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PAS (REACCIÓN DEL ÁCIDO PERYÓDICO- REACTIVO DE SCHIFF)

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1semestre vep

on 10 September 2014

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Transcript of PAS (REACCIÓN DEL ÁCIDO PERYÓDICO- REACTIVO DE SCHIFF)

PAS (REACCIÓN DEL ÁCIDO PERYÓDICO- REACTIVO DE SCHIFF)
La reacción de PAS nos revela todo tipo de carbohidratos (polisacáridos, como el glucógeno, mucopolisacáridos, glucolípidos, glucoproteínas etc.). Se basa en la reacción con el reactivo de Schiff de los grupos aldehído liberados de los grupos vic-glicol presentes en los carbohidratos tras su oxidación con ácido peryódico.
La tinción de PAS (ácido periódico-de Schiff) permite la determinación del glucógeno, de las mucinas, de los mucopolisacáridos neutros así como de los filamentos y esporas micelianos. El ácido periódico transforma los glicoles en aldehído. El reactivo de Schiff, desteñido por el ácido sulfúrico, reacciona con los aldehídos libres formando un producto de condensación de color rojo, contra teñido con la hematoxilina
Material
Como material de partida se emplean cortes de tejido fijado en formalina e incluido en parafina o bien extensiones celulares.

Cortes parafínicos de 3-5 µm de espesor

Su composicion
Fucsina básica < 1%
Ácido clorhídrico < 10%
Metabisulfito de sodio < 1%
Biopsia de riñón, Tinción PAS
El reactivo de Schiff contiene fucsina básica (o pararrosanilina), que en solución ácida y en presencia de SO2 da lugar a una forma no coloreada (ácido N-sulfónico). Este reactivo reacciona con los grupos aldehído libres formando un compuesto insoluble de color púrpura. Esta técnica se utiliza sobre cortes obtenidos de tejido incluido en parafina o de tejido congelado.

Como resultao: carbohidratos en color púrpura
epidermis de trucha, Salmo trutta fario
1. Desparafinar e hidratar los cortes con agua del grifo durante 10 min
2. Aclarar con agua destilada
3. Oxidar con ácido periódico al 0,5% durante 15 min
4. Aclarar con agua corriente durante 10 min
5. Teñir con el reactivo Q Path reactivo de Schiff durante 15 min


Protocolo para la tincion PAS
6. Aclarar con agua corriente durante 10 min
7. Meter en la solución de Q Path hematoxilina de Harris durante 4 min
8. Aclarar con agua corriente durante 10 min
9. Deshidratar, aclarar
10. Montar las láminas con la gama Q Path Coverquick.
Las sustancias PAS-positivas tiñen en rojo y el núcleo en azul. El portaobjetos de
extracción de diastasa (α-amilasa) no tendrá ninguna tinción PAS visible de glicógeno, al
compararlo con el portaobjetos de control positivo de glicógeno no digerido.
Bibliografía
http://www.labonord.com/IFU/ES/10047025.pdf

http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Membranous_nephropathy_-_pas_-_very_high_mag.jpg

http://es.scribd.com/doc/80688931/Tincion-PAS

http://www.e-histologia.unileon.es/1inicio/home/tecnicas.htm

https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigma-aldrich/docs/Sigma/General_Information/1/insert_es_395.pdf

http://www.montebio.com.ar/pdf/INSERTO%20PAS.pdf

file:///C:/Users/Usuario_Final/Desktop/insert_es_395.pdf

http://scielo.isciii.es/scielo.php?pid=S0365-66912004001100005&script=sci_arttext
Consultados el día 03 de
Septiembre del 2014
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