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ablación experimental

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by

Karla Ramirez

on 6 March 2014

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Transcript of ablación experimental

ablación
experimental

Edgar Armenta
Ana Karen Hernández
Manuel Noriega
Karla Ramírez
¿Qué es?
 Es un método de investigación para estudiar funciones cerebrales:
Se destruye una parte del encéfalo y se evalúa la conducta subsecuente del animal.

El investigador destruye algo de tejido y una parte del cerebro. El experimento en general es llamado:
Lesión cerebral
"Estudio de lesión"
¿Qué se busca?
Deducir en qué área del cerebro se encuentra "X" función, basandose en las conductas del animal.
Objetivo:
Descubrir las funciones que realizan diferentes regiones cerebrales y cómo estas funciones se combinan para determinadas conductas.
¿Cómo se hacen las lesiones?
Se destruyen las partes del encéfalo
justo debajo del cráneo:

1. Se anestesia el animal
2. Se corta el cuero cabelludo
3. Extracción de una parte del cráneo
4. Se corta la duramadre y se deja la corteza al descubierto
5. Se usa un dispositivo de succión para aspirar tejido cerebral situando una pipeta de vidrio sobre la superficie del encéfalo succionando mediante una bomba de vacío unida a la pipeta.
Pasos:
Lesiones destruyen somas y axones.
Ácido caínico
Estimula las neuronas hasta que mueren.
"Lesiones
excito tóxicas"
Tipos de lesiones
Específicas
6-hidroxidopamina (6 HD)
Temporales
La actividad de determinada
región del encéfalo.
Muscimol GABA
Reversibles
Enfriamiento del tejido nervioso para suprimir actividad neural.
Cirugía estereotáxica
Se usa para situar la punta de un electrodo o cánula en un lugar preciso del encéfalo de un animal.
Aparato Estereotáxico
Inmoviliza la cabeza del animal en posición establecida y un brazo que desplaza el electrodo en los 3 ejes espaciales del cerebro:
1. Anterior-posterior
2. Dorsal-ventral
3. Lateral-medial
Sus partes:
Un soporte para la cabeza (mantiene el cráneo del animal en la ubicación adecuada)
Un soporte para el electrodo
Un mecanismo de graduación (por el que se mueve el soporte en distancias ponderadas por los 3 ejes).
En humanos.
Se usa por neurocirujanos para lesiones subcorticales, por ejemplo para el tratamiento del Parkinson.
En ratas.
Pasos:
1. Se obtienen las coordenadas a partir de un
2. Se anestesia al animal
3. Se coloca el aparato y se le hace una incisión en el cuero cabelludo.
4. Se localiza el (la unión de fontanelas)
5. Se marcan los números apropiados en el aparato de estereotaxia.
6. Se taladra el cráneo.
7. Se introduce el dispositivo en el encéfalo hasta las coordenadas.
8. La punta del electrodo esta donde se quería que estuviese y se practica la lesión.

atlas estereotáxico.
bregma
Métodos histológicos
*Microscopio electrónico: capaz de ver las vesículas sinápticas y detalles de orgánulos celulares.
1. Un haz de electrones va de un lado a otro del tejido a examinar.
2. Una sombra se proyecta en la placa fotográfica y se revelan los electrones.
3. Se localiza la lesión.
Fijación:
Se destruyen las enzimas autoliticas y se convierte el tejido a mejores condiciones, este fijador en el que se sumerge es y endurece el tejido.
formalina
Perfundición:
Se extrae la sangre y se sustituye por una solución salina diluida.
Micrótomo
Se usa para seccionar el tejido, consta de:
Una cuchilla
Plataforma para colocar el objeto
Mecanismo que hace que la cuchilla avance.

Las secciones se montan en portaobjetos, se cubren con líquido transparente y se coloca un cubre objetos encima para examinarse en el microscopio.
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