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Transcript

Este mecanismo de resistencia se detecta en el laboratorio utilizando discos de cefoxitina de 30 mg. En el caso de S. aureus y de S. lugdunensis, un halo de 21mm indica la presencia del gen mecA. En el caso de otros estafilococos coagulasa negativa (ECN), un halo de 24mm indica la presencia de este gen

El uso de Cefoxitina para predecir R a Oxacilina.

Detección de resistencia a oxacilina utilizando cefoxitin

El resultado de Cefoxitin debe reportarse como Oxacilina

Los S. aureus y coagulasa negativa meticilino resistente deben informarse:

R a todas las cefalosporinas y Betalactámicos:

Amox/clav, Amp/sulb,Pip/Tazo e Imipenem

Independientemente de resultados en antibiograma.

RESISTENCIA A GLICOPEPTIDOS EN COCOS GRAM POSITIVOS

Mecanismos de Resistencia en Staphylococcus aureus

Genero Staphylococcus

  • S. aureus vancomicina-intermedio (VISA)

cepas con reducida susceptibilidad a la vancomicina(CIMs 8-16 μg/mL) y completamente resistentes (CIMs ≥32 μg/mL). Las cepas VISA pueden presentar también sensibilidad disminuida o resistencia a la teicoplanina, por lo que hoy en día suele utilizarse el término GISA (glycopeptide-intermediate S. aureus)

  • Resistencia en CoNS
  • Resistencia Completa a Vancomicina

Detección de S. aureus resistente a meticilina (SARM) en el laboratorio

El mecanismo de resistencia a meticilina de S. aureus se asocia en general a la síntesis de una nueva PBP (PBP2a ó PBP2´) de 78 kDa con baja afinidad por la meticilina y el resto de los betalactámicos.

El determinante genético de esta proteína es de naturaleza cromosómica (Gen mec). Este gen contiene loci distintos, el mecA, que codificaría la PBP2a, y el mecR o gen regulador

BETALACTAMASAS EN GRAM POSITIVAS

  • Genero: Staphylococcus spp.

Un porcentaje muy reducido de cepas de Staphylococcus son sensibles en la actualidad a la penicilina. El fenotipo de resistencia mas frecuente en este genero incluye resistencia a penicilina y a ampicilina por producción de penicilinasa.

*1

*2

*1: Mecanismo de resistencia NINGUNA incidencia BAJA

2*: Mecanismo de resistencia penicilinasa Incidencia muy ALTA

Complejo MLSB que incluye:

Macrólidos (eritromicina)

Lincosamidas (clindamicina)

Streptograminas B.

El mecanismo de acción de este complejo MLSB, consiste en la inhibición de la síntesis proteíca mediante una metilasa ribosomal que se une al sitio P en la subunidad 50S del ribosoma bacteriano

Fenotipo MLSB en

cocos Gram positivos

Genero Enterococcus

El fenotipo mas frecuente en E. faecalis, pero cada vez menos frecuente es E. faecium, incluye sensibilidad a penicilina, ampicilina e imipenem.

Genero Streptococcus spp:

Los enterococos pueden adquirir resistencia de alto nivel a los beta-lactamicos por la modificación de las PBPs o, con menor frecuencia por producción de una beta-lactamasa.

*1

*2

*1: Mecanismo de resistencia NINGUNA incidencia ALTA

*1: Mecanismo resistencia NINGUNO incidencia ALTA

*2: Mecanismo de resistencia Alteración PBP incidencia BAJA

*2: Mecanismo resistencia alteracion en PBP incidencia MODERADA.

Los criterios del CDC para

confirmación de VISA son:

• Microdilución en caldo de vancomicina CIM = 8-16 μg/mL

• E-test de vancomicina CIM = 6-16 μg/mL

• Crecimiento en agar BHI-vancomicina (6 μg/mL) en 24 horas

Morfología variable de las colonias por VISA, después de 48 horas de incubación.

Detección VISA/VRSA

Otros Streptococcus: el fenotipo mas frecuente tanto en los estreptococos β-hemoliticos delos grupos B,C y G como en los estreptococos del grupo viridans, es el de sensibilidad a todos ellos.

DETECCIÓN DE MECANISMOS

DE RESISTENCIA EN COCOS

GRAM POSITIVOS

(STAPHYLOCOCCUS, STREPTOCOCCUS,

ENTEROCOCCUS)

GRACIAS POR

SU ATENCIÓN...!!!

  • Denominaciones de Genotipo y Fenotipo para Vancomicina:

Genotipo. Los genes vanA, vanB, vanC, vanE y vanG

Fenotipo es el efecto mensurable de la expresión de los genes

  • Resistencia adquirida a vancomicina:
  • Resistencia intrínseca a vancomicina

Prueba tamiz de Agar Vancomicina

  • Control negativo: E. faecalis ATCC 29212 (susceptible a vancomicina)
  • Control positivo: E. faecalis ATCC 51299 (resistente a vancomicina

Genero Enterococcus

La resistencia al grupo MLSB se ve reflejada en 2 variables:

La resistencia constitutiva (MLSBc) y la inducible (MLSBi): ambas están relacionas con la expresión de los genes erm (erythromycin ribosome methylation)

  • Variable constitutiva presenta elevado nivel de resistencia a cualquier antimicrobiano del grupo MLSB.
  • Variable inducida presenta únicamente resistencia a los macrólidos de 14 átomos (eritromicina) y 15 átomos (azitromicina) y sensibilidad in vitro a macrólidos de 16 átomos, lincosamidas (clindamicina) y estreptograminas B.

Los resultados de la prueba D-Test presentan seis manifestaciones fenotípicas diferentes:

  • Fenotipo D
  • Fenotipo D+
  • Fenotipo N o negativo
  • Fenotipo HD
  • Fenotipo R
  • Fenotipo S

Entre los métodos de identificación de este tipo de resistencia, unos se basan en la expresión fenotípica, como es el caso del ensayo de inhibición por doble disco difusión en agar (D-Test), PCR

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