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TÉCNICA DEL SUSTRATO DEFINIDO

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Daniela Vaca

on 27 May 2014

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Transcript of TÉCNICA DEL SUSTRATO DEFINIDO

Colilert 250 permite detectar simultáneamente estas bacterias en 24 horas, a una concentración de 1 ufc /250 ml, en presencia incluso de un número tan elevado de bacterias heterótrofas como 5 millones en una muestra de 250 ml.
Cuando los coliformes totales metabolizan el nutriente indicador ONPG de Colilert 250, el color de la muestra se vuelve amarillo. Cuando E. coli metaboliza el nutriente indicador MUG de Colilert 250, la muestra además emite fluorescencia.
Procedimiento de presencia/ausencia (P/A) para muestras de agua no carbonatada:
2. Tapar el recipiente y agitar.
3. Incubar a 35 °C ± 0,5 °C durante 24 horas.
1. Añadir el contenido de una dosis a una muestra de 250 ml en un recipiente estéril transparente, no fluorescente.
Colilert 250 no se ha validado para ser utilizado con muestras de agua embotellada aromatizada.
Si la muestra de agua tiene un cierto color de fondo, comparar la muestra inoculada de Colilert 250 con un control en blanco de la misma muestra de agua.
TÉCNICA DEL SUSTRATO DEFINIDO
La prueba de autonálisis Colilert fue desarrollada por el Dr. Stephen Edberg de la
Universidad de Yale en 1988. La técnica emplea una tecnología desarrollada para identificar microorganismos
de infecciones del tracto urinario pero posteriormente fue adoptado para análisis de agua.
El Colilert* 250 detecta de manera simultánea el número de coliformes totales y Escherichia coli en agua potable. El kit utiliza la tecnología patentada Defined Substrate Technology* (DST*) de IDEXX.
Conservación:

Almacenar a una temperatura entre 2–30 °C protegido de la luz.
4. Revisar resultados y comparar con la tabla.
Medida organoléptica.
Utilizar solamente agua estéril, no tamponada, libre de oxidantes, para efectuar las diluciones.
Recomendaciones
Para la comparación, se puede utilizar un control negativo al interpretar los resultados.
Colilert 250 es fundamentalmente una prueba para analizar agua. Las características de rendimiento de Colilert 250 no se pueden aplicar a muestras que hayan sido alteradas previamente por algún tipo de enriquecimiento o concentración.
• En el caso de muestras con un exceso de cloro, se puede observar un destello azul al añadir Colilert 250. Si se observa, considerar que la muestra no es válida y desecharla.
• Siempre debe aplicarse una técnica aséptica cuando se utilice Colilert 250. Debe desecharse de acuerdo con las buenas prácticas de laboratorio.
El análisis de Colilert puede analizar Coliformes totales y E. Coli.
Equipos y herramientas:


• Recipientes estériles de 100mL
• Reactivos
• Bandeja Quanti-Tray
• Sellador Quanti-Tray
• Lámpara ultravioleta
• Guantes
• Bata de Laboratorio
• Mascarilla
• Botas o calzado adecuado
Aprobado por la agencia EPA de los EE. UU.: agua potable y agua sin tratar
Incluido en los Métodos estándar para el examen de agua y aguas residuales (Standard Methods for Examination of Water and Wastewater).
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