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PRUEBA DE CATALASA Y OXIDASA
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PRUEBA DE CATALASA Y OXIDASA
Prueba de Oxidasa.
Método
Método
1. Colocar una gota de agua oxigenada sobre un portaobjetos con ayuda de una pipeta Pasteur.
2. Suspender la bacteria.
3. Detectar la formación de burbujas.
Fundamento :
Determina la presencia del citocromo C, El citocromo C oxida al NNN’N',tetrametil,1-4,fenilendiamina (solución acuosa al 1% (p/v). La oxidación se detecta como color azul.
PRUEBA DE CATALASA
1. Poner un trozo de papel de filtro sobre una de las tapaderas de una placa de Petri.
2.Añadir una gota del reactivo de oxidasa.
3. Depositar sobre el reactivo masa bacteriana (actuar de forma rápida y con un asa de platino nueva o con un palillo de dientes).
FUNDAMENTOS :
- La catalasa es una enzima que poseen la mayoría de las bacterias aerobias. Descompone el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. El desprendimiento de burbujas procedentes del oxígeno indica que la prueba es positiva.
Resultado
La reacción positiva la indica un color azul-violeta intenso antes de 10 segundos.
La imagen muestra varias bacterias que carecen de citocromo c oxidasa terminal y dos que las poseen (posiciones sobre las 11 y sobre las 13).
Materiales y reactivos
El resultado es positivo si en la colonia hay efervescencia. Ejemplos:
* Catalasa (+): Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas sp.
* Catalasa (-): Streptococcus spp.
Materiales y reactivos
Para el correcto desarrollo de la práctica serán necesarios los siguientes materiales:
- Portaobjetos.
- H2O2 de 10 volúmenes Cultivos en fase exponencial de bacterias.
- Asas e hilos de siembra.
- Pipetas Pasteur.