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TCC

Detecção de anticorpos anti-n. caninum CE/PI
by

Nicholas Vale

on 12 December 2013

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Transcript of TCC

UNIVERSIDADE ESTADUAL VALE DO ACARAÚ
CENTRO DE CIÊNCIAS AGRÁRIAS E BIOLÓGICAS
CURSO DE GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
EMBRAPA CAPRINOS E OVINOS
Nicholas do Vale
Anticorpos anti-
Neospora caninum
de caprinos em unidades produtoras da região sudoeste do estado do Piauí

Sobral
Dezembro, 2013
OBJETIVO
Detectar a presença de anticorpos anti-
Neospora caninum
em caprinos pertencentes a propriedades rurais do Sudoeste Piauiense
PROBLEMA
Qual a importância da Neosporose em animais de produção?
JUSTIFICATIVA
METODOLOGIA
APRESENTAÇÃO E
ANÁLISE DOS DADOS
DA PESQUISA

AGRADECIMENTOS
DELINEAMENTO DA PESQUISA
ÁREA DE ESTUDO
MÉTODO DE COLETA DE DADOS
Dessa forma, a realização de estudos sobre a infecção por
N. caninum
no Piauí, vem complementar o ciclo de estudos iniciados pela Embrapa Caprinos e Ovinos
Edital n° 64/2008 - CNPq/MAPA/DAS Projeto intitulado:
“Estudo Zoossanitário da Caprinocultura e da Ovinocultura Tropical:
Epidemiologia, riscos e impacto econômico das enfermidades”
Ferramentas epidemiológicas para subsidiar

Estratégias de prevenção, controle e erradicação de doenças nos animais de interesse comercial

Estudos sócio-econômicos relacionados ao impacto de enfermidades nos rebanhos
Da natureza da pesquisa
Da abordagem do problema
Dos objetivos da pesquisa
Dos procedimentos técnicos
Básica
Quantitativa
Descritiva
Diagnóstico laboratorial
AMOSTRAGEM
Não probabilística, com número mínimo de amostras calculado estatisticamente conforme Astudillo (1979), estabelecendo a coleta de 240 amostras sorológicas de caprinos
COLETA DAS AMOSTRAS
Janeiro de 2010 a Janeiro de 2011
UNIVERSO AMOSTRAL
Propriedades listadas pelas associações de criadores de caprinos leiteiros, Secretarias de Agricultura, Agências de Defesa Agropecuária e por técnicos das empresas de extensão
EXAME SOROLÓGICO
RIFI
Lâminas marcadas com antígenos de
N. caninum
(cepa JPA-1)

Triagem na diluição de 1:50

Conjugado anti-IgG caprino instilado em todas as cavidades das lâminas

Lâminas com glicerina e lamínula, foram estocadas a 4 ºC até a leitura

Controles negativo e positivo

Todas as amostras positivas foram tituladas em diluições sequenciais na base dois, até 1:800

Leitura em microscópio epifluorescente com objetiva de 40x

As reações com título >50 foram consideradas positivas, evidenciando taquizoítos com fluorescência periférica total mínima de 50%
Tabela 01: Prevalência de anticorpos anti- N. caninum em caprinos por propriedade analisada no sudoeste piauiense, pela RIFI (>1:50)
RESULTADOS
APLICAÇÕES DO ESTUDO
CONCLUSÃO
RESULTADOS
PERSPECTIVAS
LINHAS DE AÇÃO
Qual a importância da Neosporose em animais de produção?
PRIORIDADES
ESTRATÉGICAS
INTRODUÇÃO
A neosporose é uma doença parasitária causada pelo
Neospora caninum.

Destaque como uma importante doença reprodutiva.

Diminuição na produção de leite e aborto entre o 3 - 9 mês de gestação.

Andreotti (2001), quantificou os prejuízos causados pelo protozoário na indústria leiteira.

Presença da infecção em vários animais de produção.

Para se estabelecer um controle efetivo da neosporose e que sejam avaliados os possíveis danos à pecuária brasileira, faz-se necessário o conhecimento da real situação epidemiológica dessa enfermidade.
Dubey et al. (2002) redescreveram o
N. caninum
, diferenciando-o do
T. gondii
.
Regiões de clima tropical e subtropical, zonas de clima temperado

Encontrado em mais de 15 países

No Brasil, foi comprovada em todas as regiões geográficas

Piauí
Localizado no Nordeste Ocidental brasileiro, com clima quente e temperaturas médias oscilando entre 22°C e 33°C

A vegetação dominante é a savana, com caatinga no semiárido

Segundo o IBGE (2011), o efetivo de caprinos no Brasil foi estimado em 9,3 milhões de cabeças, onde o Piauí detinha 1,37 milhões (14,7 %)

Amostras foram coletadas em 12 propriedades rurais, pertencentes aos municípios:






ESTRATIFICAÇÃO DAS AMOSTRAS
12 MATRIZES

06 ANIMAIS JOVENS

02 REPRODUTORES
OBTENÇÃO DOS SOROS
Por meio de punção venosa

Armazenados em tubos de ensaio sem anticoagulante

Aliquotados em microtubos de
Eppendorf


Os soros foram centrifugados a 5.000 rpm por 10 min

Cada amostra foi acondicionada à temperatura de -18ºC até a realização das provas imunológicas
REFERENCIAL
TEÓRICO

Em 1984
Estruturalmente o
N. caninum
pode se apresentar de várias formas.

Taquizoítos e bradizoítos.

Oocistos são as formas liberadas nas fezes dos hospedeiros definitivos para o ambiente.

Sob certas circunstâncias, os bradzoítos podem converter-se em taquizoítos, que proliferam assexuadamente, promovendo a infecção fetal ou causar lesões.

Diferem do
T. gondii
por possuir de 1 a 4 mm de espessura de parede

HISTÓRICO
ETIOLOGIA
HOSPEDEIROS
Definitivo: cães e coiotes

Intermediário: bovinos, caprinos, suínos, cervídeos, aves, búfalos, raposas e camelos
DISTRIBUIÇÃO GEOGRÁFICA
Exame feito a partir de material coletado no aborto, além de sorologia

Coletar amostras do cérebro, coração, fígado, medula espinhal e músculos esqueléticos para exames histopatológicos, além de fluídos corporais e sangue para provas sorológicas.

A confirmação do diagnóstico é feita pela imunohistoquímica.

Para avaliar exposição e o risco de infecção do rebanho, são realizados testes como RIFI, ELISA e teste de aglutinação indireta.
DIAGNÓSTICO
TRATAMENTO E CONTROLE
Estimativa de prevalência da infecção no rebanho

Ainda não existe vacina para prevenir abortos por
N. caninum
, assim como não é possivel eliminar os oocistos dos cães

Bloqueio da transmissão entre cães e animais de produção

Deve-se realizar testes sorológicos nos animais antes de introduzi-los no rebanho
Ciclo de vida do
Neospora caninum
. (Adaptado de DUBEY,1999)

Orientador: Dr. Antonio Cezar Rocha Cavalcante
Co-orientador: Dr. Luis da Silva Vieira
Pesquisadores Embrapa caprinos e Ovinos
Determinar as perdas produtivas decorrentes de abortos de etiologia desconhecidas
Os rebanhos de caprinos da região Sudoeste Piauiense encontram-se expostos a ação do
N. caninum
, podendo apresentarem perdas reprodutivas em decorrência dessa parasitose.
Potencial zoonótico

Correlação dos aspectos econômicos com a perda de leite e abortamentos nos rebanhos

O fato da enfermidade não ser visivelmente observada
Fonte: MAPA DO PIAUÍ. Mapa do Piauí. Mapas dos Estados do Brasil
<http://www.apolo11.com/mapas.php?mapa=pi >
ANÁLISE ESTATÍSTICA
Foi realizado uma análise descritiva das amostras, destacando a prevalência para cada propriedade avaliada e os parâmetros de sexo e idade
FATORES
DE RISCO
Identificar os fatores de risco para neosporose em unidades produtoras de caprinos da região do Piauí
PERDAS
PRODUTIVAS

Permitir ao produtor acesso à informações técnicas que permitam um maior rendimento produtivo da atividade
ACESSO AO
PRODUTOR
Realizar estudos avançados que permitem o controle mais efetivo dessa enfermidade
Avaliar a possível correlação entre a positividade para neosporose com a presença de canídeos na propriedade
OUTROS
ANIMAIS
Em 1988
Década de 90
N. caninum
era implicado como um dos principais causadores de aborto em bovinos de praticamente todo o mundo (ANDERSON et al., 1991; DUBEY, 1999a).
Dubey et al., sugeriram um novo gênero e espécie, classificado dentro do filo Apicomplexa, família Sarcocystidae, o
Neospora caninum
. Encontrados em cistos teciduais de cães, cuja morte foram atribuídas ao
T. gondii
.
na Noruega, Bjerkas et al. identificaram um protozoário semelhante ao
Toxoplasma gondii
em cães, porém sem a detecção de anticorpos.
Ano 2002
Fêmeas: 89,5% (n=17)
Machos: 10,5% (n=2)
Matrizes: 73,7% (n=14)
Animais Jovens: 26,3% (n=5)
Titulação 1:50 = 89,47% (n=17)
Titulação 1:100 = 10,53% (n=2)
DA PROCEDÊNCIA DAS AMOSTRAS
75 % das
propriedades estudadas foram positivas
GILBUÉS
4 PROPRIEDADES

80 AMOSTRAS EXAMINADAS

7 POSITIVAS (8,8 %)

PREVALÊNCIA 5,0 - 15,0 %
MONTE ALEGRE
3 PROPRIEDADES

60 AMOSTRAS EXAMINADAS

9 POSITIVAS (45,0 %)

PREVALÊNCIA 5,0 - 30,0 %
REDENÇÃO DE GURGUÉIA
3 PROPRIEDADES

60 AMOSTRAS EXAMINADAS

2 POSITIVAS (10,0 %)

PREVALÊNCIA 0 - 10,0 %
SÃO GONÇALO
1 PROPRIEDADE

20 AMOSTRAS EXAMINADAS

1 POSITIVA (5,0 %)

PREVALÊNCIA 5,0 %
BOM JESUS
1 PROPRIEDADE

20 AMOSTRAS EXAMINADAS

0 POSITIVAS (0 %)

PREVALÊNCIA 0 %
A prevalência encontrada neste estudo mostrou que a infecção por este parasita encontra-se amplamente difundida entre os rebanhos, apesar das diferenças observadas:
DISCUSSÃO
Figliuolo et al. (2004): 6,34 % no estado de São Paulo

Modolo et al. (2008): 19,77 % também em São Paulo

Uzêda et al. (2007): 15,0 % no estado da Bahia

Moraes et al. (2011): 17,39 % de caprinos do Oeste maranhese

Lima et al. (2008): 28,6 % no município de Mossoró, RN
UNIVERSIDADE ESTADUAL VALE DO ACARAÚ
CENTRO DE CIÊNCIAS AGRÁRIAS E BIOLÓGICAS
CURSO DE GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
EMBRAPA CAPRINOS E OVINOS
Anticorpos anti-
Neospora caninum
de caprinos em unidades produtoras da região sudoeste do estado do Piauí

Nicholas do Vale
Concludente do Curso de Biologia
nicholasdovale@gmail.com

*Devido ao manejo adotado, controle da população de canídeos e fatores climáticos
Até o momento, não há relatos da presença de
N. caninum
em humanos, apesar de estarmos altamente expostos devido o hospedeiro definitivo ser o cão, o que pode levar a neorporose a ser uma questão de saúde pública também.
Bom Jesus
Gilbués
Monte Alegre
Redenção de Gurguéia
São Gonçalo
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