López Arias Sharon
Roca Soriano Michael
Saltos Coello Francesco
Villón Navas Briggitte
PROYECTO FINAL
TEMA DE INVESTIGACIÓN
Determinación del grado de toxicidad de la hoja de la chaya (Cnidoscolus aconitifolius), a través de la aplicación de sus extractos a muestras de Artemia salina juveniles.
TEMA
Objetivo general
Determinar la incidencia que tendrá el grado de toxicidad de los extractos acuosos de la hoja de la chaya (Cnidoscolus aconitifolius) en el índice de mortalidad (DL50) de Artemia salina.
Objetivos
Objetivos específicos
Objetivos específicos
- Determinar el grado de toxicidad en base a los parámetros de letalidad media, de los extractos acuosos de la hoja de la chaya en muestras de Artemia salina.
- Establecer la relación estequiométrica entre la toxicidad del extracto acuoso de la chaya y su incidencia en las artemias y los seres humanos.
Hipótesis
Hipótesis
Los extractos acuosos macerados de la hoja de la chaya tendrán un mayor grado de toxicidad que los extractos por infusión y decocción en Artemias salinas juveniles.
INTRODUCCIÓN
Introducción
Vegetales utilizados por sus características curativas
La chaya ayuda a:
- Regular la diabetes.
- Combatir el cáncer.
- Regular la presión arterial y la circulación sanguínea.
- Bajar de peso, obesidad.
Notorios los cuadros clínicos de pacientes intoxicados por la chaya:
- Dificultad respiratoria.
- Dolores de cabeza.
- Pérdida de conciencia, coma o muerte.
MARCO TEÓRICO
- La chaya (Cnidoscolus chayamansa o Cnidoscolus aconitifolius), es un arbusto robusto de hojas perennes, perteneciente a la familia de las Euphorbiaceae.
- Se desarrolla en regiones secas y tropicales (Santa Elena).
- En las hojas, se encuentra un glucósido, que al ser hidrolizado por algunas enzimas, liberan HCN.
- Inhibe la respiración celular.
- 0.04 mg HCN/g de hoja.
DATOS GENERALES
Área de estudio
Laboratorio de Acuicultura en el Área experimental de la Facultad de Ciencias del Mar en la Universidad Estatal Península de Santa Elena.
ÁREA DE ESTUDIO
METODOLOGÍA
En base a:
- (Fernández-Calienes, y otros, 2009)
- (Torrico, Gabay, Suárez, & Compagnone, 2004)
También trabajaron con extractos acuosos de chaya en ratones de laboratorio.
PROCEDIMIENTO
- Estequiometría: 0.04 mg/g de HCN (Spell & Bressani, 2011).
- Preparación de extractos: Maceración, decocción e infusión.
- Concentraciones: 1M, 0.1 M y 0.01M. en 2.0 ml de agua de mar.
- Total: 27 muestras
- Se usaron Artemias juveniles (efectivas para los ensayos de citotoxicidad).
- Se aplició 1 ml de extracto de chaya y dejó reposar durante 24 hrs.
- Se contabilizaron las artemias muertas y se determinó la DL50.
PROCESO
Macerado, infusión y decocción de las hojas
20 artemias en 2mL de agua
Aplicación de los extractos
ANÁLISIS ESTADÍSTICO
El método más práctico y recomendado, según la US EPA (1993; por sus siglas en inglés: United States Environmental Protection Agency), fue el método de Probit (figura).
Prueba de chi-cuadrado por asociación, usando Minitab ® 17.
ANÁLISIS ESTADÍSTICO
PORCENTAJES DE MORTALIDAD
Análisis PROBIT
ANÁLISIS PROBIT
Prueba chi-cuadrado para asociación de Pearson:
Distribución Normal.
Se ajustó a la prueba de bondad, realizada también con chi-cuadrado (p= 0.536).
La Concentración Letal, Efectiva o Inhibidora media es 0.962 ± 0.889 mol dm-3, con un grado de confiabilidad del 95%.
DL50
Cálculo de la relación existente entre la CL50 en las artemias y la salud del ser humano.
Los efectos del cianuro se producen a niveles de 0.05 miligramos de CN por decilitro de sangre. (5E-04 g/dm3), y casos fatales a 0.3 mg/dL (3E-03 g/dm3).
TOXICIDAD EN HUMANOS
DISCUSIÓN
DISCUSIÓN
Torrico, 2004:
- DT50: 140mg/kg en los ensayos.
- Citotoxicidad más elevada en maceraciones y menores en infusión y decocción.
Es posible que los valores de infusión y decocción tengan que ver con la temperatura que son sometidas inicialmente con el agua.
CONCLUSIONES
CONCLUSIONES
- Mortalidad total de 46.77% en artemias.
- DL50: 0.962 ± 0.889 mol dm-3
- Toxicidad en maceraciones (75%) > infusiones (20%) > decocciones (5%).
- Los ensayos fitotóxicos con artemia salina son viables para citotoxicidad.
- En humanos, sería tóxico en macerados de 19.49 g de hoja en 1 dm3.
BIBLIOGRAFÍA
- Spell, L., & Bressani, R. (2011). Preparación y caracterización química y nutricional de la proteína foliar de la chaya. Revista 23 de la Universidad del Valle de Guatemala .
- Stephens, J. M. (1994, Mayo). Chaya-Cnidoscolus chayamansa McVaugh. Retrieved from Universidad de Florida: http://edis.ifas.ufl.edu/mv045
- Thompson, C. G., Michael, A. S., & Abramovitz, M. (1956). Artemia salina as a Test Organism for Bioassay. Science
- Torrico, F. M., Gabay, J., Suárez, A. I., & Compagnone, R. S. (2004). Estudio Toxicológico de Cnidoscolus chayamansa McVaugh. Caracas.