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Transcript

Proteine

- und Nachweisverfahren -

Gliederung

  • Einleitung
  • Aminosäuren:
  • Struktur
  • Säure-/Base-Eigenschaften
  • Einteilung
  • Peptide/Proteine:
  • Proteine im Körper
  • Peptidbindung
  • Struktur
  • Denaturierung
  • Gebrauch
  • Nachweisverfahren:
  • Gelelektrophorese
  • Xantoproteinreaktion
  • Biuret-Reaktion
  • Ninhydrin-Reaktion
  • Themperatur-/pH-Nachweis
  • Fazit

Gliederung

Einleitung

Proteinpulver

Abbildung B

Abbildung A

?

Einleitung

Abbildung C

Protein-Fermenter

Die "Ursuppe"

Aminosäuren

Amino-

säuren

Definition:

"Aminosäuren (AS), unüblich auch Aminocarbonsäuren, veraltet Amidosäuren genannt, sind chemische Verbindungen mit einer Aminogruppe und einer Carbonsäuregruppe. Sie sind die Bausteine von Proteinen und dienen vor allem dem Aufbau von Körpergewebe." (Z. 1)

=> Sind durch Struktur und Aufbau definiert

Struktur / Aufbau

Abbildung D

Struktur

  • C-Atom ist ein α-C-Atom, wenn Amino- und Carboxylgruppe an ihm gebunden sind.

  • Restekette ist für Variationen und Eigenschaften verantwortlich

Säure-Base-Eigenschaften

Eigen-schaften

Isoelektrischer Punkt

pH(I)

Abbildung E

  • Basische Umgebung: => H+ in Umgebung => Anion
  • Isoelektrischer Punkt: => H+ im Gleichgewicht => Anion/Kation
  • Saure Umgebung: => H+ werden aufgenommen => Kation

Jede Aminosäure hat spezifischen pH-Wert

Einteilung / Gliederung

Einteilung

Abbildung E

  • Unpolar: C-Ketten => Van-der-Waals-Kräfte
  • Polar: OH-/(SH)-Bindungen => Brückenbindungen
  • Basisch: Mehr Aminogruppen => H+ Abgabe
  • Sauer: Mehr Carboxylgruppen => H+ Aufnahme

Proteine im Körper

Abbildung F

Proteine

im Körper

=> Proteine sind Bausteine unseres Lebens

Proteinumsätze im Menschlichen Körper

Protein- umsatz

Proteine

Definition:

"Ein Protein, umgangssprachlich Eiweiß (veraltet Eiweißstoff), ist ein biologisches Makromolekül, das aus Aminosäuren durch Peptidbindungen aufgebaut ist." (Z. 2)

Proteine

?

Abbildung H

?

Peptidbindung

Video 1

Abbildung I

Peptid-bindung

Peptidgruppe

1. Aminogruppe und Carboxylgruppe kondensieren zu einer Peptidbindung (-CO-NH-).

2. Reaktion mit Hydrolyse umkehrbar

3. Titin: längste AS. Kette (38.000), länstes Wort => 190.000 Buchstaben

4. Mesomere Grenzformel: Peptidbindung in einer Ebene

=> starre Struktureinheit

Abbildung J

Abbildung K

Struktur / Aufbau

Struktur

Abbildung L

Primärstruktur

Primär

Abbildung M

=> Man betrachtet nur die Aminosäuresequenz, die Abfolge der Aminosäuren

Sekundärstruktur

Sekundär

Abbildung O

Beta-Faltblatt

=> Die Sekundärstruktur zeigt häufig auftretende Strukturen in einer As-Kette, die duch H-Bindungen zwischen Peptidgruppen entsehen.

oder auch Beta-Schleife

Abbildung N

Alpha-Helix

Tertiärstruktur

Tertiär

Bei der Tertiärstruktur liegen Sekundärstrukturen in einer übergeordneten Raumstruktur "geknäult" vor. Die Wechselwirkungen zwischen den AS-Resten erzeugen:

  • H-Brücken
  • Ionenbindungen
  • Disulfidbindungen
  • van-der-Waals-Kräfte

=> Stabilisierung

Einzele AS-Ketten: Loops

Abbildung P

Quartärstruktur

Hämoglobin

Abbildung Q

Quartär

=> Durch die Wechselwirkung zwischen Polypeptidketten oder und nicht Peptid-Strukturen kommt die Quartärstruktur zustande.

Denaturierung

Faktoren:

  • Themperatur
  • pH-Wert
  • organische Lösungsmittel
  • Salze
  • Druckveränderung
  • Schwermetallionen

Denatu-rierung

Definition:

Unter der Denaturierung versteht man die Zerstörung der Tertiär- und Quartärstruktur, durch das Trennen von Verbindungen

Abbildung R

Gebrauch

Futtermittelindustrie

chemisch-technische und biotechnologische Industrie

Pharmazeutik

Farbindustrie

Nahrungsmittelindustrie

Textilindustrie

Gebrauch

Umhüllungen von Tabletten und Vitaminpräparaten

Fotografie/Bildbeschichtungen

Gelatine

Biokunststoffen

Fasern aus Seidenproteinen

Waschmittel

Biokatalysatoren/Struktur

=> Kommt fast überall vor ;)

Nachweisreaktionen

Nachweis

Reaktionen

Stationsarbeit

Gelelektrophorese - Gruppe 1

Xantoproteinreaktion - Gruppe 2

Biuret-Reaktion - Gruppe 3

Ninhydrin-Reaktion - Gruppe 4

Themperatur/pH-Wert - Gruppe 5

Abbildung S

Gelelektrophorese

Abbildung S

Native Elektrophorese

Denaturierende Elektroporese

  • Proteinmoleküle werden in Gel zugefügt
  • Gleichspannung wird an das Gemisch angeschlossen
  • Proteine wandern je nach Ladung und Masse/Größe anders.
  • Proteine werden mit SDS denaturiert
  • Proteinmoleküle werden in Gel an Katode zugefügt
  • Gleichspannung wird an das Gemisch angeschlossen
  • Proteine wandern je nach Masse und Größe anders.

Gelektro-phorese

Abbildung S

=> Wie stark sind Proteine geladen?

=> Wie sind Proteine geladen?

=> Wie groß sind Proteine?

=> SDS ummantelt Protein negativ!

=> Wie groß/schwer sind Proteine?

Kann auch mit DNA/RNA gemacht werden!

Video 2

Xantoproteinreaktion

Aminosäure/Peptidnachweiß:

Nur für aromatische Aminosären!

Abbildung T

Xanto-protein-reaktion

Durchführung:

  • Salpetersäure + Probesubstanz
  • Langsam erwärmen

Beobachtung:

  • kann gelb/orange werden
  • kann aufflocken

Erklärung:

  • ==> ==> ==> ==> ==> ===>
  • Durch Denaturierung
  • Durch Nitroverbindung = Gelb

Abbildung V

Abbildung U

Video 3

Biuret-Reaktion

Nachweis von Peptiden ab 2 Peptidbindungen

Erklärung:

  • Kupfer(2)Komplex sorgt für lila Farbe
  • Kupfer(2)Komplex sorgt für Denaturierung

Biuret-

Reaktion

Durchführung:

  • Probesubstanz mit NatriumHydroxid mischen
  • paar Tropfen verdünntes Kupfersulfat
  • schütteln

Beobachtung:

  • färbt sich violett, lila

Abbildung W

Video 4

Ninhydrin-Reaktion

Nachweis von: Aminosäuren und kurzen Peptiden

Abbildung X

Ninhydrin-

Reaktion

Durchführung:

  • Probesubstanz wird verflüssigt
  • 1:1 Probesubstanz + Ninhydrin
  • 4min im Wasserbad erwärmen

Beobachtung:

  • Lösung bekommt purpur-violette Färbung
  • kann aufflocken

Erklärung:

  • Ninhydrin und Aminogruppe reagieren zu Ruhemanns-Purpur-Molekülkomplex

=> Nur Aminosäuren/kurze Peptide

2Wasser

Ruhemanns-Purpur-Molekülkomplex

Video 5

Denaturierung

- Ein Nachweisverfahren? -

Durch die Denaturierung:

  • werden Eiweiße sichtbar
  • sind sie nicht mehr wasserlöslich
  • ändern ihre Konformation
  • ändern ihre Farbe
  • ...

Denatu-rierung

Pro

Contra

  • Unbekannte Stoffe denaturieren scheinbar .
  • Nur Proteine denaturieren
  • Es treten optische Merkmale auf.

Chemisch gesehen ist Denaturieren ein Nachweis von Proteinen. Optisch gibt es aber zu viele ähnliche Ergebnisse. Man benötigt eine Laboruntersuchung.

Chemisch: Ja Optisch: Nein

Fazit

Proteine

Arbeiten für/mit Menschen

Aminosäurecode

Anfang des Lebens

Nachvollziehbar

Bestandteil jeder Organismen

Fazit

spezifische Nachweisfunktionen Hilfsmittel, um sie weiter zu erforschen

Quellen

Literaturquellen

Literaturquellen:

  • Horst Bayrhuber, Wolfgang Hauber, Ulrich Kull: Linder Biologie/ Gesamtband, Schroedel westmann Verlag

  • Christine Ernst, Dr. Ulrich Müller, Dr. Sven Scheurell: Chemieduden/Selbständlich Chemie/Lehrbuch für die Kursstufe Baden-Württemberg, Duden Schulbuchverlag

  • Wolfang Asselborn, Manfred Jäckel, Dr. Karl T. Risch: Chemie Heute S2/Gesamtband, Schroedel westmann Verlag

Literatur

Bild / Video Quellen

Abbildung:

A: https://www.allmaxnutrition.com/wp-content/uploads/protein-value-1000x500.png?x56806

B: https://www.gea.com/es/binaries/beijing_tiantan_Internal_and_External_Use_Pharma_tcm25-22212.jpg

C: https://www.scinexx.de/wp-content/uploads/0/1/01-22838-ursuppe00.jpg

D: http://www.heimtierwissen.de/Bilder/Futtermittelkunde/Aminos.png

E: https://aqion.s3.amazonaws.com/img_item/original/zwit_cation_anion_DE_203_2nd.png?1534091806

F: https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/7/7d/Overview_proteinogenic_amino_acids-DE.svg/480px-Overview_proteinogenic_amino_acids-DE.svg.png

G: https://docplayer.org/docs-images/40/8450925/images/page_18.jpg

H: https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/c/ce/AminoAcidball.svg/1200px-AminoAcidball.svg.png

I: https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/8/8d/Peptidbindung.svg/660px-Peptidbindung.svg.png

J: https://chemiezauber.de/images/q1/proteine/peptidbindung1.JPG

K: https://slideplayer.org/slide/667409/1/images/6/Peptide%2C+Proteine+Anzahl+der+verkn%C3%BCpften+Aminos%C3%A4uren+%28AS%29+Bezeichnung.jpg

L: https://www.schullv.de/resources/images/bio/desktop/prot_struktur.png

M: https://dccdn.de/pictures.doccheck.com/images/349/903/349903fccf199f5d5640de7490f54351/42275/m_1408030383.jpg

N: https://viamedici.thieme.de/api/images/l/h/e/l/i/x/bioch_006900_alpha_helix.png

O: http://www.chemie-im-alltag.de/articles/0039/Falt.jpg

P: http://www.chemgapedia.de/vsengine/media/vsc/de/ch/8/bc/proteine/aminos_u_einleit/gif_pdb_mov/lys_132l_pdb_altref.jpg

Q: http://www.chemgapedia.de/vsengine/media/vsc/de/ch/8/bc/proteine/aminos_u_einleit/gif_pdb_mov/hem_pdb_altref3.jpg

R: http://www.bs-wiki.de/mediawiki/images/Dena.jpg

S: http://www.biozeugs.de/downloads/Protein-Gelelektrophorese.pdf

T: http://www.de.lovetheteam.com/images/nauka/chto-takoe-benzolnoe-kolco.png

U: https://slideplayer.org/slide/645762/1/images/10/Xanthoprotein+-+Reaktion.jpg

V: https://www.google.com/search?rlz=1C1CHBF_deDE745DE745&biw=1920&bih=969&tbm=isch&sa=1&ei=lItlXNqbDMGQkwWIhrfYBQ&q=xantoproteinreaktion+autoprotolyse&oq=xantoproteinreaktion+autoprotolyse&gs_l=img.3...20436.24439..24555...0.0..0.77.784.14......1....1..gws-wiz-img.1V0QdUnqx2U#imgrc=ogc6TSmi4fpREM:

W: https://www.google.com/search?q=ninhydrin+Reaktion&rlz=1C1CHBF_deDE745DE745&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=0ahUKEwibx-eJ_LngAhVAwMQBHW0nBZEQ_AUIDigB&biw=1920&bih=969#imgdii=GZYKEzOBORwYGM:&imgrc=7kF63kx2gQlY4M:

Bild/Video

Video:

1: https://www.youtube.com/watch?v=hJcybXtVdWk

2: https://www.youtube.com/watch?v=wZ_JlYgaqdE

3: https://www.youtube.com/watch?v=PGuGWwbOrf0

4: https://www.youtube.com/watch?v=JuMYdG6W8PY

5: https://www.youtube.com/watch?v=FcFnZ0FQUSk

Internetquellen

Definitionen

Z. 1: https://de.wikipedia.org/wiki/Aminos%C3%A4uren

Z. 2: https://de.wikipedia.org/wiki/Protein

Internet

Sonstige:

  • Quelle: https://www.biooekonomie-bw.de/de/fachbeitrag/aktuell/proteine-fuer-technische-anwendungen/ (10.02.2019)
  • Quelle: http://www.chemie.de/lexikon/Protein.html#Denaturierung (10.02.2019)
  • Quelle: http://www.chemie.de/lexikon/Pufferl%C3%B6sung.html (10.02.2019)
  • Quelle: http://www.chemie-online.net/biochemie/proteine.php (10.02.2019)
  • Quelle: https://flexikon.doccheck.com/de/Gelelektrophorese (10.02.2019)
  • Quelle: http://www.oekosystem-erde.de/html/leben-01.html (10.02.2019)
  • Quelle: http://www.seilnacht.com/Lexikon/amino.html
  • (10.02.2019)
  • Quelle: http://www.spiegel.de/wissenschaft/mensch/laengstes-wort-russe-liest-aminosaeuresequenz-von-titin-vor-a-868485.html
  • (10.02.2019)
  • Quelle: https://de.wikipedia.org/wiki/Aminos%C3%A4uren
  • (10.02.2019)
  • Quelle: https://de.wikipedia.org/wiki/Benzol
  • (10.02.2019)
  • Quelle: https://de.wikipedia.org/wiki/Denaturierung_(Biochemie) (10.02.2019)
  • Quelle: https://de.wikipedia.org/wiki/Mesomerie
  • (10.02.2019)
  • Quelle: https://de.wikipedia.org/wiki/Ninhydrin
  • (10.02.2019)
  • Quelle: https://de.wikipedia.org/wiki/Protein
  • (10.02.2019)
  • http://www.biozeugs.de/downloads/Protein-Gelelektrophorese.pdf
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