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CÁMARA DE NEUBAUER

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Grupo n°4 Urinálisis

on 23 June 2014

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Transcript of CÁMARA DE NEUBAUER

CÁMARA DE NEUBAUER
Carolina Espinosa
Kevin Morales
Liz Saldaña
Dorllys Miranda

Cámara de Neubauer
La Cámara de Neubauer es un instrumento utilizado en medicina y biología para realizar el recuento de células en un medio líquido, que puede ser un cultivo celular, sangre, orina, líquido cefalorraquídeo, líquido sinovial, etc.
Características de la Cámara de Neubauer Tradicional
En la Cámara de Neubauer tradicional, está dividido en 16 cuadrados medianos y cada uno de ellos se halla dividido a su vez en 25 cuadrados pequeños (400 cuadrados pequeños en total). Además la última fila y la última columna de cuadrados pequeños están dividida al medio
Materiales
Los elementos necesarios para realizar un recuento celular son los siguientes: muestra celular a medir, cámara de Neubauer, microscopio óptico, cubre objetos, pipeta / micropipeta con puntas, buffer para diluciones / PBS, en su caso.
Conteo de Células, Paso a paso.
Preparación de la muestra.

Dependiendo del tipo de muestra a medir, se prepararara una con una concentración apta para su recuento. Típicamente, el rango de concentraciones que permite contar está entre 250.000 células y 2,5 millones de células por ml.

Por encima de 2,5 millones, la probabilidad de cometer errores de conteo crece demasiado, y también el tiempo y esfuerzo necesario para realizar un recuento con fiabilidad. Por encima de esta concentración es conveniente diluir la muestra para acercar la concentración al rango óptimo.

PASO 2
Posicionamiento del cubre-objeto:
Los soportes exteriores se humedecen con agua destilada. Luego se coloca el cubre objeto a suave presión desde delante sobre la cámara de recuento. La creación de líneas de interferencia (anillos de Newton) entre los soportes exteriores y el cubre-objeto indica que el cubre-objeto está colocado correctamente.

PASO 3, Cargar
Pipetas mezcla-sangre utiliza
Pipeta de leucocitos (perla blanca)
Pipeta de eritrocitos (perla roja)

PASO 3. Preparación y enfoque del microscopio.
1. Dejar reposar la cámara por 3 minutos, para que las células se asienten.
2. Colocar la cámara de Neubauer en la bandeja del microscopio.
3. Colocar la cámara en la platina del microscopio.
objetivo de 10x enfocar el área cuadriculada de la cámara
objetivo 40x para contar las células.

Posibles errores
Recuento de las partículas
Técnica de recuento:
El recuento requiere un exacto conocimiento de las líneas del retículo de la respectiva cámara de recuento. En la ilustración se ve las líneas triples del sistema Neubauer mejorado.
Para que las células, que están encima o cerca de las líneas de limitación, no se cuenten dos veces o se olvidan en el recuento.


Características de laCámara Neubauer Modificada
En cambio, en la cámara de Neubauer modificada el cuadrado grande central está dividido en 25 cuadrados medianos y cada uno de ellos está dividido en 16 cuadrados pequeños (400 cuadrados pequeños en total).
La pipeta bien mezclada, se quita del agitador y se arrojan las primeras gotas. Luego se Limpia y seca la pipeta por fuera y se debe mantener inclinada hasta que se haya formado una pequeña gota en la punta. Esta gota se sitúa en el punto entre el cubre objeto y la cámara de conteo. Por efecto de capilaridad el espacio entre el cubre-objeto y el fondo de la cámra se llena.

Antes de que la solución desbordar por esta parte de la cámara, se debe retirar. Si hay burbujas de aire o si se ha desbordado líquido a las ranuras, la cámara tiene que ser limpiada y nuevamente cargada

Se cuentan todas las células que se encuentran dentro de una definida zona de medición.

También se cuentan las células (marcadas en negro) que tocan o están encima de 2 líneas en un lado.

Limpieza de las cámaras de recuento
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