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Présenté par : Haïfa Ben Messaoud
Sous la direction de : Dr. Bechr Hamrita
Dr. Majdi Snoussi
INTRODUCTION
ETUDE BIBLIOGRAPHIQUE
ETUDE PHYTOCHIMIQUE
Analyse de la composition chimique des huiles essentielles
ETUDE BIOLOGIQUE
Partie I : Evalution de l'activité anti-microbienne des huiles essentielles et leurs composés majoritaires
Partie II : la recherche d'une éventuelle synergie entre quelques huiles en combinaison
Partie III : Effet des huiles essentielles sur les principaux facteurs de virulence chez P.aeruginosa
Partie IV : l'étude de l'effet des huiles essentielles sur le protéome bactérien
CONCLUSION ET PERSPECTIVE
Les maladies infectieuses constituent un sérieux problème de santé publique où l'utilisation des antibiotiques devient un mythe.
Cette situation permet l'émergence des bactéries résistantes aux antibiotiques.
"la résistance antimicrobienne est une urgence de santé mondiale qui va sérieusement compromettre les progrès de la médecine moderne".
Recherche des altérnatifs phytothérapeutiques à base des susbstances naturelles, notamment les huiles essentielles.
Mission 1
L'évaluation de l'effet anti-microbien des huiles essentielles et leurs composés majoritaires sur une panoplie de microorganismes.
L'impasse thérapeutique
le coût.
La diminution de la biodiversité végétale.
Mission 2
Recherche d'une éventuelle synergie entre:
La dose indépendante
La cytotoxicité
Le mode d'emploi
MICROBIOTE
C'était la réduction du pouvoir infectieux des bactéries sans les détruire, ainsi que la protection du microbiote par le biais des huiles essentielles anti-QUORUM SENSING .
Mission 3
Evaluer l'effet des huiles essentielles sur le système quorum sensing chez P. aeruginosa.
Huiles essentielles : sont les composés odorants, volatils de plantes aromatiques, fabriqués normalement par un groupe spéciales de cellules.
Anti-microbiennes
cannelle, clou de girofle, laurier...
Anti-oxydante
eucalaptus, orange amère, lavande, origan, thym...
Anti-inflammatoire
clou de girofle, lavande, sauge...
Anti-cancer
menthe, gingembre, cumin, camomille, citron, thym...
Apaisante
mandarine, lavande, camomille, bois de rose, oranger...
Famille des Zingiberacea
Plantes médicinales largement utilisée en médecine traditionnelle dans des diverses maladies.
Famille des Liliaceae
Leurs huiles essentielles reflétent des activités antimicrobiennes, anti-oxydantes, anti-inflammatoires, anti-insecticide...
Famille des Apiaceae
Leurs bienfaits seront liés aux compositions chimiques qu'elles contiennent, notamment les monterpènes et les sesquiterpènes.
Famille des Rutaceae
QUORUM SENSING
*un mécanisme de communication cellulaire *dépendant de la densité bactérienne.
*repose sur la synthèse, la diffusion, la détection et la réponse à des petites molécules signale appelées « autoinducteurs »
Chez PAO1
Formation du biofilm
Bioluminescence
Mobilité
Protéase + élastase
GC/MS
Nos résultats sont peu similiares à ceux trouvés dans la littérature. (Barra, 2004) a mentionné qu'il existe des facteurs endogènes et exogènes qui affectent la composition chimique des huiles essentielles.
Qualitative : diffusion des disques
Quantitative : microdilutuion
*Incubation à 37°C pendant 24h
*lecture visuelle de la CMI
(Snoussi et al., 2008)
Synergie : (A+B)>effet A+effet B
Addition : (A+B)=effet A +effet B
Antagonisme : (A+B) <effet A ou effet B
Indifférence : (A+B)=effet A ou effet B
Lahlou, 2004
Quantitative : détermination de la concentration minimale inhibitrice (CMI) et létale (CML)
HE1+HE2< effet HE1+effet HE2
Effet antagoniste
Qualitative : technique de diffusion de disque
Descriptives : Activité anti-pyocyanine
Activité anti-swarming
Colorométriques : Activité anti-élastolytique
Activité ani-protéolytique
Préparation du milieu minimum glycérol alanine
Ajout des différentes concentrations des huiles essentielles
Inoculation puis incubation
Observation visuelle
500.................................................10 µg/ml
D'après les résultats obtenus, nous recomondons d'utiliser les huiles essentielles de façon dose dépendante pour inhiber l'un des facteurs de virulence exprimé par PAO1
5 µL d’une culture fraiche de PAO1 préparée à DO600=0,1 ont été déposés sous forme de goutte au centre des boîtes.
Préparation d’un milieu LB semi solide auquel différentes concentrations d’huiles essentielles (10, 50, 150, 300 et 500 µg/ml) ont été ajoutées.
Incubation des boîtes à 37°C pendant 24h.
Pour cloturer ces activités, on note que les huiles essentielles notamment celles utilisées dans notre étude ont un pouvoir miraculeux pour bannir les principaux facteurs de virulence chez P.aeruginosa.
Dans ce contexte, l'aromathérapie, l'art de soigner par les huiles essentielles est rebreveté par notre étude.
Espérant...
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