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GENERALIDADES METODO EPA 1623

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Consultores Microbiologia

on 4 January 2013

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Transcript of GENERALIDADES METODO EPA 1623

Detección de Giardia spp y Cryptosporidium spp en aguas GENERALIDADES METODO EPA 1623 DAPI(4-6, DIAMIDINO-2-FENILINDOL) DIC(CONTRASTE DE INTERFERENCIA DIFERENCIAL) Periódicamente “emergen” nuevas enfermedades, incluídas aquellas relacionadas con el agua, ya sea porque se reconocen como tales o por el aumento significativo de su importancia. Esto se puede deber a la evolución de los microorganismos; a cambios en el manejo de los recursos hídricos y del abastecimiento de agua; a cambios de herramientas y métodos para estudiar los organismos y sus efectos sobre la salud, o a cambios en la misma población humana.
Contempla 4 pasos:

Filtración, Elusión y Concentración.

Separación Inmunomagnética.

Detección.

Confirmación.
(OMS, 2004) PRIMER PASO ELUSION CONCENTRACION FILTRACION
FILTRACION, ELUSION Y CONCENTRACION
SEGUNDO PASO TRANSFERENCIA A LOS TUBOS CARA PLANA FUNDAMENTO SEPARACIÓN INMUNOMAGNÉTICA
Separación rápida y selectiva de quistes de Giardia spp y ooquistes de Cryptosporidium spp de muestras de agua concentradas.
Los anticuerpos revestidos sobre las perlas enlazan selectivamente a los quistes y/o ooquistes dentro de la muestra concentrada de agua, formando complejos.
Los complejos Perlas-Organismos son separados usando concentradores de partículas magnéticas.
Posteriormente los quistes y ooquistes son disociados de las perlas.
COMPLEJO PERLAS-ORGANISMOS ADICIÓN DE PERLAS CONCENTRADOR DE PARTICULAS MAGNETICAS 1 CONCENTRADOR DE PARTICULAS MAGNETICAS 2 TERCER PASO IFA
DETECCIÓN
FUNDAMENTO FITC(ISOTIOCIANATO DE FLUORESCEINA) CUARTO PASO Utiliza el principio de inmunofluorescencia directa.
El reactivo de detección contiene una mezcla de FITC sensibilizado con anticuerpos monoclonales dirigidos contra antígenos de la pared celular de los ooquistes de Cryptosporidium y quistes de Giardia.
Un muestra de agua preparada es tratada con el reactivo de detección y la tinción de contraste.
Los anticuerpos monoclonales se unen a los antígenos de Cryptosporidium y Giardia presentes en la muestra.
CONFIRMACIÓN
GRACIAS
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