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Evolución en acción: innovación funcional mediada por la sob

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on 17 October 2013

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Transcript of Evolución en acción: innovación funcional mediada por la sob

LA MUTACIÓN COMO FUENTE DE INNOVACIÓN. ¿QUÉ ES LA MUTACIÓN?
EVOLUCIÓN Y ROBUSTEZ MUTACIONAL

Evolucionabilidad (‘evolvability’) y Paisajes adaptativos


-Deriva genética

Duplicación génica del sistema GroES/EL en E. coli MG1655 ΔmutS)
Acumulación de mutaciones por pases de selección
Estudio Innovación funcional

Determinación de los cambios genéticos producidos en las cepas evolucionadas mediante secuenciación masiva
OBJETIVOS
MATERIALES
METODOLOGíA
Evolución en acción:
innovación funcional mediada por la sobre-expresión del complejo de chaperonas GroES/EL en
Escherichia co
MG1655
ΔmutS.

Escherichia coli MG1655 ∆mutS
LB +

42°C
37°C
Determinación de la tasa de crecimiento poblacional en distintos puntos del proceso evolutivo
Ara Cm Agar
Escherichia coli
ΔmutS
CONCLUSIONES
Bajo condiciones de sobre-expresión de la chaperona GroEL se acumulan más mutaciones que en condiciones de no sobre-expresión
Bajo condiciones de sobre-expresión, pese a la acumulación de más mutaciones no sinónimas que serían desestabilizantes, éstas están tamponadas por la propia chaperona permitiendo que la cepa tenga una tasa de crecimiento igual o mayor que la cepa ancestral.
La tasa de fijación de mutaciones es mayor bajo estrés térmico (42°C) que a temperatura óptima de crecimiento (37°C)
Las mutaciones acumuladas han afectado a la morfología de colonia y a las tasas de crecimiento
Es necesario prolongar el estudio de evolución experimental aumentando el número de generaciones bajo pases seriados
Se necesitan más herramientas estadísticas para analizar todos los datos genómicos para correlacionarlos con los datos fenotípicos obtenidos
Mecanismos de Robustez mutacional
-Duplicación Génica
-Chaperonas
Las chaperonas como efectores de Robustez Mutacional
GroES/GroEL
Flexibilidad Funcional
20-60 KDa
10% prot solubles
E. coli
Amortiguación efectos Mutacionales
EFECTO
SOBREEXPRESIÓN
INTRODUCCIÓN
MORFOLOGÍA DE LAS COLONIAS
TASAS DE CRECIMIENTO
PRESENCIA PLÁSMIDO pGro7 y SOBRE-EXPRESIÓN GroEL
5,4 Kb
pGro7
~65kDa

Deleciones
Inserciones
SNPs
Región Intergénica No codificante

Región Génica Codificante
SNPs Sinónimos SNPs No Sinónimos
ACUMULACIÓN DE MUTACIONES
EVOLUCIÓN CLIENTES GroEL
MUCHAS GRACIAS
POR VUESTRA ATENCIÓN

María Prats Escriche
RESULTADOS
DETERMINAR CAPACIDAD TAMPONADORA DE MUTACIONES DE GroEL
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