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MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

UROCULTIVO Y COPROCULTIVO

AUTOR

Estefanny Capa

Darack Carrión

DOCENTE

Dr. Javier López

2022 - 2022

OBJETIVO GENERAL

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

Objetivos

  • Aplicar los métodos convencionales para el diagnóstico microbiológico de infecciones del tracto urinario (ITU) y en enfermedad diarreica aguda.

  • Recordar las condiciones adecuadas para la toma de muestras de orina y heces fecales para cultivo
  • Argumentar sobre el procesamiento microbiológico de las muestras.
  • Interpretar correctamente el informe del laboratorio de microbiología de cada uno de estos procedimientos.
  • Relacionar los resultados con el estado clínico del paciente

Justificación

Para interpretar correctamente el resultado de los Urocultivos y coprocultivos es importante conocer la epidemiología, condiciones generales y la clínica del paciente.

En estos casos una buena relación entre el médico y el microbiólogo es determinante para un diagnóstico preciso.

¿ ?

UROCULTIVO

Marco teórico

OBJETIVOS DEL UROCULTIVO

Objetivos

  • Aislar patógenos y diferenciarlos de la contaminación.

  • Identificación de microorganismos causantes de infecciones del tracto urinario (ITU).

Terminología

FASES DEL PROCESO

Fases

Existen tres etapas en la generación de los resultados por el laboratorio clínico, en cada una de ellas se realizan acciones muy bien definidas que deben estar sujetas al control de calidad, ya que los errores que en cada una de ellas se cometan son aditivos y conforman el error total con que los resultados de un laboratorio sean generados.

Fase preanalítica

Esta fase abarca todas las acciones desde que el médico solicita el examen de uro cultivo, las indicaciones que debe seguir el paciente, la correcta selección de los materiales y la toma de muestra en el laboratorio, la forma correcta de transporte, y conservación hasta el momento del análisis.

Solicitud

- No debe estar en terapia con antibióticos.

- UTM debe estar estéril con tapa rosca.

- Primera orina de la mañana después de chorro y medio en el inodoro.

- Aseo genital prolijo

- al orinar, mantener los genitales separados o prepucio retraído.

- Tener cuidado de no tocar directamente la tapa ni el frasco por su borde inferior.

- Cerrar bien el frasco, anotar la fecha y hora de obtención de muestra.

- coloque el frasco en una bolsa y refrigerarla.

- Transportar la muestra refrigerada.

Indicaciones

Toma de muestra

Es aquella muestra de orina que

el paciente puede emitir sin necesidad de ninguna

asistencia ni dispositivo externo y se pueden obtener

las siguientes (2) :

- chorro medio: es el mas utilizado por su buena representatividad para el cultivo.

Micción espontánea

IMáGENES

ESQUEMA

Este procedimiento se lo realiza generalmente en neonatos tomando en cuenta los siguientes pasos (5):

- Realizar antisepsia en el alrededor de la uretra.

- En caso de varones, coloque todo el pene dentro de la bolsa y fije el adhesivo a la piel.

- Para las niñas, coloque la bolsa sobre los pliegues de piel a cada lado de la vagina (labios mayores).

- Revisar al bebé frecuentemente y retirar después que el bebé haya orinado.

- Vaciar la bolsa en un recipiente estéril sin tocar el borde, el interior del recipiente ni la superficie interior de la tapa del recipiente.

Recolección de orina en bolsas adhesivas

La bolsa adhesiva perineal es el método más usado en nuestro medio para la recogida de orina para cultivo en el lactante, a pesar de que presenta un alto riesgo de contaminación y de resultados falsos positivos (4).

Los falsos positivos, el alto riesgo de contaminación se demuestran mediante algunos artículos.

(3)

Artículos

(4)

SONDA VESICAL

El sondaje vesical es una técnica invasiva que consiste en la introducción de una sonda hasta la vejiga a través del meato uretral, con el fin de establecer una vía de drenaje, temporal, permanente o intermitente, desde la vejiga al exterior con fines diagnósticos y/o terapéuticos.

Obtención de orina por sondaje vesical transuretral

Sondaje permanente de larga duración:

  • > 30 días
  • Sonda es mantenida en su lugar --> balón
  • Pacientes: crónicos con retención urinaria.

Sondaje permanente de corta duración:

  • < de 30 días,
  • Patología agudas.

El sondaje intermitente:

  • cada 6 – 8 horas
  • Tratamiento de la incontinencia causada por daño medular o daño de los nervios que controlan la micción.
  • Tntroducción sonda para vaciarla de orina, siendo retirada inmediatamente
  • F del sondaje dependerá del V de orina 3-4 sondajes
  • diarios)
  • Profesionales, cuidadores, paciente.

Tipos de sonda

Las heces posee un olor característico que se describe como sui géneris producido por la presencia de indol y escatol, que son unas sustancias organicas producias en el proceso de fermentación.

TIPO DE SONDA

Según sus indicaciones:

Según el calibre:

Según su composición:

Deben seleccionarse según:

  • Sexo
  • Edad
  • Características del paciente

Adultos: calibre 8 al 30.

Los calibres que se utilizan con más frecuencia son:

  • Mujeres: CH 14 (4) y 16 (5)
  • Varones: CH 16-18-20 (6) -22 (7)

Longitud de la sonda en el sondaje intermitente:

  • Hombre 40 cm
  • Mujer 20 cm

Látex:

  • Frecuente
  • Pueden provocar alergia --> sonda de látex recubierto por una capa de silicona (siliconada).
  • < 15 dias

Silicona:

  • Más finas y tener por tanto mejor tolerancia.
  • Están indicadas en sondajes de duración superior a 15

Cloruro de polivinilo (PVC):

  • Sondas de Nélaton.
  • Se usan en cateterismos intermitentes
  • Contraindicaciones
  • Complicaiones

Contraindicaciones.

  • Alteraciones anatómicas del tracto urinario.
  • Sospecha de rotura uretral.

Complicaciones.

  • Perforación uretral (falsa vía) o vesical.
  • Infección urinaria.
  • Retención urinaria por obstrucción de la sonda.
  • Hematuria
  • Uretritis.
  • Incomodidad de la/del paciente.

Infección urinaria asociada a sondaje.

  • Infecciones nosocomiales más comunes:
  • 20 y el 40% del total de las infecciones adquiridas durante el ingreso hospitalario.
  • El 80% - sondaje vesical1
  • 10% de pacientes ingresados s en un hospital son sometidas/os a cateterismo vesical, y de ellos 10% sufrirán una infección urinaria.

.

Estenosis de uretra o estrechez uretral

Retención urinaria por obstrucción de la sonda.

Procedimiento

Según el calibre:

Recolección de orina en pacientes cateterizados con sonda permanente

Procedimiento

Punción suprapúbica

  • Técnica invasiva para obtener muestras de orina no contaminadas, aspiración directa de la vejiga mediante una PSP.
  • Fimosis importante no hay alternativa.

Incapacidad para retraer el prepucio.

  • Una sola muestra puede asegurar o descartar ITU
  • Se facilita con control ecográfico

.

Indicaciones

  • Cuadro clínico no admite demorar el tratamiento
  • Riesgo de contaminación (gastroenteritis, vaginitis, uretritis, balanitis (inchazon del glande), dermatitis perineal)
  • Resultados previos equívocos
  • No es posible SV por fimosis grave, anomalías de uretra.

Contraindicaciones

  • 1. Vejiga vacía (micción reciente, deshidratación).
  • 2. Infección de la piel en el sitio de punción.
  • 3. Dilatación o visceromegalias abdominales.
  • 4. Diátesis hemorrágica.

Técnica

  • Limpieza de piel suprapúbica con antiséptico.
  • Localizar el punto de punción: línea media, 1-2 cm encima de sínfisis púbica

Obtención de orina por punción suprapúbica

Existen algunos pacientes que muestran características especiales a la hora de recolectar orina y de su valoración (7):

Recolección de orina en situaciones especiales

- Vejigas de sustitución.

- Insuficiencia renal terminal.

- Anurias obstructivas

- Enfermos con prostatitis crónica

Vejigas de sustitución

Traslado de la

muestra

- En el caso que el tiempo transcurrido desde la toma de la muestra hasta la entrega supera las 2hrs es aconsejable conservar en heladera dentro de las 24hrs.

- Conservar refrigerado a 4°C.

- Para el traslado posterior se puede colocar el frasco en un recipiente con hielo apto.

Recepción de la muestra

-La muestra deben venir acompañadas de su respectiva hoja de pedido.

- Los datos que debe llevar son:

Nombre y apellido

N° de HC

Edad

Sexo

Tipo de muestra: catéter, suprapubica, etc.

Control o sospecha de algún germen anterior.

  • Muestra sin ordenes e incompleta, falla de identificación de la muestra.
  • Muestras derramadas o rotas, recipientes con fechas vencidas.
  • Muestras sin medio de transporte adecuado o mal conservadas.
  • Muestra no adecuada para la prueba solicitada.
  • Muestras duplicadas en 24 horas.

Criterios de rechazo

Analítica

Cinta Dipstick para análisis bioquímico

Análisis biquímico

Procedimiento

Bien conocido como examen físico va a permitir estudiar patologías, bajo el conocimiento de sus condiciones fisicas normales

Examen macroscópico

Incluye

se debe a la cantidad y concentración de los distintos residuos excretados por los riñones.

Olor

Color

Recordar agitar suavemente el frasco para ver el aspecto

A veces puede indicar un problema con el tracto urinario, como deshidratación o una infección urinaria, o podría indicar problemas renales (8).

Aspecto

Una infección urinaria es una causa muy común de orina turbia o lechosa. Podrías tener una infección si tu orina huele particularmente mal.

ITU

El aspecto turbio generalmente proviene del flujo de pus o sangre en el tracto urinario. También podría ser una acumulación de glóbulos blancos debido a que el cuerpo intenta eliminar las bacterias invasoras.

Algunas ITS comunes, como la gonorrea y la clamidia, pueden causar orina turbia. La gonorrea y la clamidia hacen que el sistema inmunitario se defienda y produzca glóbulos blancos, que podrían mezclarse con la orina y darle una apariencia turbia.

ITS

Evaluación que se realiza a la orina para medir la cantidad de solutos que contiene. Se puede realizar por Tiras reactivas.

Normalmente se expresa valores normales 1.015 a 1.025 g/mL.

Densidad

pH

ORINA ALCALINA >7.5.

- Alcalosis respiratoria.

-Vómitos

- Infecciones al tracto urinario

ORINA ÁCIDA <6.5.

- Acidosis respiratoria.

- Deshidratación.

- Cetoacidosis diabética.

-Diarrea severa

- Infeccion por E.coli.

EXÁMEN MICROSCÓPICO

Examen microscópico

Sedimento urinario: Cuerpos celulares

Sedimento urinario: Cuerpos celulares

Sedimento urinario: Cuerpos acelulares

Sedimento urinario: Cuerpos acelulares

¿Cuándo realizar un cultivo?

Cuando el primer curso de antibióticos no consigue eliminar la infección.

Resultados atípicos de los exámenes macro y microscópicos.

Aislar el M.O especifico responsable de los síntomas.

Cultivo y recuento de colonias

Cultivo cuantitativo: permite diferenciar la verdadera infección de una contaminación.

  • Método de asa calibrada: es un método práctico, sencillo y económico, que consiste en sembrar orina sin centrifugar con un asa calibrada.
  • Tradicionalmente se ha recomendado el empleo de 2 medios de cultivo: uno selectivo y diferencial, como agar McConkey o eosina azul de metileno (EMB), que permiten el crecimiento de Enterobacteriaceae y bacilos gramnegativos no fermentadores, y un medio de agar sangre para grampositivos y levaduras.

Cultivo

PROCEDIMIENTO

Escherichia coli.

Agar casina azul de metileno (agar EMB) es un medio ligeramente selectivo y de diferenciación para el aislamiento y la diferenciación de bacilos gram negativos entéricos (Enterobacteriaceae y diversos otros bacilos gram negativos).

E. coli

contiene colorantes de azul de metileno y eosina Y, que inhiben las bacterias gram-positivas en cierto grado. Los colorantes también actúan como indicadores diferenciales en respuesta a la fermentación de la lactosa o la sacarosa por parte de los microorganismos.

Las colonias de E. coli pueden exhibir un brillo verde metálico característico debido a la rápida

fermentación de la lactosa.

En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable.

Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro).

Las Klebsiella son bacilos gramnegativos fermentadores de lactosa encapsulados. Forman colonias rosadas en agar MacConkey debido a la fermentación de lactosa.

Klebsiella pneumoniae

Análisis

Asa calibrada:

  • Permite tomar volúmenes pequeños, que son inoculados en la superficie del agar mediante la técnica de siembra masiva.
  • Las colonias son contadas y se multiplican por el factor de dilución del asa empleada.
  • Se determinan las UFC/g o mL de muestra.

Análisis cuantitativo

Complicaciones.

Infección urinaria.

Infección urinaria asociada a sondaje.

  • Infecciones nosocomiales más comunes:
  • 20 y el 40% del total de las infecciones adquiridas durante el ingreso hospitalario.
  • El 80% - sondaje vesical
  • 10% de pacientes ingresados en un hospital son sometidas/os a cateterismo vesical, y de ellos 10% sufrirán una infección urinaria.

.

Diagnóstico bacteriológico

INTERPRETACIÓN

Lo realizan los personales de laboratorio, técnicos y bioquímicos. La interpretación se realiza en base a que los recuentos de unidades formadoras de colonias por mililitro (UFC/mL) a partir de muestras de orina

Post analítica

COPROCULTIVO

Coprocultivo

Es una prueba que detecta e identifica las bacterias que causan infecciones del tracto digestivo inferior. La prueba distingue entre

  • Bacterias que causan enfermedades (patógenas)
  • Bacterias que se encuentran normalmente en el tracto digestivo (flora normal).

La prueba ayuda a determinar si las bacterias patógenas son la causa de los síntomas gastrointestinales de una persona (gastroenteritis).

Generalidades

Edad

Síntomas

Tiempo de evolución de cuadro clínico.

Tipo de alimentos ingeridos.

Contacto con animales y cuáles.

Tipo de Muestra

Estad de la muestra

Qué determinación se solicita

Datos

Epidemiología

INDICACIONES

Indicaciones

  • La muestra de heces o hisopado rectal debe ser recolectada durante el período agudo de la enfermedad, antes de iniciar el tratamiento antimicrobiano.

  • Utilizar un envase de boca ancha, tapa hermética, preferiblemente estéril, en caso de muestras líquidas se recomienda recolectarla en un envase para recolección de orina.

  • Hay que tomar en cuenta la edad, el cuadro clínico, la presencia de leucocitos y otros indicadores de invasión de la mucosa intestinal, el tipo de diarrea-líquida o disentérica, la presencia de signos de compromiso sistémico -fiebre, etc.

  • En huéspedes inmuncomprometidos se tendrían que considerar un amplio espectro de agentes etiológicos (bacterianos, parasitarios, víricos y micológicos).

  • En cuadros gastroentéricos que persisten durante más de 10 días, se recomiendan los exámenes parasitológicos.

  • La muestra debe ser enviada inmediatamente luego de ser obtenida.

  • Si demora entre la toma de muestra y el procesamiento es >2hrs, se envía en medio de transporte CARY BLAIR

  • está indicado para la conservación de muestras fecales y rectales desde el lugar de recolección hasta el laboratorio para su examen y cultivo.

  • Hasta 3 muestras
  • Se debe tener en cuenta que la recolección debe ser lo mas estéril posible

Recolección y transporte de muestras

Recolección

y

Transporte

  • Se utilizaran heces recientes en un recipiente limpio de boca ancha y cierre hermético con un volumen mínimo de 2 a 4 g en heces pastosas y 5 a 10 ml en heces líquidas.

  • Si las heces son de consistencia líquida o se han enviado en medio de transporte, la muestra se siembra directamente con ayuda del asa o pipeta Pasteur

  • Número de muestras: Si con la primera muestra no se detecta la presencia de enteropatógenos, es necesario enviar dos tomas más en diferentes días.

  • Si la muestra no se cultiva de inmediato, antes de las dos horas, se recomienda colocarla en un medio de transporte: Cary Blair y mantenerla a temperatura ambiente por un lapso no mayor a 5 días.

  • Los medios sólidos se siembran por agotamiento. Los medios líquidos se siembran abundantemente (1 ml de heces líquidas o 1 gr de heces formes).

Precauciones

Muestras que no deben ser procesadas

  • Los escobillones anales.
  • Muestras no conservadas de más de 4-6 horas.
  • Muestras múltiples en el mismo día.

Muestras descartadas

Macroscópico

Las heces posee un olor característico que se describe como sui géneris producido por la presencia de indol y escatol, que son unas sustancias organicas producias en el proceso de fermentación.

Microscópico

Para determinar rápidamente la naturaleza de una enfermedad diarreica es de gran ayuda y tiene un alto grado de con-fiabilidad la Investigación de leucocitos fecales, que consiste en determinar el tipo de células inflamatorias presentes en las heces; esta información orienta sobre la naturaleza del proceso infeccioso

Este tipo de diarrea (presencia de leucocitos) puede ser un síntoma de una infección causada por bacterias como shigella o salmonella..

También puede producirse en enfermedades inflamatorias intestinales colitis ulcerosa o diisentería bacteriana.

  • Las diarreas que no tienen leucocitos fecales positivos son en las mas frecuentes que son las virales y tampoco aparecen en la mayoría de diarres producidas por protozooz o bacterias con toxinas preformadas como bacillus cereus o staphilococcus.
  • La presencia de 5 o más leucocitos (neutrofilos) por campo microscópico sugiere la presencia de un agente entero invasor. La ausencia de células inflamatorias sugiere la presencia de un agente toxigénico.

Interpretación

CULTIVO

PROCEDIMIENTO

  • Permite identificar diferentes microorganismos causantes de enfermedades gastrointestinales.

  • Se realiza en los tres primeros días de la diarrea, debido a que muchos microorganismos entéricos mueren al no ser cultivados con rapidez, y además, porque es en este periodo donde se pueden encontrar en un número significativo.

Cultivo

MEDIOS DE CULTIVO

ESCASAMENTE SELECTIVOS

MODERADAMENTE SELECTIVOS

ALTAMENTE SELECTIVOS

Inhiben el desarrollo de los microorganismos Gram positivos, pero permiten el desarrollo de enterobacterias y otro bacilos Gram negativos.

  • Diseñados específicamente para el aislamiento de salmonelas gastroenteríticas, tienen un uso más restringido en los laboratorios de microbiología clínica.
  • Inhiben el crecimiento de la mayoría de las Enterobacteriaceae.
  • Permite el crecimiento de Salmonella spp. y Shigella spp.

Medios de cultivo

Interpretación

Resultados positivos.

Cultivos negativos de enteropatógenos.

Detección de antígenos y toxinas

Se informará: ausencia de crecimiento de Salmonella, Shigella, etc mencionando todos los microorganismos incluidos en el estudio

realizado.

  • Cultivos positivos: Se informará del aislamiento del agente patógeno y de su sensibilidad.
  • Disbacteriosis: Se informará tipo de microorganismo predominante

Interpretación

  • Se informará el resultado.
  • Ej:

Toxina B: es el principal factor de patogenicidad de C. difficile

Enzima glutamato deshidrogenasa (GDH): también denominada antígeno común, es una proteína asociada a la bacteria, producida de forma constitutiva y en grandes cantidades por la mayoría de las cepas de C. difficile.

BIBLIOGRAFÍA:

Bibliografia

1. Quintana Hernández D, Bustos Cabrera D. Microbiología Manual de prácticas. Universidad de Cuenca; 2019.

BIBLIOGRAFÍA

2. Urocultivo [Internet]. Labtestsonline.es. [citado el 1 de junio de 2022]. Disponible en: https://labtestsonline.es/tests/urocultivo

3. Gobernado M, Cruz F, Dalet F, Broseta E, De Cueto M, Santos M, et al. La Infección urinaria.

4. Tipos de sondas vesicales [Internet]. Enfermería Creativa. 2017 [citado el 1 de junio de 2022]. Disponible en:

https://enfermeriacreativa.com/2017/11/07/tipos-de-sondas-vesicales/

5. Interpretación de pruebas de laboratorio en infectología [Internet]. Pediatriaintegral.es. 2020 [cited 1 June 2022]. Available from:

https://www.pediatriaintegral.es/publicacion-2018-07/interpretacion-de-pruebas-de-laboratorio-en-infectologia-2/

6. Mayo Foundation for Medical Education and ResearchInfección de las vías urinarias [Internet]. Mayoclinic.org. 2020 [citado el 1 de junio de

2022]. Disponible en: https://www.mayoclinic.org/es-es/diseases-conditions/urinary-tract-infection/symptoms-causes/syc-20353447

7. PRÁCTICAS de MICROBIOLOGÍA CLÍNICA. 2017

8. Webcd.usal.es, webcd.usal.es/web/educativo/m_especial/39principal.htm. Accessed 31 May 2022.

9. Estudio Microbiológico de La Orina. Urocultivo.” Webcd.usal.es, 2017, webcd.usal.es/web/educativo/m_especial/39principal.htm.

10. “Cultivo de Heces | Lab Tests Online-ES.” Labtestsonline.es, 2018, labtestsonline.es/tests/cultivo-de-heces.

11. Carlos, Javier, and Zepeda. Los Cultivos de Las Heces. 2017.

12. 2017, www.sciencedirect.com/sdfe/pdf/download/eid/1-s2.0-S0304541202706094/first-page-pdf.

13. Picazo Coordinador, Juan, et al. Procedimientos En Microbiología Clínica Recomendaciones De La Sociedad Española De Enfermedades Infecciosas

Y Microbiología Clínica . 2017.

14. La forma de tus heces dice lo que te falta y lo que te sobra [Internet]. ABC Blogs. 2019 [citado el 1 de junio de 2022]. Disponible en:

https://abcblogs.abc.es/aula-nutricion/otros-temas/la-forma-de-tus-heces-dice-lo-que-te-falta-y-lo-que-te-sobra.html?ref=https%3A%2F%2Fw

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15. Gonzales VP. COPROCULTIVO [Internet]. Slideshare.net. [citado el 1 de junio de 2022]. Disponible en:

https://es.slideshare.net/VanessaPauyacGonzales/coprocultivo-1203631

16. Sampac.es. [citado el 1 de junio de 2022]. Disponible en:

https://www.sampac.es/images/site/documentacion/protocolos/COPROCULTIVO.pdf

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