'

Separación de la doble helice

debido al calor

3' 5'

5' 3'

https://es.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr-electrophoresis/a/gel-electrophoresis

https://es.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr-electrophoresis/a/polymerase-chain-reaction-pcr

Electroforesis

La reacción se calienta bastante para separar, o desnaturalizar, las cadenas de ADN. Esto proporciona los moldes de cadena sencilla para el siguiente paso. (95°C)

Es una técnica utilizada para separar fragmentos de ADN (u otras macromoléculas, como ARN y proteínas) por su tamaño y carga.

Anillamiento

La reacción se enfría para que los cebadores puedan unirse a sus secuencias complementarias en el molde de ADN de cadena sencilla. (55-65°C)

https://es.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr-electrophoresis/a/gel-electrophoresis

3' 5'

5' 3'

Posicionamiento de los primers (cebadores)

3' 5'

5' 3'

https://es.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr-electrophoresis/a/polymerase-chain-reaction-pcr

Extensión o Elongación

La temperatura de la reacción se eleva para que la Taq polimerasa extienda los cebadores y sintetice así nuevas cadenas de ADN. (72°C)

3' 5'

5' 3'

Formación de la doble hélice

3' 5'

5' 3'

https://es.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-sequencing-pcr-electrophoresis/a/polymerase-chain-reaction-pcr

Referencias

Glosario

PCR VS Cultivos

Ventajas

Limitaciones

• Los métodos basados en cultivo, requieren 2, 3 o más días, mientras la PCR solo unas cuantas horas
• La PCR es mas sensible y precisa
• Con una única reacción de PCR pueden detectar casi cualquier bacteria

• Son métodos relativamente caros y poco abordables para algunos laboratorios como método de rutina.
• su facilidad de contaminación al detectar la presencia de ADN contaminante en los reactivos, lo que no permite diseñar PCRs con una elevada sensibilidad analítica

• https://www.researchgate.net/publication/289997025_BIOLOGIA_MOLECULAR_APLICADA_AL_DIAGNOSTICO_CLINICO
• http://etimologias.dechile.net/?osteomielitis
• https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/44%20PCR.pdf
• https://www.e-allscience.com/blogs/news/8477021-que-es-y-como-funciona-un-termociclador
• https://mutis.urosario.edu.co/pluginfile.php/396517/mod_folder/content/0/Biolog%C3%ADa%20Molecular/RAE%20BM%20Polymerase%20Chain%20Reaction%20molecular%20diagnostic%20technology%20for%20monitoring%20chronic%20osteomyelitis.pdf?forcedownload=1
• https://mutis.urosario.edu.co/pluginfile.php/396517/mod_folder/content/0/Biolog%C3%ADa%20Molecular/RAE%20BM%20Procedimientos%20en%20Microbiolog%C3%ADa%20Cl%C3%ADnica%20Seccion%205.1.pdf?forcedownload=1
• https://biologia.laguia2000.com/tecnicas-en-biologia/componentes-de-la-pcr
• JUEGO: https://learn.genetics.utah.edu/content/labs/pcr/

• Osteomielitis: inflmacion de hueso y la medula osea. Griego Osteon (hueso)0 y mielos (medula) + sufijo -itis (inflamacion)
• PCR: polymerase chain reaction (Reacción en cadena de la polimerasa)
• Primer (cebador): Secuencias de ADN que se ligan a un gen "Blanco"
• Termociclador: Maquina que permite cambios de temperatura de un proceso
• Electroforesis en gel: separacion de ADN en gel por medio de corriente electrica