Ley de Beer
La Ley de Beer es una ecuación que relaciona la absorción de luz con las propiedades del material atravesado [1].
Ecuación 2. Ley de Beer
A = Absorción
c = Concentración de la muestra en mol/l
l = Longitud de la celda
ε = Coeficiente de extinción molar(cm -1 litro / mol)
Espectro de Absorción
Energía absorbida en la transición electrónica
Es el nombre de una gráfica, la cual muestra la intensidad de la energía absorbida por una molécula, a partir de diferentes longitudes de onda [2].
Ecuación 1. Energía absorbida en la transición electrónica
Figura 4. Espectro de Absorción. Tomado de [1].
FOTOCOLORIMETRÍA
* υ es la frecuencia de la radiación
* h es la constante de Planck
* λ longitud de onda
Longitud de onda
ABSORCIÓN DE ENERGÍA POR SUSTANCIAS COLOREADAS
Espectro Electromagnético
Figura 2. Longitud de onda. Tomado de [2].
Figura 1. Espectro Electromagnético. Tomado de [2].
¿QUÉ ES?
Es una técnica utilizada para medir concentraciones de diferentes compuestos, mediante la intensidad de luz absorbida (A) o transmitida (T) por una solución coloreada [1].
FOTOCOLORIMETRÍA
Daniela Montoya Lopera. Ing. Química
Jenny Bibiana Marin Lopez.Ing. Química
20-Ago-2014
TRANSICIÓN ELECTRÓNICA
Figura 3. Niveles de energía de los orbitales moleculares η, σ, π, π* y σ* y transiciones electrónica permitidas. Tomado de [1] .
APLICACIÓN DE LA LEY DE BEER
La aplicación mas importante de la ley de Beer es la determinación de concentraciones desconocidas de soluciones que absorben en la región uv-visible [1].
Ecuación 3. Concentración de una muestra problema
Curva de Calibración
Determinar concentraciones desconocidas
más precisas por medio de la ley de Beer [1].
REFERENCIAS
[1] Escuela de química. (2014-2). Guía de laboratorio, "Práctica N°1.Espectro de absorción y curva de calibración mediante fotocolorimetría".Universidad Nacional de Colombia sede Medellín .
[2] McMurry, J.Química Orgánica. 7ma Ed. Cengage Learning, México. 2008.
[3] Contreras, J. (2005). Bioquímica Médica I . [ultimo acceso 17-ago-2014] Available en http://www.geocities.ws/jorgecon/guia-espectrofotometria.pdf
ESPACIO PARA PREGUNTAS Y COMENTARIOS
PRÁCTICA N°1 ESPECTRO DE ABSORCION Y CURVA DE CALIBRACIÓN MEDIANTE
FOTOCOLORIMETRÍA
Fotocolorímetro
Materiales:
* Fotocolorímetro
*Reactivo de Biuret
*Solución patrón de albúmina
* Solución salina
*Muestra problema
[1]
PROCEDIMIENTO
Figura 6. Abúmina coloreada
1.DETERMINACIÓN DEL ESPECTRO DE ABSORCIÓN DE LA ALBÚMINA [1].
2. PREPARACIÓN DE LA CURVA DE CALIBRACIÓN DE LA ALBÚMINA [1].
Instrumento utilizado para determinar la concentración de sustancias disueltas en líquidos o sólidos.
CONCEPTO DE BLANCO EN FOTOCOLORIMETRÍA
Para utilizar un espectrofotómetro hay que preparar una serie de diluciones con
concentración conocida. Una de estas muestras no contendrá soluto y es conocido como el “BLANCO”. Se usa para ajustar el instrumento para leer transmitancia del 100 % o 0
de absorbancia [3].
CELDA
Figura 7. Celdas espectrofotómetros. Tomado de [3].
Una cubeta de espectrofotómetro es un pequeño tubo de sección circular o cuadrada, sellado en un extremo, fabricado en plástico, vidrio o cuarzo (transparente a la luz ultravioleta) y diseñado para mantener las muestras durante los experimentos de espectroscopia [3].
Figura 6. Fotocolorímetro.Tomada de [2].
Figura 5. Curva de Calibración. Tomado de [1].