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Histoquimica de lípidos

¿Que son los lípidos?

Conjunto de moléculas orgánicas compuestas principalmente por C y H, y en menor medida O y excepcionalmente P, S y N.

Controles......

Lipocromos......

Fijación de lípidos

controles negativos

  • acetona elimina los lípidos hidrófobicos
  • metanol
  • ácido clorhídrico

controles positivos

  • se conservan los tejidos grasos a -70° C

• Los lipocromos deben presentar las siguientes características

• Ser suficientemente coloreados o fluorescentes

• Ser altamente solubles en lípidos

• Ser solubles en sustancias no liposolubles

• Carecer afinidad por otros constituyentes tisulares

• El lipocromo debe ser mas soluble en los lípidos que soluble en su disolvente

El método ideal para la fijación de lípidos es por congelación

Fijación química

Extracción especifica

  • formalina
  • formol calcio
  • dicromato de potasio

Colorantes y sus disolventes

  • hidrofobicos: acetona fria 4°C
  • lipidos sin conjugar a proteinas: piridina mas cloroformo/etanol
  • proteolipidos: metanol/cloroformo
  • lipoproteinas: soventes acidificantes
  • lipidos neutros asociados a proteinas: PAS
  • cerebrocidos: acetona caliente
  • lectinas y cefalinas: eter caliente

Propiedades físico químicas

  • El punto de fusión depende del largo de la cadena hidrocarbonada
  • Es importante determinar si la superficie lipídica es hidrófoba o hidrófilica
  • Los fosfolípidos contienen grupos básicos polares los cuales hacen que estos lípidos sean hidrofílicos.
  • Los glicolípidos ácidos (gangliósidos y sulfátidos) y glicolípidos neutros (cerebrosidos) son también moderadamente hidrofílicos.
  • Los lípidos no polares son hidrofobicos

Microtomia

  • Inclusión en congelación: cortes en criostato entre 8 y 10 µm
  • Inclusión en parafina: cortes entre 8 y 10 µm

Según localización histológica

  • Lípidos metabólicos
  • Lípidos homofásicos
  • Lípidos heterofásicos

Componentes lipídicos

Clasificación

Funciones de los lípidos

Radicales alquilos de 16 a 20 átomos de carbono

Ésteres

Alcoholes aromáticos y alifáticos

Ácidos grasos

Glicérol

Ácido fosfórico

Esfingosina

Proteínas

Colesterol

Azúcares

Myo-Inositol

colina., etanolamina y serina

Isopreno

Clasificación según reacción de saponificación

1.Según solubilidad

Lípidos no conjugados

Lípidos conjugados

2. Según reacción de saponificación

Lípidos saponificables

Lípidos insaponificables

3. Según localización histologica

L. Metabólicos

L. Homofásicos

L. Histogénicos

L. Heterofásicos

Clasificación según solubilidad

La saponificación consiste en una hidrólisis alcalina de la porción lipídica (con KOH ó NaOH). Los lípidos derivados de ácidos grasos dan lugar a sales alcalinas (Jabónes) y alcohol, que son fácilmente extraíbles en medio acuoso. No todos los lípidos presentes en una muestra biológica sufren este tipo de reacción. Por lo tanto hay dos tipos de lípidos:

Lípidos saponificables

Lípidos insaponificables

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