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Reacción en Cadena de la Polimerasa

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by

Ricardo Morrison

on 5 February 2015

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Transcript of Reacción en Cadena de la Polimerasa

¿Cómo funciona la reacción?
INTRODUCCIÓN
¿Qué es la PCR?
¿Qué elementos químicos se necesitan?
HIBRIDACIÓN
EXTENSIÓN
En esta etapa la tag polimerasa actúa sobre el complejo molde-primers y empieza su función catalítica a una velocidad muy rápida; dNTP´s complementarios para crear las cadenas completas de ADN.
DESNATURALIZACIÓN
REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA
La PCR surgió en 1971 cuando Gobind Khorana describe la técnica al explicar la replicación de un fragmento de ADN usando dos iniciadores (Kleppe et al. 1971). Pero fue en 1983 cuando Kary Mullis y sus compañeros de la compañía californiana Cetus Corporation la llevaron a cabo por primera vez mientras trabajaban en la fabricación de oligonucleotidos y en el uso de iniciadores para la secuenciación de ADN.
PCR son las siglas en inglés de Polymerase Chain Reaction. Es la reacción enzimática in vitro en cadena de la polimerasa que amplifica millones de veces una secuencia específica de ADN durante varios ciclos repetidos en los que la secuencia blanco es copiada fielmente.
* ADN
* Taq ADN polimerasa
* Vent
* Primers (dNTP´s)
* Ion Mg
* Buffer
* Agua
Las cadenas de DNA son calentadas a 95°C durante 20 a 30 segundos y al final de la desnaturalización son separadas.
En esta etapa los primers se alinean al extremo 3´ del templado (molde) previamente separado e hibridan con su secuencia complementaria (50 - 60°)
RESUMEN
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