Loading presentation...

Present Remotely

Send the link below via email or IM

Copy

Present to your audience

Start remote presentation

  • Invited audience members will follow you as you navigate and present
  • People invited to a presentation do not need a Prezi account
  • This link expires 10 minutes after you close the presentation
  • A maximum of 30 users can follow your presentation
  • Learn more about this feature in our knowledge base article

Do you really want to delete this prezi?

Neither you, nor the coeditors you shared it with will be able to recover it again.

DeleteCancel

Make your likes visible on Facebook?

Connect your Facebook account to Prezi and let your likes appear on your timeline.
You can change this under Settings & Account at any time.

No, thanks

HPV DIGEN TEST_RU

Современные подходы к диагностике цервикальной интраэпителиальной неоплазии, ассоциированной с ВПЧ высокого канцерогенного риска.
by

Aleksandr Tseipek

on 3 December 2013

Comments (0)

Please log in to add your comment.

Report abuse

Transcript of HPV DIGEN TEST_RU

Современные подходы к диагностике цервикальной интраэпителиальной неоплазии, ассоциированной с ВПЧ высокого канцерогенного риска.
Введение
Рак шейки матки является одним из часто встречающихся заболеваний в онкогинекологии. Он составляет около 16% злокачественных опухолей у женщин, по этой причине в России
ежедневно умирает 17 женщин.
Роль ПВИ в развитии CIN и рака шейки матки
Скрининг
Цитологическое исследование мазков
Кольпоскопия
Цитология
Докладчик: Цейпек Александр Юрьевич
Врач высшей категории
Советник по лабораторному и диагностическому оборудованию.
Руководитель отдела маркетинга Компании LUMINARY
Частота ПВИ и частота рака шейки матки в зависимости от возраста
Классификация типов ВПЧ по риску онкогенности (Lorincz I,1992).
Онкотипы низкого риска развития рака
6, 11, 42, 43, 44, 53, 54, 55
Онкотипы высокого риска
16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68
Харальд цур Хаузен — немецкий медик и учёный, открыл роль папилломавирусов в развитии рака шейки матки.
Исследование длительностью более
34 лет

10 000
пациенток.
За свои научные заслуги Харальд цур Хаузен стал лауреатом Нобелевской премии 2008 года в области медицины и физиологии.
(Г.Н. Минкина, 2001; Р.Ш. Хасанов, 2006; Ю.И. Подистов, 2006; Р.Т. Адамян, 2007).
В настоящий момент инфицированность ВПЧ лиц биологически активного возраста составляет
20-60%

(Ludicke F. еt al., 2001).
Главной особенностью ВПЧ сегодня считают ее широкое распространение: до
70% юных женщин
, инфицированы данным вирусом
Онкотипы среднего риска
30, 35, 45, 52, 53, 56, 58
(Козлова В.И., Пухнер А.Ф., 2003; Шахова Н.М. и др., 2006; Lorincz AT et al., 1992)
[ Zur Hausen H., 1996 ].
Структура, белки, жизненный цикл
Возрастные аспекты ПВИ
Скрининг (от англ. screening — «отбор, сортировка») — стратегия в организации здравоохранения, направленная на выявление заболеваний у клинически бессимптомных лиц в популяции.
Цель скрининга — по возможности раннее выявление заболеваний, что позволяет обеспечить раннее начало лечения в расчёте на облегчение состояния пациентов и снижение смертности.
В Советском Союзе была программа скрининга рака шейки матки. Первые программы цитологического скрининга РШМ стали осуществляться в 1964 г.


После приказа №1253 от 30.12.76 г. цитологический скрининг РШМ был включен в систему ежегодных массовых профилактических осмотров.
За последние два десятилетия система организованного скрининга в России была практически разрушена, на смену ему пришел оппортунистический скрининг, в котором участвуют
14-30%
женского населения.

Возможно, что именно распад системы организованного скрининга явился основной причиной неуклонного
роста
заболеваемости
рака шейки матки.
(И.П. Шабалова, Н.А. Шапиро, Н.Ю. Полонская, Н.В. Космачева 2012)
В России до сих пор нет программы организованного цитологического скрининга РШМ!
Приказами Министерства Здравоохранения регламентированы лишь общие положения: ежегодные профилактические осмотры всех женщин старше 18 лет с проведением цитологического исследования мазков из шейки матки и шеечного канала. В течение последних 20 лет стратегия скрининга РШМ не менялась.
Диагностические тесты, применяемые при проведении скрининга РШМ:
1. Тест по Папаниколау
2. Кольпоскопия и Биопсия
Новые технологии
Компьютеризированная система скрининга (Авто-Пап)
Жидкостная цитология
Молекулярно-генетическая диагностика ВПЧ
Классические
HPV DNA Hybrid Capture II (Digene-тест)
ПЦР Real-time
Электронно-оптическая система TruScreen-Тест®
Материал из Википедии
Тест по Папаниколау - цитологическое исследование мазков, взятых из канала шейки матки
(Einstein МН, Goldberg GL., 2002).
Для скрининга РШМ широко рекомендовано использование теста по Папаниколау (Пап-тест) не реже 1 раза в три года для всех женщин в возрасте от 20 до 65 лет.
(Zoorov R., 2001).
Данный тест использовался для диагностики РШМ с 1940 года (Nuovo J., 2001).
Nanda К et al в 2000 году провели систематический обзор 1193 статей с целью оценки качества Пап-теста для выявления РШМ.
Результаты исследования показали, что чувствительность Пап-теста в разных лабораториях варьирует в широких пределах:
от 30 до 87%
и специфичность
от 86 до 100%
соответственно, что может быть связано с самыми различными проблемами, влияющими на результаты теста.
Проблемы организационные:
Отсутствие четкой программы скрининга с разработкой всех организационных впросов
Отсутствие профилактических медицинских осмотров работников акционерных и частных предприятияй
Отсутствие системы персональной регистрации женщин
Проблемы, связанные с качеством получения материала и приготовления препаратов:
Основная причина низкой чувствительности - погрешности при взятии материала и приготовлении препаратов
(Шабалова И.П., 2007)
Гинекологи не всегда правильно понимают гистологические заключения!
Часто в гистологических описаниях встречаются фразы:

слизь, небольшие фрагменты многослойного плоского эпителия без подлежащих тканей и другие заключения, которые гинеколог

расценивает как отрицательные.
При обнаружении цитопатологии рекомендовано проведение кольпоскопии с последующей биопсией.
(Cancer Facts and Figures, 2005).
У нас в стране развита кольпоскопия, метод наряду с высокой чувствительностью
малоспецифичен,
что, по мнению некоторых авторов, приводит к чрезмерному неэффективному числу биопсий и ненужному лечению.

(Poparez J., 2006)

• Недостаточная квалификация исследователя;

• Операторозависимость и субъективность;

• Проблемы с воспроизводимостью;

• Инструментозависимость (зависит от качества оптической системы)

• Трудности в установлении диагноза при кольпоскопии, если граница плоского и цилиндрического эпителия не видна;

• Затрудняющие диагностику анатомические особенности, например положение шейки матки;

• Диагностику затрудняют также кровотечения;

Farbatlas der Kolposkopie
H. Bauer. - Stuttgart-New-York, 1998
Метод жидкостной цитологии был разработан с целью повышения достоверности результатов Пап теста.

(Vassilakos Р, Petignat Р, Boulvain М, Сатрапа А., 2002)

Использование жидкостной цитологии позволяет повысить качество интерпретации мазков и снизить число мазков с неясным результатом.
Жидкостная цитология
Традиционная цитология
Основными методами исследования патологии шейки матки были традиционная цитология с окраской гематоксилином и эозином
Сейчас во всем мире применяется стандартизованный метод жидкостной цитологии с окраской по Папаниколау.
Чувствительность — 66-83 %
Специфичность — 60-85 %
(Новик В.И. Скрининг рака шейки матки. Практическая онкология. 2010)
BD SurePath™
Liquid-based Pap Test
PrepMate
BD PrepStain™
Slide Processor
BD FocalPoint™
GS Imaging System
GS Review Station
Cervical Cancer Screening Solutions Компьютеризированный скрининг рака шейки матки
Иммуногистохимический метод выявление Р16ink4a
Ошибки кольпоскопии
Кольпоскопическое обследование (без дополнительных методов) может выявить дисплазию эпителия шейки матки только
в 2/3 случаев.
Около
50%
результатов кольпоскопических исследований могут является
ложноположительным.
Около
25% тяжелых
поражений эпителия при кольпоскопическом исследовании классифицируются как
легкие.
Низкая чувствительность
при контроле лечения дисплазии.
Врач должен провести не менее
200 кольпоскопий
под наблюдением высоко квалифицированного врача кольпоскописта, чтобы начать самостоятельный кольпоскопический осмотр шейки матки.

(Buxton, 1991; Skehan, 1990; Danny, 1995; Березовская Е. П.)
В соответствии с международными стандартами кольпоскопический метод диагностики

не отнесен к скрининговым

методам исследования.

Жидкостная
Молекулярно-генетическая диагностика ВПЧ
Hybrid Capture II
Real-time PCR
HPV DNA
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ
TEST
HC2 (Digene)
ПЦР «Real-time»
Дайджин -тест правильный выбор!
Подтверждено миллионами клинических случаев.
Клиническая чувствительность?
Ошибки кольпоскопии
Забор материала
Приспособления для забора и хранения цервикальных образцов
Сбор и транспортировка цервикальных образцов для теста на ВПЧ:
1 пробирка с транспортной средой
1 цервикальная щетка

Хранение цервикальных образцов:
2 недели при температуре от 15-30ºC
+2 недели при температуре от 2-8ºC
3 месяца при температуре -20ºC

Биопсийный материал:
образец размером до 5 мм, немедленно поместить в пробирку с транспортной средой, хранение в течение суток +2 - +30ºС, далее при -20ºС,

Не применять гистологические фиксаторы!

Схема забора образца для исследования с помощью диагностических наборов
Hybrid Capture 2 HPV


Перед взятием образца необходимо удалить цервикальную слизь из цервикального канала и окружающей области с помощью ватного тампона.
Для забора образца следует ввести цервикальную щетку на 1-1,5 см в цервикальный канал.
Затем поверните щетку 3 раза против часовой стрелки.
Не вводите щетку целиком в цервикальный канал.
Удалите щетку из цервикального канала.


Откройте пробирку и поместите щетку в пробирку.
Избегайте касания щетинок щетки внешней стороны пробирки или других объектов.
Отломите щетку от ручки по видимой линии
Плотно закройте пробирку крышкой.
Цервикальные образцы могут храниться до 2 недель при комнатной температуре и доставляться к месту исследования без охлаждения.
После доставки в лабораторию образцы могут храниться при 2-8ºС еще в течение 1 недели или 3 месяца при -20ºС вплоть до проведения исследования.


Работа с биопсийным материалом из цервикального канала:
Биопсийные образцы из цервикального канала размером до 5 мм в диаметре должны быть помещены немедленно после взятия в пробирки со средой для транспортировки образцов (Specimen Transport Medium). Биопсийные образцы могут быть доставлены в лабораторию при 2-30ºС в течение дня и должны быть заморожены при -20ºС вплоть до проведения исследования.


В России, отмечается рост заболеваемости женщин в возрасте до 45 лет .
(В.П. Прилепская, 2005; Н.И. Кондриков, 2008).
Эпидемиологические исследования показывают, что ВПЧ обнаруживается в 99,7% всех случаев РШМ.
(Walboomers J, Jacobs M, Manos M, Bosch F, Kummer J, Shah K, Snijders P, Peto J, Meijer C, Muñoz N., 1999)
Скринингу должны подвергаться женщины с 25-30 лет или через 7-10 лет после вступления в половую жизнь.
В настоящее время нет сомнений в существовании причинно- следственной связи между инфицированием ВПЧ и развитием РШМ.

(Коломиец Л.А., Уразова Л.Н., Севастьянова Н.В., Чуруксаева О.Н., 2002; Ciizick J., 2000)



Более того, инфицирование ВПЧ считается основной причиной возникновения РШМ.

(Cancer Facts, 2005).

Подходы к проведению скрининга рака шейки матки сильно варьируют в разных странах.
(Новик В.И. и др., 2001)
Анализ подходов к проведению скрининга
Преимущества метода жидкостной цитологии:
В контейнер попадает весь материал, взятый щеточкой

Из одного контейнера можно приготовить несколько препаратов

Тонкослойные препараты удобны для микроскопии

Клетки сохраняют морфологические, молекулярно-биологические свойства

Можно уточнить характер поражения без повторного гинекологического обследования

Длительный срок хранения исследуемого материала

Технология ВПЧ Digene-тест®
Технология Real-time PCR
Интерпретация результата

При определении ВПЧ в целях скрининга на рак шейки матки значение имеет только КЛИНИЧЕСКИ ЗНАЧИМОЕ количество вируса, поэтому в данном случае высокая чувствительность метода ПЦР «Real-time» не дает преимуществ.

При использовании метода ПЦР с детекцией сигнала по конечной точке приходится даже СНИЖАТЬ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ за счет разведения образца, чтобы получить КЛИНИЧЕСКИ ЗНАЧИМЫЙ результат.

Важно ли выявить даже одну копию ВИЧ? -

Важно ли выявить даже одну копию вируса гепатита С? –
Важно ли выявить даже одну копию ВПЧ? –

ДА
ДА
НЕТ
Full transcript