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Lipasa EC 3.1.1.3

Trabajo Universitario sobre el enzima lipasa, Enzimología, Grado en Bioquímica, Universidad de Córdoba. Antonio Reifs Carmona.
by

Antonio Reifs

on 21 April 2013

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Transcript of Lipasa EC 3.1.1.3

Triacilgliceridos Lipasa centrifugación centrifugación Lipasa EC 3.1.1.3 Historia La determinación de la
estructura y función de la
lipasa fue un proceso gradual.
La primera vez que se determino la actividad del enzima lipasa fue por Claude Bernard en 1846, sin embargo no fue hasta 1955 cuando Mattson y Beck demostraron la alta especificidad de la lipasa pancreática por los triacilglicéridos, en los últimos años se ha logrado cristalizar gracias al trabajo
intenso de muchos científicos. Triacilglicerol lipasa (EC: 3,1,1,3) o comúnmente denominada lipasa es un enzima hidrolítico (EC: 3,X,Y,Z) de la familia de las esterasas ya que cataliza una reacción de hidrolisis de un ester para formar un ácido y un alcohol, capaz de catalizar la hidrolisis o síntesis
de acilglicéridos de cadena larga Lipasa pH pH actividad lipasa
gastrica actividad lipasa
gastrica Las grasas necesitan una digestión especial antes de su absorción ya que los productos finales deben ser transportados en un medio acuoso (sangre y linfa), en el cual no son solubles. La mayor parte de los lípidos ingeridos en la dieta pertenecen a una clase denominada triacilglicéridos, estos son hidrolizados por las lipasas produciendo ácidos grasos y glicerol, moléculas que pueden ser absorbidas por los epitelios estomacales y del intestino delgado. Las lipasas son enzimas producidas por el hígado, páncreas, estomago, lisosomas, parótida, y glándulas Ebner.
La lipasa gástrica es secretada por la mucosa estomacal,
tiene un valor de pH óptimo de entorno la neutralidad,
por tanto esta se encuentra inactiva en el entorno
altamente ácido del estómago, esto nos sugiere que la
acción de esta enzima es especialmente importante
en la infancia ya que el pH de los jugos gástricos en
dichas edades es mucho menos acido que en edades
adultas. Sin embargo una pequeña parte de la
digestión de grasas ocurren en el estomago, la lipasa
gástrica digiere las grasas mediante un proceso de
emulsión.

La mayor parte del proceso digestivo de grasas en
adultos ocurre en el lazo superior del intestino
delgado, se realiza mediante una lipasa originada
en el páncreas, comúnmente denominada lipasa
pancreática.

Las enzimas pancreáticas secretadas al intestino
desde el páncreas generan ácidos grasos libres y
una mezcla de mono y diacilglicéridos como ruptura
de los triacilglicéridos ingeridos. La lipasa pancreática
degrada triacilglicéridos en las posiciones 1 y 3 para generar 1,2-diacilgliceridos y 2-acilgliceridos. Triacilglicerido Lipasa Ác. graso Glicerol SER 152 ASp 176 His 263 R. chinensis Actividad específica: 7 a 12 unidades/mg
Km: 16,12mM
Vmax: 11,3 unidades/min Sigue una cinetica de Michaelis-Mente Estudiada en el organismo actiomiceto en un intervalo de pH de entre 2 a 9 con una temperatura optima de 50ºC Datos obtenidos de un articulo realizado por: Pedraza Lorena, Rodríguez Mariana y Zavala Víctor, en la Universidad Iberoamericana: http://www.smbb.com.mx/congresos%20smbb/puertovallarta03/TRABAJOS/AREA_I/CARTEL/CI-17.pdf Las imágenes expuestas en este trabajo han sido obtenidas a través del programa DeepView gracias a:
Guex, N. and Peitsch, M.C. (1997)
SWISS-MODEL and the Swiss-PdbViewer: An environment for comparative protein modeling.
Electrophoresis 18, 2714-2723.
Página oficial del programa DeepView: http://www.expasy.org/spdbv/ Se puede leer el protocolo y métodos utilizados para la correcta extracción en el siguiente enlace: http://148.206.53.231/UAMI15355.pdf
Universidad Autónoma Metropolitana
Unidad Iztapalapa
Tesis realizada por Sara González Terán para obtener el grado de especialista en biotecnología Detergente
aséptico Agua
destilada Solución
amortiguadora Fosfato de sodio: 50mM
pH: 6,5 15 rpm, durante 30 min Tritón
X-100 15 rpm, durante 30 min La aplicación de enzimas en la industria papelera ha permitido el desarrollo de tecnologías alternativas de fabricación, más respetuosas con el medio ambiente que las convencionales y que, en muchos casos, pueden denominarse tecnologías limpias. En este contexto, la aplicación de xilanasas como potenciadores del blanqueo de la pasta de papel permite el establecimiento de secuencias de blanqueo ECF y TCF rentables, con una importante disminución en los vertidos de organoclorados absorbibles (AOX).

Dada la complejidad y variedad de los procesos papeleros, varios grupos de investigación están estudiando la aplicación de enzimas en otras etapas de fabricación, tal como el uso de celulasas para el desgote o como potenciadoras del refinado.

La fabricación de papel a partir de fibras recicladas constituye otra alternativa papelera respetuosa con el medio ambiente. Una de las etapas clave en el reciclado de papel es el destintado de las fibras. El uso de celulasas, hemicelulasas y amilasas para el destintado enzimático de las fibras es objeto de estudio de diversos laboratorios. Dado que muchas tintas son de naturaleza lipídica, una aproximación diferente es el uso de enzimas con actividad lipasa para facilitar el destintado del papel.

Desarrollo de lipasas con aplicación en la industria papelera, Realizado por: Javier Pastor, Núria Prim, Oscar Gallardo, Cristian Ruiz, Teresa Vidal, Pilar Diaz. Departamento de Microbiología. Facultad de Biología. Universidad de Barcelona. Industria papelera
Las lipasas son usadas en detergentes ya que al poder digerir las grasas las hace ideales para poder eliminar las manchas de este tipo, en 1988 se comercializó la primera lipasa comercial para detergentes, su nombre fue: lipolasa,
en 2002 se vendió el primer detergente comercial que lo contenía lipasa a este se le denomino: Lipex.

La lipolasa utilizada es producida por hongos modificados genéticamente, la lipolasa es producía naturalmente por un hongo filamentoso llamado Humicola, el gen que le aporta dicha capacidad fue transferido al Aspergillus oryzae, que es el que produce industrialmente el enzima. La empresa que lo hizo fue Novozymes.

Aunque en esta industria aun quedan dos problemas por resolver:
-El primero es que hay algunas manchas que no se pueden eliminar con las enzimas comerciales, como las manchas de café, vino tinto y algunas bayas, aunque hoy se consigan eliminar mediante un sistema de oxidación
-El siguiente problema concierne al gasto de energía, estas encimas funcionan bien entre 30 y 95ºC, obligando este hecho a calentar el agua, con el correspondiente consumo eléctrico, etc.

Por lo que los futuros estudios pueden apuntar a la creación de un detergente enzimático que funcionase a temperaturas inferiores a 20ºC, optimizando al máximo el ahorro de energía. Industria del detergente Dentro de la industria alimentaria, las lipasas participan en la acidólisis (reemplazamiento de un ácido graso esterifi-cado por un ácido graso libre), como también en la transesterificación, que consiste en intercambiar el grupo alcoxi (RO-) de un éster por otro alcohol, este tipo de proceso es llevado a cabo para la producción de biodiesel a partir de aceite vegetal o animal. Por otro lado la interesterificación implica el cambio (al azar) de los ácidos grasos en la estructura del glicerol de la grasa en presencia de un catalizador químico, tal como metóxido de sodio o una enzima (lipasa); este proceso se emplea para producir acilgliceroles modificados que no pueden obtenerse mediante química tradicional (Sharma et al., 2001). Así, por ejemplo, se puede alterar el punto de fusión de un aceite modificando la composición y/o estructura de sus triglicéridos mediante esterificación, utilizando como co-sustratos determinados ácidos grasos u otros triglicéridos de diferente composición (Schmid& Verger, 1998). La mayoría de estas reacciones se llevan a cabo a baja actividad de agua, para prevenir la hidrólisis de los ésteres.

Las principales lipasas de microorganismos con
interés industrial son producidas por hongos
(Bruce et al., 1991), pero muchas de las lipasas
son extraídas también de bacterias.






Artículo: Enzimas Lipolíticas y su Aplicación en la Industria del Aceite, realizado por: Crisalejandra Rivera-Pérez, Fernando García-Carreño*. Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste: http://www.smbb.com.mx/revista/Revista_2007_2/Enzimas_Aceite.pdf Industria alimentaria Muchas Gracias por la atención
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