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EXTRACCION DE PROTEINAS

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maria alejandra peña rodriguez

on 30 September 2012

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Transcript of EXTRACCION DE PROTEINAS

Las proteínas son las moléculas orgánicas mas abundantes que desempeñan un mayor numero de funciones en las células de todos los seres vivos.constituidas básicamente por carbono (C), hidrógeno (H), oxígeno (O) y nitrógeno (N).
Desempeñan funciones estructurales ,enzimáticas, hormonales defensivas, reserva y transporte.
También son los elementos que definen la identidad de cada ser vivo, ya que son la base de la estructura del código genético (ADN). QUE ES UNA PROTEINA? METODOS DE ROTURA CELULAR Y EXTRACCION DE PROTEINAS lisis celular: METODOS DE ROTURA CELULAR http://www.itescam.edu.mx/principal/sylabus/fpdb/recursos/r46007.PD





Maite Moreno
Maria alejandra peña
BIBLIOGRAFIA EXTRACCION DE PROTEINAS TECNICA DE SEPARACION DE PROTEINAS El primer paso en el aislamiento de una proteína es la rotura celular, para posteriormente poder extraer la proteína con un tampón adecuado. valido para las células sin pared celular . consiste en suspender
las células de una solución hipotónica debido a la diferencia osmótica ,el agua difunde el interior de la célula, causando su hinchamiento y rotura. Destrucción mecánica : entre este método se encuentra la homogenización ( hacer pasar las celular entre un tubo y un pistón de vidrio que ajustan casi totalmente). Moler: en un mortero con arena o aluminia; o en un molino con perlas de vidrio.

Prensa de French: hace pasar las células a gran velocidad a través de un pequeño orificio.

Sonicación: someter las celular a vibraciones de ultrasonido

congelacion - descongelacion : la rotura se produce al someter las células a un cambio brusco de temperatura , congelando primero a 196C°(con nitrógeno liquido) pasándola rápidamente a 25C°. METODOS CROMATOGRAFICOS PARA SEPARACION DE PROTEINAS uno de los métodos habitualmente mas utilizados para la separación de proteínas es la cromatografía en columna aunque también existe en papel y placa .
se basa en las diferencias de cargas tamaño o afinidad de las diferentes proteínas se realiza en dos fase:
fase estacionaria :
Estacionaria
Movil TIPOS DE CROMATOGRAFIA filtración o exclusión molecular.
cromatografía de intercambio iónico.
cromatografía hidrofóbica
cromatografía de afinidad. METODOS ELECTROFORETICOS Su funcion es comprobar si la proteina de interes se ha separado del resto
es decir si la proteina esta pura , se requiere tecnicas electroforeticas.

la electroforesis de las proteinas se llevan a cabo generalmente en geles de poliacrilamida .
Durante la electroforesis la fuerza que provoca la migracion de las proteinas es un campo electrico y el gel actua como filtro molecular realizando la migracion de las proteinas.
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