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DNA RECOMBINANTE

DNA Recombinante

DNA Recombinante: A técnica de DNA recombinante é um importante mecanismo de inserção gênica em bactérias, com esse processo é possível produzir diversas substâncias em larga escala. Sabemos que um gene é um fragmento de DNA, uma sequência de nucleotídeos específica, que pode produzir RNA ou proteínas.

São moléculas de DNA que possuem fragmentos de DNA derivados de duas ou mais fontes, geralmente de espécies diferentes.

Tecnologia de DNA Recombinante

É um conjunto de técnicas, de ampla aplicação. Pode ser usada para estudar mecanismos de replicação e expressão gênica, na determinação da sequência de um gene (e por tabela a proteína que ele codifica), ou no desenvolvimento de 'novas' culturas microbianas, capazes de resistir a certos antibióticos ou transmitir determinadas características.

Clonagem Molecular

A clonagem molecular: é a técnica central da metodologia do DNA recombinante e consiste na transferência de um gene de um organismo para outro, ou seja, a recombinação de DNA proveniente de diferentes fontes.

A Tecnologia do DNA recombinante

Clonagem Molecular – Aumentando a População de Organismos Selecionados

A origem do termo Clonagem Molecular vem da Genética Bacteriana que considera uma colônia de bactérias como um clone, pois todos os indivíduos são geneticamente idênticos à bactéria inicial. Essa é a técnica central da tecnologia do DNA Recombinante. Ela consiste no isolamento e propagação de moléculas de DNA idênticas.

Há pelo menos dois estágios importantes:

  • Elaboração do DNA recombinate: O inserto (fragmento de DNA de interesse) é ligado ao vetor (uma outra molécula de DNA) para formar o DNA Recombinante.

  • Inserindo o DNA Recombinante : em uma célula hospedeira compatível é introduzida a molécula de DNA recombinante, num processo chamado de transformação.

O DNA bacteriano pode se recombinar com DNA humano, vegetal ou de qualquer outra espécie, abrindo a possibilidade de clonar ou isolar proteínas das mesmas.

O procedimento geralmente envolve o isolamento de um gene humano com potencial terapêutico (por ex. insulina) e a introdução desse gene numa célula animal, bacteriana ou de leveduras.

Através do uso de proteínas denominadas enzimas de restrição, são isolados genes individuais do DNA humano e inseridos em pequenos pedaços de DNA cortados com a mesma enzima, chamados plasmídeos.

O plasmídeo recombinante é então inserido numa célula animal, bacteriana ou de levedura, num processo chamado transformação.

Aplicações da Tecnologia do DNA Recombinante

Os genes de resistência a medicamentos, que também se encontram no plasmídeo, selecionam as células transformadas as não-transformadas.

É então estabelecida uma população pura de células recombinantes através do processo de clonagem, onde uma única célula selecionada dará origem a uma população de clones.

No fim do processo, espera-se que todas as células resultantes contenham uma cópia do plasmídeo portador do gene humano inserido.

Depois do gene e da célula clonada serem inseridos, as células são então induzidas a expressar o gene humano.

• Produção de substâncias úteis como insulina humana, hormônio de crescimento, vacinas, enzimas industriais;

• Estudo de mecanismos de replicação e expressão gênica;

• Investigação de paternidade;

• Diagnóstico de doenças genéticas e infecciosas;

• Terapia gênica;

• Transgênicos.

O aprofundamento em conhecimentos de genética abriu a imaginação dos pesquisadores e esta ciência se tornou uma das ferramentas mais importantes para o desenvolvimento de técnicas biotecnológicas. Aliado a isto, o conhecimento multidisciplinar de áreas como a biologia molecular e bioquímica permitiu que a biotecnologia avançasse a aplicações industriais. A metodologia envolvida neste processo abarca diversas técnicas que englobam a manipulação do DNA visando à produção de bens de interesse comercial. Esta tecnologia do DNA recombinante, também conhecida como clonagem gênica ou clonagem molecular, compreende processos de transferência da informação genética (DNA) de um organismo a outro.

Nomes

Adriely Sara 01

Alexandra Moura 02

Ana Luísa Carvalho 06

Ana Luíza de Souza 07

Bárbara Santos 11

Larissa Godoy 22

Tainara Gomes 35

Talita Monteiro 36

Thaiza 38

Turma 3H

Apesar de não haver uma metodologia universal, os experimentos seguem um protocolo similar:

  • O primeiro passo consiste em caracterizar um gene de interesse. Tendo-se um conhecimento prévio do mesmo, o segundo passo consiste em isolar o DNA do organismo que o contém; este é denominado organismo doador;

  • O passo seguinte à obtenção da molécula de DNA que codifica uma proteína de interesse é permitir a perpetuação do vetor recombinante até a produção do bem de escolha. Para isso, há a necessidade de selecionar uma célula hospedeira apropriada a qual será introduzido o vetor recombinante. A introdução do material genético na célula hospedeira ocorre por um processo denominado transformação;

Uma vez obtido o clone de interesse, o passo final consiste em submetê-lo a uma série de análises que permitam verificar se construção recombinante em um determinado hospedeiro é capaz de expressar, tanto quantitativamente quanto qualitativamente, a proteína de interesse.

  • O DNA do organismo doador e o do vetor são digeridos com enzimas de restrição. O fragmento de interesse e o vetor linearizado são ligados e transformados em uma célula hospedeira apropriada. Esta permite a expressão da proteína de interesse (representada pelas três bolinhas vermelhas).

  • A geração de moléculas recombinantes pela clonagem molecular deve ser diferenciada daquelas obtidas por processos de “crossing-over” que ocorre entre cromossomos homólogos de eucariotos. A tecnologia do DNA recombinante consiste em procedimentos de manipulação experimental que permitem que DNA de fontes diferentes ou heterólogas seja inserido em um hospedeiro capaz de perpetuar o material genético de interesse, produzindo-o de maneira apropriada.

Fontes

http://ingeniousnws.blogspot.com.br/2013/04/a-tecnologia-do-dna-recombinante-base.html

http://www.significados.com.br/dna-recombinante/

http://soumaisenem.com.br/biologia/engenharia-genetica/tecnologia-do-dna-recombinante

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