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Análise Fitoquímica de Extratos Vegetais - Atividade Antioxidante, Fenois, Flavonóides e Taninos Totais

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by

Karoline Mansano

on 21 September 2012

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Transcript of Análise Fitoquímica de Extratos Vegetais - Atividade Antioxidante, Fenois, Flavonóides e Taninos Totais

Análise Fitoquímica de Extratos Vegetais - Atividade Antioxidante, Fenois, Flavonóides e Taninos Totais A Análise fitoquímica de um extato é de extrema importância, pois é ela quem vai mostrar quais compostos a planta possui, logo qual a melhor aplicação para ela. Compostos com Atividade Antioxidante, Fenóis, Flavonóides e Taninos são compostos gerados a partir do metabolismo secundário das plantas.

*Bem como o ácido hialurônico, que hoje é usado como biopolimero

O metabolismo secundário vegetal é a força motriz de vários estudos envolvendo fitoterápicos, "cosméticos verdes" e é, até mesmo, a base para a industria farmaceutica química, pois é baseado em moléculas naturais que se produzem as sintéticas. Protocolos 1) Avaliação da Atividade Antioxidante por DPPH

Reagentes:Etanol, Acetato Tampão, Reagente DPPH, Amostra do Extrato
Metodologia:
Em tubos de ensaio acrescenta-se os reagente acima, agitar e deixar reagir por, no minimo, 30minutos, no escuro (Pois o reagente DPPH é fotosensivel, logo ao esposto a luz sua atividade não é satisfatória e pode gerar resultados equivocados). Fazer leitura no espectrofotometro (517nm).
*O reagente DPPH é roxo, a sua reação com o extrato, que possua composto com atividade antioxidante, leva a solução a ficar amarela.
AA% = (abs controle - abs amostra / abs controle) *100

- EC50
O EC50 é a [] necessária para obter-se 50% da atividade antioxidante. Ele é dado pela equação da reta, obtida pela regressão linear das amostras.
50 = a*EC50 + b -> EC50 = 50 - b / a 2) Quantificação de Fenóis Totais

Reagentes:
Agua, Folin Ciocauteau, NaCO3 10%, Amostra do Extrato
Metodologia: Em tubos de ensaio acrescenta-se os reagente acima, agitar e deixar reagir por, no minimo, 1hora. Fazer leitura no espectrofotometro (725 nm).
Essa metodologia mede a quantidade ácido gálico no extrato, isso por que o ácido gálico é percursor de uma grande classe de fenóis.
*A solução é incolor, a sua reação com o extrato, que possua ácido gálico, leva a solução a ficar azul.
*A partir de uma curva de calibração, obtida por concentrações conhecidas de ácido gálico, obtem-se a equação da reta de quantificação desse método.y= 0,0697x + 0,2125 3) Quantificação de Flavonóides Totais

Reagentes:
Amostra do extrato, água, NaNO2 5%, AlCl3 10%, NaOH
Metodologia:
Em tubos de ensaio acrescenta-se os reagente acima, agitar. Fazer leitura no espectrofotometro (510 nm).
Essa metodologia mede a quantidade rutina no extrato, isso por que a rutina é percursor de uma grande classe de flavonóides.
*A solução é amarela, a sua reação com o extrato, que possua rutina, leva a solução a ficar branca.
*A partir de uma curva de calibração, obtida por concentrações conhecidas de rutina, obtem-se a equação da reta de quantificação desse método.
y= 0,1202x - 0,1835 4) Quantificação de Taninos Condensados

Reagentes:
Amostra do extrato, Reagente Vanilina (Vanilina e HCl)
Metodologia:
Em tubos de ensaio acrescenta-se os reagente acima, agitar e deixar reagir por, no minimo, 20minutos. Fazer leitura no espectrofotometro (500 nm).
Essa metodologia mede a quantidade catequina no extrato, isso por que o catequina é percursor de uma grande classe de taninos condensados.
*A solução é incolor, a sua reação com o extrato, que possua catequina, leva a solução a ficar vermelha.
*A partir de uma curva de calibração, obtida por concentrações conhecidas de catequina, obtem-se a equação da reta de quantificação desse método.
y= 0,4772x + 0,1424 Obs gerais:
*Os testes podem ser feitos com soluções diluidas em alcool ou em água;
*Os resultados são expressos em mg(do composto).g–1(do extrato). Dentre muitas propriedades resalto algumas possiveis de aplicações na nossa área:
- Fenóis e Flavonóides são compostos com alta atividade antioxidantes; eles diminuem a permeablidade de vasos capilares, sendo assim vasoprotetores; são antiinflamatórios. Flavonóides possuem atividade fotoprotetora também.
- Taninos Condensados são compostos que precipitam proteinas, por isso a ação cicatrizante. Além, disso também são ótimos adstringentes. Algumas possiveis plantas para estudo, que possuem esses compostos: Sálvia, Pepino, Hamamelis. Karoline Mansano Romeira

karolinemansano@hotmail.com Obrigado!
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