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Buap-Unidad 3- Propiedades De Las Proteínas

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Rufina Martínez López

on 23 October 2017

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Transcript of Buap-Unidad 3- Propiedades De Las Proteínas

Propiedades De Las Proteínas
Practica 1
Desnaturalización De Proteínas
Comenzaremos utilizando 9 tubos de ensayo donde pondremos clara de huevo. Le echaremos un poco de agua hasta obtener una mezcla espesa, después colocaremos en los otros 3 tubos de ensayo 2-3 ml de leche, y por ultimo colocar en otros tres tubos de ensayo la gelatina ( sin sabor) y que este en agua tibia,
llevando un tubo por cada 3 al baño maria, después a los segundos tubos se le agregara HCL y a los restantes alcohol etílico
Practica 2
Reacciones Coloreadas
Lo siguiente es usar reactivos que provoquen algún color especifico en las sustancias como el reactivo del biuret que en la presencia de proteínas y enlaces peptídicos viran formando un color violeta las sustancias que se usan son: la cascara del huevo y la clara del huevo a estas se le añade de 4 a 5 gotas de solución de CuSO4 y de la solución NaOH
Fundamento Teórico
1) Desnaturalización de proteínas: Cuando la proteína no ha sufrido ningún cambio en su interacción con el disolvente, se dice que presenta una estructura nativa. Se llama desnaturalización de las proteínas a la perdida de las estructuras de orden superior (secundaria,terciaria y cuaternaria)quedando la cadena polipeptídica reducida a un polímero estadístico sin ninguna estructura tridimensional fija.
En una proteína cualquiera, la estructura nativa de la desnaturaliza tan solo tienen en común la estructura primaria, es decir la secuencia de AA que la componen. Los demás niveles de organización estructural desaparecen en la estructura desnaturalizada.
En una proteína cualquiera, la estructura nativa de la desnaturalización provoca diversos efectos:
cambios en las propiedades hidrodinámicas de la proteína: aumenta la viscosidad y disminuye el coeficiente de difusión
una drástica disminución de su solubilidad ya que los residuos hidrofobicos del interior interior aparecen en la superficie
En algunos casos de la desnaturalización conduce a la perdida total de la solubilidad, con lo que la proteína precipita. la formación de agregados fuertemente hidrofobicos simples impide su renaturalización
Practica 3
Reconocimiento de Proteínas
El objetivo de estas practica consiste en reconocer la presencia de proteínas en la clara de huevo. Para ello utilizaremos la prueba xantoproteica.
En el caso de haber proteínas en la clara de huevo, al añadir HNO3 y calentarlo, esta debe tomar un color amarillo suave y al añadir NH3 deberá tomar un tono anaranjado.
Tenemos clara de huevo en un vaso de precipitado.
tomamos una muestra con una jeringuilla y la vertemos en un tubo de ensayo. Añadimos el HNO3 y calentamos, una vez cambie añadimos NH3 y sucede lo siguiente : Experimento al hacer esta reacción dio positiva
Practica Experimental
Materiales:
huevo
leche
gelatina sin sabor
agua destilada
jeringa
cuchara
tubos de ensayo
hidróxido de sodio
sulfato de cobre
reactivo de biuret
reactivo de millon
albumina
HNO3
NH3
HCl
alcohol etílico
vaso de precipitado
3) Reacción xantoproteíca:
Es un método que se puede utilizar para determinar las presencia de proteínas solubles en una solución, empleando ácido nítrico concentrado. la prueba da resultado positivo en aquellas proteínas con aminoácidos portadores de grupos aromáticos, es especialmente en presencia de tirosina. si una vez realizada la prueba se neutraliza con un álcali, se torna de color amarillo oscuro.
La reacción xantoproteíca se puede considerar como una sustitución electrofítica aromática de los residuos de tirosina de las proteínas por el ácido nítrico dando un compuesto coloreado amarillo a PH ácido
4) Hidrólisis de proteínas :
es la ruptura de la estructura primaria, es decir, la ruptura de la secuencia de una proteína.
La hidrólisis de proteínas termina por fragmentar las proteínas en aminoácidos.
Hidrólisis ácida:
se basa en la ebullición prolongada de la proteína con soluciones ácidas fuertes
Hidrólisis básica:
respeta a los aminoácidos que se destruyen por la hidrólisis anterior, pero con gran facilidad, forma racematos (compuestos químicos con actividad óptica) normalmente se utiliza (NaOH e BaOH)
Hidrólisis enzimática :
se utilizan enzimas proteolíticas cuya actividad es lenta y a menudo incompleta, sin embargo no se produce racemización y no se destruyen los aminoácidos; por lo tanto es muy especifica
2) Reactivo de biuret:
Es aquel que detecte la parecencia de proteínas, cortos y otros compuestos con dos o mas enlaces peptídicos en sustancias de composición desconocida
Esta hecho de hidróxido potásico (KOH) y sulfato cúprico (CuSO4O) junto con bartrato de sodio y potasio. El reactivo de color azul, cambia a violeta en presencia de proteínas, y vira a rosa cuando se cambia con polipeptídos de cadena corta.
Se usa normalmente en el ensayo de biuret, un método colorimetrico que permite determinar la concentración de proteínas de una muestra mediante espetroscopía ultravioleta visible a una longitud de onda 560mm ( para detectar el ion cu2+)
Reactivo de millon:
es un ensayo químico que sirve para saber si existe tirosina en la solución, si esto es así se genera un coagulo blanco que por calentamiento pasa al rojo carne.
Observaciones:
Puede observar que en el baño maria la gelatina coagulo pero la clara y la leche siguieron en su estado normal
la clara de huevo al mezclarse con el alcohol etílico y el HCL mostró un precipitado blanco de albumina pero la gelatina y la leche no se experimento ningún cambio
Procedimiento y Resultados
añadimos NH3
Conclusiones
Las proteínas constituyen una de las principales moléculas en el organismo ya que cumplen muchas funciones.
la clara de huevo se desnaturaliza en todas las soluciones que se experimentaron anteriormente.
las proteínas están constituidas por aminoácidos por los cuales los métodos se basan en el reconocimiento de aminoácidos.
la leche se coagula con el HCl.
al realizar las diferentes pruebas con albumina se pudo comprobar experimentalmente que efectivamente se trata de una proteína
BUAP
NUTRICIÓN CLÍNICA
BIOQUÍMICA
Mtra. Rufina del Carmen Mtz. López
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